Firmas de ARN en sangre del huésped para el diagnóstico de TB (RADIANT) (RADIANT)

El diagnóstico oportuno y correcto de la TB es vital para el control de la epidemia mundial de TB. El cribado de TB para la detección pasiva de casos se basa en los síntomas y está limitado por su sensibilidad subóptima, por lo que se necesita una prueba de triaje rápida que identifique a las personas sintomáticas antes de la investigación diagnóstica confirmatoria. Tal prueba podría reducir la carga sobre los sistemas de salud y los pacientes, y acelerar la derivación, las pruebas de confirmación y el tratamiento. En general, no se dispone de pruebas adecuadas que no sean de esputo, y esto se debe principalmente a la falta de biomarcadores. Se requiere una prueba de triaje no basada en esputo ya que muchas personas con TB, incluidas aquellas coinfectadas con VIH y aquellas con enfermedad temprana incipiente, a menudo no pueden producir esputo de alta calidad, que la mayoría de los diagnósticos actuales (microscopía de frotis basada en esputo, Mycobacteria Cultivo líquido del tubo indicador de crecimiento (MGIT) 960 y detección molecular por Xpert MTB/RIF (Xpert) o Xpert MTB/RIF Ultra (Ultra)).

En pacientes sometidos a evaluaciones de TB pulmonar y/o extrapulmonar, una prueba diagnóstica basada en biomarcadores sanguíneos sería óptima, ya que la sangre es fácilmente obtenible. Las respuestas inmunitarias a M. tuberculosis (MTB) conducen a patrones transcripcionales específicos solo para la TB, y dichos patrones de firma biológica se han utilizado desde entonces para identificar con precisión a los pacientes con TB activa. Varias firmas diagnósticas transcripcionales de sangre se han descrito previamente, y estos clasificadores transcripcionales de sangre detectaron TB activa entre adultos racialmente diversos en los EE. UU. en un estudio de validación de casos y controles. Estos biomarcadores son los más prometedores en el futuro cercano para cumplir con los criterios de perfil de producto objetivo de la prueba de triaje de la Organización Mundial de la Salud. Sin embargo, hay una falta de datos de desempeño prospectivo del mundo real, especialmente en entornos africanos con alta endemia de TB/VIH.

Un estudio reciente, que utilizó pacientes reclutados por el grupo en el que se basa esta propuesta, brindó la primera comparación directa prospectiva y sistemática de la precisión diagnóstica de 27 firmas transcripcionales de sangre para la TB activa identificadas a través de una revisión sistemática anterior. Este estudio permitió identificar firmas concisas con las firmas Sweeney3, Kaforou25, Roe3 y BATF2 que tienen la mayor precisión diagnóstica. Sin embargo, este estudio tiene un tamaño de muestra limitado y se realizó en un solo país y no caracterizó de manera integral a los pacientes sin TB que tenían una puntuación característica positiva. Por lo tanto, más estudios de validación prospectivos a gran escala para comparar múltiples firmas transcripcionales en entornos del mundo real y en múltiples ubicaciones epidemiológicas y geográficas son importantes para avanzar en las firmas transcripcionales a través de la tubería de diagnóstico. En pocas palabras, los desarrolladores de pruebas necesitan saber cuál, de las firmas que están disponibles ahora y son relativamente concisas, es la más prometedora.

Es importante destacar que estas firmas reflejan el estado inflamatorio del huésped. Además, los pacientes que tienen firmas elevadas pero cuyo cultivo es negativo pueden tener una TB incipiente subclínica, ya que en poco tiempo tendrán un cultivo positivo y desarrollarán una TB activa incidental. En otras palabras, en tal situación, las firmas podrían tener un valor predictivo prospectivo y permitir que las clínicas detecten pacientes antes de que representen un riesgo infeccioso significativo. Dado que los cambios en la transcripción de la sangre pueden ser anteriores a la confirmación microbiológica, el retraso en el inicio del tratamiento en espera del cultivo microbiológico conduce a un mayor riesgo de transmisión de MTB. Un estudio que incluyó muestras longitudinales de adolescentes VIH negativos con TB latente reveló que las firmas transcripcionales de la sangre podían detectar la enfermedad incipiente subclínica hasta 12 meses antes de que se hiciera un diagnóstico clínico convencional.

Además, los pacientes que son positivos para la firma pero que no tienen TB activa (esputo con cultivo positivo definido clásicamente) todavía están enfermos y requieren caracterización. Esto podría informar a futuros algoritmos que investiguen a estos pacientes. Por lo tanto, los investigadores aplicarán un panel de ensayo multiplex de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR) para detectar patógenos respiratorios en nuestros pacientes.

Dado que los altos costos podrían ser una limitación para la implementación de firmas transcripcionales como una prueba para la TB activa en entornos con recursos limitados, una estrategia para seleccionar pacientes con mayor probabilidad de tener TB, para ser examinados mediante una prueba de triaje basada en ARN antes de la prueba de confirmación puede dar como resultado un algoritmo de diagnóstico más asequible y mejorar la rentabilidad de la prueba de TB basada en ARN. Los investigadores explorarán combinaciones de sensibilidad y especificidad de cada firma transcripcional predefinida con otras pruebas de TB, incluida la nueva prueba SeroSelectTB, para detectar qué combinaciones de pruebas óptimas mejorarán la asequibilidad del ensayo basado en ARN. Un estudio anterior había empleado anteriormente esta estrategia para el uso óptimo de la prueba Xpert.

Por lo tanto, esta propuesta tiene como objetivo evaluar la precisión diagnóstica de las firmas transcripcionales del huésped seleccionado en la sangre de los participantes sintomáticos que buscan atención en dos clínicas locales en Ciudad del Cabo, Sudáfrica y centros de salud seleccionados en Tanzania, y caracterizar a los pacientes bacteriológicamente negativos clasificados como no TB para Determinar si las firmas transcripcionales elevadas del huésped están asociadas con otros patógenos respiratorios (detectados en hisopos nasofaríngeos mediante un panel multiplex comercial) o pueden predecir la TB activa dentro de los seis meses (TB activa incidente). Los investigadores utilizarán, como andamiaje, el estudio principal financiado por el EDCTP (SeroSelectTB), que es una evaluación panafricana de una prueba de triaje serológica en el punto de atención para la TB activa, y el reclutamiento de pacientes con síntomas respiratorios persistentes, y la realización de pruebas (en el estudio SeroSelectTB se realizan la prueba serológica SeroSelectTB, Xpert, Ultra y cultivo) y seguimiento clínico para la adherencia al tratamiento.

Las hipótesis del estudio son 1) las firmas transcripcionales de sangre seleccionadas tienen una alta precisión diagnóstica, definida como un mínimo de 90 % de sensibilidad y 70 % de especificidad para el perfil de producto objetivo de la OMS para una prueba de triaje, en comparación con un estándar microbiológico de referencia; 2) En pacientes bacteriológicamente negativos clasificados como sin TB, las firmas transcripcionales iniciales del huésped pueden predecir la TB activa dentro de los seis meses (TB incidente); (3) los patógenos respiratorios distintos de la TB en pacientes bacteriológicamente negativos para la TB están asociados con firmas transcripcionales elevadas.

La validación de las firmas transcripcionales del huésped candidato puede conducir a la implementación de pruebas de TB mejoradas, lo que ayudará a aliviar la carga de la enfermedad asociada con la TB en el África subsahariana y conducirá a una mejor calidad de vida.