Firme dell'RNA del sangue dell'ospite per la diagnosi della tubercolosi (RADIANT) (RADIANT)

La diagnosi tempestiva e corretta della tubercolosi è vitale per il controllo dell'epidemia globale di tubercolosi. Lo screening della tubercolosi per l'individuazione passiva dei casi si basa sui sintomi ed è limitato dalla sua sensibilità subottimale, quindi è necessario un test di triage rapido che identifichi gli individui sintomatici prima dell'indagine diagnostica di conferma. Tale test potrebbe ridurre l'onere per i sistemi sanitari e i pazienti e accelerare il rinvio, i test di conferma e il trattamento. Generalmente, non sono disponibili test idonei senza espettorato, e questo principalmente a causa della mancanza di biomarcatori. È necessario un test di triage non basato sull'espettorato poiché molte persone affette da tubercolosi, comprese quelle co-infette da HIV e quelle con malattia incipiente precoce, spesso non possono produrre espettorato di alta qualità, che la maggior parte delle diagnostiche attuali (microscopia di striscio basata sull'espettorato, micobatteri La coltura liquida della provetta dell'indicatore di crescita (MGIT) 960 e il rilevamento molecolare di Xpert MTB/RIF (Xpert) o Xpert MTB/RIF Ultra (Ultra) si basano su.

Nei pazienti sottoposti a valutazione della tubercolosi polmonare e/o extrapolmonare, sarebbe ottimale un test diagnostico basato sui biomarcatori del sangue, in quanto il sangue è facilmente reperibile. Le risposte immunitarie a M. tuberculosis (MTB) portano a modelli trascrizionali specifici solo per la tubercolosi e da allora tali modelli di firma biologica sono stati utilizzati per identificare con precisione i pazienti con tubercolosi attiva. Diverse firme diagnostiche trascrizionali del sangue sono state precedentemente descritte e questi classificatori trascrizionali del sangue hanno rilevato la tubercolosi attiva tra adulti di razza diversa negli Stati Uniti in uno studio di convalida caso-controllo. Questi biomarcatori sono i più promettenti nel prossimo futuro per soddisfare i criteri del profilo del prodotto target del test di triage dell'Organizzazione mondiale della sanità. Tuttavia, mancano dati sulle prestazioni prospettiche del mondo reale, specialmente in contesti africani ad alta TB/HIV.

Uno studio recente, che ha utilizzato pazienti reclutati dal gruppo in cui si basa questa proposta, ha fornito il primo confronto prospettico e sistematico testa a testa dell'accuratezza diagnostica di 27 firme trascrizionali del sangue per la tubercolosi attiva identificate attraverso una precedente revisione sistematica. Questo studio ha consentito di identificare le firme concise con le firme Sweeney3, Kaforou25, Roe3 e BATF2 con la massima accuratezza diagnostica. Questo studio, tuttavia, è limitato nella dimensione del campione ed è stato condotto in un singolo paese e non ha caratterizzato in modo completo i pazienti senza tubercolosi che avevano un punteggio di firma positivo. Pertanto, ulteriori studi di convalida prospettici su larga scala per confrontare più firme trascrizionali in contesti del mondo reale e in più posizioni epidemiologiche e geografiche, sono importanti per far avanzare le firme trascrizionali attraverso la pipeline diagnostica. In parole povere, gli sviluppatori di test devono sapere quale delle firme ora disponibili e relativamente concise è più promettente.

