Reproduktív öregedés és obstruktív alvási apnoe

• 1. hipotézis: A hypothalamus gonadotropin-releasing hormon (GnRH) kiáramlásának csökkenése idősebb férfiaknál a luteinizáló hormon (LH) pulzusok csökkent tömegének hátterében áll, és tovább csökken a kezeletlen OSA-ban szenvedő férfiaknál. A vizsgáló célja a hipotalamusz működésének tesztelése a pulzáló LH-szekréció csökkenésének vizsgálatával egy szelektív GnRH-receptor antagonista, a ganirelix szubmaximálisan gátló dózisára olyan férfiaknál, akiknél nem kezeltek (pl. aktív) és kezelt OSA. Ez a csökkenés az életkor függvényében visszafejlődik, és a lejtő jelentős csökkenése aktív OSA-val (a kezelt OSA-val szemben) a betegség gyengülését jelzi.
• 2. hipotézis: A kezeletlen OSA tovább gyengíti az LH tesztoszteron negatív visszacsatolásos kontrolljának korral összefüggő erózióját. A kutatók célja az agyalapi mirigy működésének felmérése az LH-szekréció mennyiségi meghatározásával kényszerített androgénmegvonás esetén aktív és kezelt OSA-ban szenvedő férfiaknál. Az életkori regresszióval kapott meredekségeket összehasonlítjuk.
• 3. hipotézis: A Leydig-sejtek károsodott szteroidogenezise hipoandrogenémiát okoz idősebb férfiakban, de a kezeletlen OSA hatása emberekre teljesen ismeretlen. Ezért a kutatók célja a here működésének felmérése a tesztoszteron szekréció vizsgálatával kísérletileg kontrollált pulzáló i.v. rekombináns humán LH infúziója maximális GnRH-receptor blokád mellett, aktív és kezelt CPAP-ban szenvedő férfiakban. A lejtők ismét összehasonlításra kerülnek.

Ennek megfelelően a közvetlen cél az LH és a tesztoszteron szekréció mind a négy hipotalamusz-, hipofízis-, here- és visszacsatolás-függő szabályozásának jellemzése, hogy meghatározzuk, melyik elsődleges mechanizmus(ok) fordulnak elő és hajt(nak) változásokat a többi lókuszban, bármely adott tárgyat. Ennek a kihívásnak a megválaszolása érdekében a kutatók egy innovatív átfogó analitikai platformot vezetnek be, amely megfelelően testesíti meg az időkésleltetett, dózisfüggő és nemlineáris jelátvitelt a GnRH, LH és tesztoszteron között. A szükséges életkori kontinuum biztosítása érdekében a 30-70 éves önkénteseket élettizedenként 3-4 férfival (összesen 16 férfival) vizsgálják. A betegség hatásainak felmérése érdekében a vizsgálók összehasonlítják az aktív OSA-ban (ál-terápiában) szenvedő férfiak életkorának regresszióját, és ugyanazokat a férfiakat, akiket valódi CPAP-val kezeltek, és ha lehetséges, 16 másik, egyéni életkornak és BMI-nek megfelelő mintával. ±2,5 év és ±2,5 kg/m2) normál kontrollok, amelyeket a Rochester-Minnesota (MN) államban azonosított, 100 fős nagyobb csoportból választanak ki. A tárgyon belüli keresztezési tervezési kontrollok a lehetséges ismert és ismeretlen zavaró tényezőkre, de a BMI is korlátozott lesz, és kizárja a diabetes mellitusban szenvedő férfiakat (HbA1c alapján).

A vizsgálati alanyok toborzása: 16, OSA-ban szenvedő férfit vesznek fel 30-70 éves korig, ugyanazokkal a felvételi kritériumokkal és korosztályokkal, amelyeket előzetes adataink előállításához használtunk 42. Ezenkívül a testtömeg-indexet 30-35 kg/m2-re korlátozzák. Az önkénteseket a Kaliforniai Egyetem, Los Angeles (UCLA) kikötői és Santa Monicai egészségügyi központjaiból, valamint hirdetés útján toborozzák majd.

Vizsgálatterv: Véletlenszerű, színlelt, kontrollált keresztezett vizsgálat, mindegyik 3 hónapos periódusban, egy hónapos kimosással. Ez a kialakítás egy nemrégiben befejezett tanulmányt megismétel. Egy másik, Kaliforniában (és másutt az Egyesült Államokban) nemrégiben befejezett tanulmány 6 hónapos színlelt kezelést tartalmazott, és az 1105 felnõtt közül sokan súlyos OSA-ban szenvedtek.

