Analyse multicentrique phénotype-génotype des taches vasculaires pour optimiser le traitement à l'aide de la tomographie par cohérence optique

Les taches vasculaires, communément appelées « taches de naissance du vin de Porto », sont des anomalies vasculaires qui affectent 0,3 à 0,5 % des nouveau-nés ; ils ont un impact sur la qualité de vie en raison de la prolifération des tissus mous, de la nodularité et de la défiguration stigmatisante qui change la vie. Le traitement au laser est la norme de soins et repose sur la photocoagulation des vaisseaux. Pourtant, moins de 25% seraient entièrement dégagés; la raison de cette absence de réponse est mal connue. Récemment, des mutations en mosaïque dans les gènes qui contrôlent la régulation du cycle cellulaire, notamment GNAQ, GNA11, PiK3CA et d'autres, ont été élucidées comme cause génétique de ces taches de naissance. Cette découverte a transformé notre compréhension fondamentale de leur physiopathologie. Il fournit une explication moléculaire de la réactivité limitée au laser, car ces gènes partagent des voies oncogènes qui entraînent une prolifération et une croissance cellulaires synchrones et étroitement régulées. Plus important encore, cette découverte a débloqué le potentiel d'utiliser le blocage pharmacologique des voies en aval activées pour améliorer les résultats.

Cette proposition vise à utiliser une nouvelle imagerie pour mettre en évidence les différences dans la vascularisation des taches de naissance vasculaires avec le génotypage et le phénotypage clinique apparié profond, et à créer un algorithme laser ciblé basé sur le génotype et l'âge. Dans un petit sous-ensemble de patients dont le génotypage GNAQ/GNA11 a été confirmé, les chercheurs utiliseront le profilage unicellulaire du transcriptome spatial des tissus affectés pour favoriser la découverte de médicaments. À l'issue de ce projet, les chercheurs auront affiné les corrélations génotype-phénotype améliorées par une nouvelle imagerie des tissus ciblés, élucidant les différences dans le système vasculaire par génotype, ce qui peut accélérer les traitements basés sur la précision pour prévenir la défiguration et améliorer la qualité de vie. Ces résultats fourniront des données essentielles pour la mise en œuvre d'essais cliniques qui feront passer les paradigmes de traitement d'une modalité de traitement destructrice unique et inefficace à une intervention pharmacologique ciblée couplée à la lumière.

Les enquêteurs émettent l'hypothèse que l'élimination des taches de naissance du vin de Porto nécessitera : 1) une approche basée sur la précision, y compris une dosimétrie laser optimale informée par une nouvelle imagerie angiographique, l'âge et le génotype, et 2) un blocage pharmacologique spécifique à la voie des voies activées, informé par l'investigation de effecteurs en aval. L'objectif à long terme est de faire passer les paradigmes de traitement d'une seule modalité destructrice inefficace à une source laser ciblée couplée à une thérapie topique ciblée.

Objectif 1 : Corréler le génotype avec le phénotype clinique

• 1.1 Corréler le génotype avec le phénotypage complet des participants disponibles dans les strates A et les strates B. Lorsqu'il est stratifié par âge des participants, l'hypothèse est que le génotype influencera la taille des vaisseaux, avec une plus grande activation du cycle cellulaire associée à un diamètre et une profondeur médians des vaisseaux plus grands sur l'OCT.
• 1.2 Corréler le phénotype clinique avec la tomographie par cohérence optique dynamique (OCT) dans les strates A et B. Les enquêteurs émettent l'hypothèse que l'âge des participants sera le plus grand prédicteur de la taille et de la profondeur médianes des vaisseaux sur l'OCT. Les chercheurs s'attendent à voir la diversité dans l'architecture et la structuration du système vasculaire en fonction du génotype. L'hypothèse est que les patients mutés GNAQ présenteront une distorsion vasculaire significative, avec un abandon et une dilatation vasculaire, comme cela a été rapporté dans la littérature OCT oculaire chez les patients atteints du syndrome de Sturge Weber.
• 1.3 Recueillir les résultats quantitatifs et qualitatifs chez les participants traités par OCT pour évaluer l'expérience des participants en utilisant cette modalité adjuvante dans le traitement de la strate B.
• 1.4 Intégrer les données OCT pour créer un algorithme laser ciblé par âge et/ou génotype pour optimiser la photo-coagulation des cellules mutées dans Strata B.