È importante sottolineare che queste firme riflettono lo stato infiammatorio dell'ospite. Inoltre, i pazienti che hanno firme elevate ma sono negativi alla coltura possono avere una tubercolosi incipiente subclinica, in quanto presto diventeranno positivi alla coltura e svilupperanno una tubercolosi attiva incidente. In altre parole, in una situazione del genere, le firme potrebbero avere un valore predittivo prospettico e consentire alle cliniche di rilevare i pazienti prima che rappresentino un rischio infettivo significativo. Poiché i cambiamenti trascrizionali del sangue possono precedere la conferma microbiologica, il ritardo nell'inizio del trattamento in attesa della coltura microbiologica porta ad un aumento del rischio di trasmissione di MTB. Uno studio che ha incluso il campionamento longitudinale di adolescenti HIV-negativi con tubercolosi latente ha rivelato che le firme trascrizionali del sangue potrebbero rilevare la malattia incipiente subclinica fino a 12 mesi prima che fosse fatta una diagnosi clinica convenzionale.

Inoltre, i pazienti che sono positivi alla firma ma non hanno la tubercolosi attiva (espettorato con coltura positiva per definizione classica) sono ancora malati e richiedono una caratterizzazione. Questo potrebbe informare i futuri algoritmi che indagano su tali pazienti. Pertanto, i ricercatori applicheranno un pannello di analisi PCR (RT-PCR) multiplex in tempo reale per la reazione a catena della polimerasi per rilevare i patogeni respiratori nei nostri pazienti.

Poiché i costi elevati potrebbero essere una limitazione all'implementazione delle firme trascrizionali come test per la tubercolosi attiva in contesti con risorse limitate, una strategia per selezionare i pazienti con una maggiore probabilità di avere la tubercolosi, per essere sottoposti a screening mediante test di triage basato sull'RNA prima che il test di conferma possa risultato in un algoritmo diagnostico più accessibile e migliorare l'efficacia in termini di costi del test della tubercolosi basato su RNA. I ricercatori esploreranno le combinazioni di sensibilità e specificità di ciascuna firma trascrizionale predefinita con altri test TB, incluso il nuovo test SeroSelectTB, per rilevare quali combinazioni di test ottimali miglioreranno l'accessibilità economica del test basato sull'RNA. Uno studio precedente aveva precedentemente utilizzato questa strategia per l'uso ottimale del test Xpert.

Questa proposta mira quindi a valutare l'accuratezza diagnostica delle firme trascrizionali dell'ospite selezionate nel sangue di partecipanti sintomatici in cerca di cure presso due cliniche locali a Città del Capo, in Sud Africa e strutture sanitarie selezionate in Tanzania, e caratterizzare i pazienti batteriologicamente negativi classificati come non-TBC a determinare se le firme trascrizionali dell'ospite elevate sono associate ad altri patogeni respiratori (rilevati nei tamponi rinofaringei utilizzando un pannello multiplex commerciale) o possono prevedere la tubercolosi attiva entro sei mesi (TBC attiva incidente). I ricercatori utilizzeranno, come impalcatura, lo studio sui genitori finanziato dall'EDCTP (SeroSelectTB), che è una valutazione panafricana di un test di triage sierologico point-of-care per la tubercolosi attiva, e il reclutamento di pazienti con sintomi respiratori persistenti e l'esecuzione di test (il test sierologico SeroSelectTB, Xpert, Ultra e la coltura sono tutti eseguiti nello studio SeroSelectTB) e il follow-up clinico per l'aderenza al trattamento.

Le ipotesi dello studio sono 1) le firme trascrizionali del sangue selezionate hanno un'elevata accuratezza diagnostica, definita come sensibilità minima del 90% e specificità del 70% per il profilo del prodotto target dell'OMS per un test di triage, rispetto a uno standard di riferimento microbiologico; 2) In pazienti batteriologicamente negativi classificati come non-TB, le firme trascrizionali dell'ospite al basale possono predire la TB attiva entro sei mesi (TB incidente); (3) i patogeni respiratori diversi dalla tubercolosi nei pazienti batteriologicamente negativi per la tubercolosi sono associati a firme trascrizionali elevate.

La convalida delle firme trascrizionali dell'ospite candidato può portare all'implementazione di migliori test per la tubercolosi, che contribuiranno ad alleviare il carico di malattie associate alla tubercolosi nell'Africa subsahariana e porteranno a una migliore qualità della vita.