A férfi ivarmirigy tengely dinamikus vizsgálata: A beiratkozott személyek ismétlődő perifériás vérmintát vesznek (1,5 ml) 10 percenként 5 órán keresztül 08:00 és 1300 óra között [2 ambuláns protokoll], 15 órán át éjszakán át (2200-1322 óráig) óra éjszaka (1500-1300). A 2 fekvőbeteg vizit során poliszomnográfia (2200-0600h) történik. Egy terminál i.v. GnRH (100 ng/kg) bolus injekciót adnak be 1100 órakor mind a 4 vizit során az endogén GnRH válasz kalibrálására. A ganirelixet (vagy sóoldatot) 2000 vagy 1500 órakor adják be: a hipotalamusz működését az endogén GnRH részleges (szubmaximális) ganirelix blokádjával tesztelik. Az orális gyógyszerek (Δ) placebónak minősülnek, kivéve az agyalapi mirigy vizsgálatát, amikor az LH androgénkiürülésre adott válaszát a ketokonazol (KTCZ) és a dexametazon (DEX) mellékvese-mentő hatása kényszeríti ki. Itt a KTCZ-t (1000 mg) és a DEX-et (0,75 mg) 2000 órakor, a KTCZ-t (400 mg) 08:00-kor és a DEX-et (0,75 mg) 13:00-kor adják be. A herefunkciót egy rögzített exogén LH-ingerre adott tesztoszteron válasz alapján értékelik: 6 rh LH impulzus (egyenként 18,75 NE) 2 óránként. 2300 órától az endogén LH maximális ganirelix blokádja alatt.

Statisztikai elemzés: Az életkor és a betegség hatását az egyes mechanikai kimenetelekre egy ismételt mérési vegyes modell felépítésével értékeljük, amely magában foglalja az OSA-t (kezelt versus kezeletlen), az életkort és az OSA*életkor interakcióját. Az interakciós kifejezés statisztikai szignifikanciája azt jelzi, hogy a betegségfolyamat (OSA) megváltoztatja-e ezen eredmények életkorral összefüggő csökkenését (pl. felméri a két feltétel között a lejtők közötti különbséget). A tárgyon belüli tervezésnek csökkentenie kell a szórást és növelnie kell a teljesítményt. Feltételezve, hogy a Rochester MN-ben egy megfelelő, kényelmes kontrollcsoport összeállítható, a kutatók ezenkívül az alanyok közötti vegyes modelleket is összeállítják, ahol a betegség hatása a kezeletlen OSA a normál kontrollokhoz képest, és a kezelési hatás összehasonlítja a kezelt OSA-t a normál kontrollokkal. Az előbbi megerősíti a betegség hatásait, az utóbbi pedig azt, hogy a 3 hónapos CPAP-kezelés teljesen visszafordítja-e a deficitet a normális állapotba.

Erőelemzés: Az előzetes adatok arra utalnak, hogy a kezeletlen OSA gyengíti a tesztoszteron visszacsatolást, ami az LH-impulzus gyengébb felszabadulását eredményezi. Ketokonazol kasztráció esetén az LH pulzusfrekvencia és az életkor közötti korreláció normál férfiaknál -0,50. Egy 16 férfiból álló minta 80%-os ereje kétirányú á=0,05-tel rendelkezik, hogy észlelje ennek a korrelációnak a gyengülését 1,00-al. Összehasonlításképpen a kutatók az 1,35-ös korreláció egyharmadával nagyobb gyengülését figyelték meg. Tehát a teljesítmény megfelelő. Ez a becslés konzervatív, mivel az alanyon belüli vizsgálati terv, amely csökkenti a variabilitást, nem került beépítésre, és a ketokonazol által kiváltott tesztoszteron kimerülési paradigma az agyalapi mirigy működésének értékelésére tovább élesíti az életkor regresszióját, mivel az egyes egyének vér tesztoszteron-koncentrációjának változékonysága csökken. Ez utóbbit normál férfiaknál igazolták, és igaznak kell lennie az OSA-ban szenvedő férfiakra is.

Eredmények: A GnRH kiáramlás értékeléséhez (1. cél), a válaszváltozó a ganirelix által elnyomott (analitikailag rekonstruált) bazális LH szekréció. A gonadotrop válaszkészség értékeléséhez a releváns végpont az exogén GnRH ingert követően kiválasztott LH tömege. A visszacsatolás felszabadulásának mértékére az androgén-kivonás által kiváltott LH-impulzus-frekvencia emelkedés mértéke alapján lehet következtetni (2. cél). A Leydig-sejtek érzékenységét a rekombináns humán LH hat (pszeudo-steady-state) impulzusa közül az utolsó kettőre válaszul elért tesztoszteron-szekréció sebességének analitikai rekonstrukciója határozza meg (3. cél).