Objectif 2 : Déterminer le mécanisme moléculaire des taches vasculaires faciales pour développer des thérapies spécifiques à la voie

• 2.1 Chez 12 à 15 participants présentant des mutations GNAQ/GNA11 confirmées dans la strate A, la strate B ou la strate C, effectuer des biopsies à partir de tissus affectés et normaux, prélever des échantillons de sang et de salive, afin de faciliter une analyse transcriptomique spatiale impartiale à l'aide du système Visium 10x.
• 2.2 Identifier de nouvelles cibles spécifiques au génotype en aval grâce à une analyse transcriptomique spatiale impartiale avec une évaluation ciblée de 3 voies pour lesquelles des inhibiteurs topiques sont actuellement en développement (PiK3CA, mTOR et MEK/ERK).

Objectif 3 : Évaluer les résultats du laser dans le traitement du PWS (Strates B & C)

• 3.1 Quantifier l'amélioration du PWS des participants stratifiée selon l'âge d'initiation au laser, les paramètres de traitement au laser et le phénotypage clinique profond (emplacement anatomique, morphologie, OCT et génotype). L'intention de cet objectif est de déterminer si l'initiation précoce du laser (avant l'âge de 1 an) entraîne de meilleurs résultats, et si la réactivité au laser diffère selon l'emplacement anatomique, la morphologie/couleur ou le génotype. L'hypothèse est qu'un traitement plus précoce (débutant avant 2 ans) entraînera une amélioration de la clairance, plus durable que chez ceux qui commencent le laser après 2 ans. Dans un petit sous-ensemble de patients avec un génotypage disponible, les chercheurs étudieront la réactivité de la maladie au laser en fonction du génotype et de l'emplacement. L'hypothèse est que le PWS associé à PiK3CA répondra mieux que les autres génotypes (GNAQ, GNA11, RASA1, EPHB4), et que le PWS de la face latérale et du milieu du front seront les localisations anatomiques les plus réactives.
• 3.2 Étudier les résultats significatifs rapportés par le patient et/ou les parents chez les sujets traités au laser. Les enquêteurs stratifieront par répondeurs au laser par rapport aux non-répondeurs. L'hypothèse est que les répondeurs auront amélioré la qualité de vie. Enfin, les chercheurs évalueront de manière prospective les résultats rapportés par les patients concernant le traitement au laser, y compris la satisfaction des patients, la récidive et la douleur procédurale (tel que rapporté par le patient et/ou le parent chez les enfants de moins de 7 ans). Les enquêteurs émettent l'hypothèse de taux élevés de récidive et d'inconfort chez les patients.

Conception de la recherche:

Une fois le consentement éclairé obtenu, un examen visuel de la peau sera effectué par le dermatologue de l'étude pour documenter les résultats cutanés et des photographies de la ou des zones touchées seront prises pour cette étude. Les photographies serviront à déterminer les corrélations génotype-phénotype et seront partagées avec le centre coordinateur.

Les photographies seront stockées électroniquement de manière sécurisée conformément à la loi HIPAA, conformément aux politiques de chaque site.

Au moment de l'inscription ou lors d'une visite ultérieure, mais une seule fois au cours de la participation à l'étude, les sujets peuvent accepter de fournir l'un des échantillons suivants non médicalement nécessaires pour les études génétiques : échantillon de sang, échantillon de salive, biopsie cutanée à l'emporte-pièce (peau normale ou peau affectée), échantillons de tissus chirurgicaux, échantillons de tissus inclus en paraffine (provenant de chirurgies antérieures). Le prélèvement de l'un de ces échantillons est facultatif.

Au moment de l'inscription, les participants seront placés sur Strata A - mesures OCT ponctuelles ou Strata B - mesures OCT en série prises en association avec un traitement au laser standard, ou Strata C - évaluation en série avec traitement au laser standard sans utilisation de l'OCT.

Les participants qui passeront à la strate A auront des mesures OCT uniques de leur tache vasculaire s'ils choisissent de ne pas/ne sont pas éligibles pour/ont déjà subi un traitement au laser standard pour leur tache vasculaire au moment de l'inscription. L'indication pour la strate A est que certains patients choisiront de ne pas subir de traitement au laser, en particulier s'ils ont déjà été traités de manière intensive au laser ou s'ils présentent une coloration vasculaire rose clair stable. Les participants qui passent à Strata C seront traités au laser pour la norme de soins et suivis sans l'utilisation d'OCT en série.