Egyéb eredmények: A GnRH kiáramlását rekonstruálják, és egyidejűleg kiszámítják a hipotalamusz és az agyalapi mirigy tesztoszteron visszacsatolását a korábban leírtak szerint. Ezek az adatok vegyes modellel elemezhetők a statisztikai elemzésben leírtak szerint (korábban). A pulzáló LH-szekréció a pubertás kezdetén igazodik a lassú hullámú alváshoz, ami az alvási architektúrát befolyásolja a pubertás időzítésében. A vizsgálók ugyanazt az elemzést végzik el, mint a leírtak, összehasonlítva (Student-féle t-próbával) a lassú hullámú és a nem lassú hullámú alvás során előforduló LH-impulzusok arányát, normalizálva az egyes alvási szakaszokban eltöltött időre. A végső további eredmény a teljes tesztoszteron szekréció éjszakai vizsgálata lesz a vizsgálat első szakaszában a kontroll állapot alatt, külön-külön, és az előzetes adatokban leírt eredeti 18 férfi eredményeivel kombinálva.

Várt és alternatív eredmények: Várhatóan bebizonyosodik, hogy az OSA rontja a tesztoszteron visszacsatolást (pl. agyalapi mirigy diszfunkció), különösen az androgén kimerülése (2. cél), növeli az LH pulzus frekvenciáját és csökkenti a bazális LH szekréciót. Bár feltételezik, hogy a csökkent bazális LH szekréció az agyalapi mirigyben visszacsatolt tesztoszteron visszacsatolása miatt van, egy váratlan, de valószínű alternatív megállapítás az lenne, hogy a megváltozott GnRH kiáramlás a felelős – amit az 1. célban a GnRH receptorok fokozatos blokádjával értékelnek. Ezenkívül a közelmúltbeli analitikai újításoknak köszönhetően a vizsgálók rekonstruálhatják a tesztoszteron hipotalamusz és hipofízis visszacsatolási hatásait (2. cél), miközben egyidejűleg értékelik a GnRH kiáramlását (1. cél). Ez különösen helyénvaló, mivel az agyi permeáns versus agy impermeáns androgénreceptor-blokkolására vonatkozó előzetes adatok specifikus agyi hatásokra utalnak. Specifikus agyi hatások valószínűek, mivel az OSA időszakos hipoxiája már ismert, hogy megváltoztatja a neurokognitív képességet. Egy másik megmagyarázhatatlan eredmény az, hogy az LH relatív csökkenése OSA-val nagyobbnak tűnik, mint a tesztoszteron megfelelő csökkenése, ami a Leydig-sejtek viszonylag fokozott válaszkészségére utalhat. Valójában az időszakos hipoxia növeli a tesztoszterontermelést az elsődleges patkány Leydig-sejttenyészetekből a humán koriongonadotropin (hCG) hatására, de az OSA hatása a herék szteroidogenezisére emberben nem ismert. A 3. cél először foglalkozik ezzel a lehetőséggel fiziológiás rh LH szonda használatával. A tesztoszteron szekréció várhatóan növekedni fog a CPAP hatására. Ha nem, akkor megőrzött vagy fokozott Leydig-sejtek rh-LH-reakciója mellett (3. cél), akkor ez motiválhat egy jövőbeni hosszabb távú CPAP-vizsgálatot.

Lehetséges problémák és alternatív stratégiák: a kutatók nem számolnak toborzási problémákkal, mivel tanulmányunkban havonta egyetlen személyt kell beiratkozni 16 hónapon keresztül, azonban szükség esetén a toborzás kiterjeszthető a Westwoodra és más UCLA-hoz kapcsolódó klinikákra. Ha a keresztezési terv problémásnak bizonyul, a nyomozók 3 hónapos párhuzamos csoportos vizsgálattá alakíthatják át 32 férfit anélkül, hogy elveszítenék erejüket. A vizsgálat tartalmaz egy bejáratási időszakot, amelyben a CPAP-kompatibilitást közvetlen CPAP-gépes letöltéssel ellenőrzik, és az alanyokat kizárják, ha nem felelnek meg, mivel intenzív endokrin vizsgálatra csak 3 hónapos terápia után kerül sor. Vizsgálatunk nem függ attól, hogy be tudjunk-e vonni egy kényelmes kontrollcsoportot, ahol minden egyes kontroll ±2,5 éven belül és ±2,5 kg/m2-en belül van. A 100, 18-80 év közötti, 18-35 kg/m2 BMI-vel és jelentősebb betegségek (beleértve a diabetes mellitus-t) nélkülöző 16 kontrollt kell találni. Ha nem, a vizsgálók lazítják az illesztési kritériumokat (az intervallumok megduplázásával ±5,0 évre vagy kg/m2-re), és egyidejűleg minden esethez 2 kontrollt egyeztetnek. További problémát jelenthet, ha az LH és a tesztoszteron tesztek nincsenek összhangban, azonban a kutatók ezt közvetlenül fogják tesztelni úgy, hogy minden egyénből (összesen 16 férfiból) egyetlen egyesített mintát tesztelnek tesztoszteronra tandem tömegspektroszkópiával, LH-ra pedig immunvizsgálattal és külső vizsgálattal. szabványokat az összehasonlíthatóság érdekében.