Les participants qui passeront à la strate B subiront des mesures OCT en série de leur coloration vasculaire avant le début du traitement au laser standard. L'OCT sera effectué avant chaque traitement au laser standard si le participant a choisi de suivre un traitement au laser standard comme traitement de sa tache vasculaire au moment de l'inscription.

Les participants qui sont inscrits à la strate A et qui subissent une mesure OCT unique peuvent passer à la strate B si, ultérieurement, ils décident de subir un traitement au laser standard pour leur tache vasculaire. Ces participants ne pourront toujours participer qu'une seule fois aux collections d'échantillons ci-dessus au cours de leur participation. La transition de la strate A à la strate B n'est pas considérée comme une deuxième inscription.

Tous les participants resteront à l'étude jusqu'à la fin de l'étude. Les participants pourront effectuer des prélèvements d'échantillons à n'importe quelle visite pendant l'étude.

Le phénotypage clinique des participants sera augmenté grâce à l'utilisation de l'OCT dynamique pour caractériser le diamètre moyen et la profondeur des vaisseaux sanguins. L'OCT est une technologie non invasive spécifique à la peau qui permet une identification rapide du diamètre, de la densité et de la profondeur des vaisseaux sanguins du mode dans la zone scannée. C'est effectivement comme placer une sonde à ultrasons sur la peau du participant. La sonde mesure 6 x 6 mm et, dans les 60 secondes suivant sa mise en place, fournit le diamètre de vaisseau sanguin le plus courant (mode) détecté, ainsi que la profondeur du plexus vasculaire. L'OCT doit être indolore et présenter un risque minimal pour le participant.

Pour les participants sur Strata B, l'OCT sera effectué au départ et avant chaque traitement au laser standard. Les repères anatomiques pour le choix du placement OCT seront décidés par le médecin de l'étude, dans le but d'imager la zone la plus proéminente de la tache. Dans un sous-ensemble de participants, les mesures OCT seront également prises après le traitement au laser standard. Les repères anatomiques à choisir dans ce sous-ensemble seront décidés par le médecin de l'étude ; la zone la plus claire de la tache sera également imagée pour contraster les différences entre le diamètre du vaisseau, car cela aurait un impact sur le choix des paramètres laser optimaux dans différentes zones de la tache. Le nombre de zones dans lesquelles l'OCT sera effectué sur la tache vasculaire sera déterminé par le médecin traitant en fonction de la taille de la tache vasculaire. Les paramètres laser modifiés utilisés pour le traitement au laser standard de soins seront guidés par l'utilisation de la théorie de la photothermolyse sélective pour déterminer la durée d'impulsion optimale du laser sur la base de la mesure OCT. Cela respectera les normes de soins acceptables et sera finalement à la discrétion du chirurgien au laser. Le médecin de l'étude visera également à mesurer les mêmes zones avant chaque visite, en s'attendant à ce que la taille de la tache soit susceptible de varier en fonction de la résolution du traitement de la tache vasculaire.

Pour les participants de la strate B, un questionnaire sera rempli jusqu'à 5 fois par le participant et/ou par le parent/tuteur des participants âgés de 0 à 17 ans pendant l'étude. Le questionnaire demandera aux participants et/ou à leur parent/tuteur ce qu'ils pensent des résultats du traitement au laser et ce qu'ils pensent de l'utilisation de l'OCT en plus de leur traitement standard.

Pour les participants à Strata C (qui subissent un laser dans le cadre de la norme de soins sans OCT), l'équipe de l'étude demandera au parent/et/ou au sujet de compléter les résultats rapportés par le patient pendant l'étude. L'intention de ces questionnaires est de saisir des résultats significatifs pour les patients avec des mesures PROMIS validées liées à l'efficacité du laser pour leurs taches de vin de Porto.

Au moment de l'inscription des participants à Strata C et/ou après le premier laser d'un participant, les parents/tuteurs rempliront un questionnaire de satisfaction des parents. Les enquêteurs effectueront une évaluation de suivi au laser et une échelle visuelle analogique lors des visites du participant pour quantifier l'amélioration de la tache de vin de Porto par rapport au départ. Tous les 6 mois, le patient ou le parent/tuteur remplira le formulaire d'évaluation laser du patient/famille.