L'impatto microbico sulla fibrosi intestinale e il microambiente immunitario associato nella malattia di Crohn
Svelare l’impatto microbico sulla fibrosi intestinale e sul microambiente immunitario associato: nuove conoscenze per la patogenesi e il trattamento delle complicanze associate alla malattia di Crohn
Panoramica dello studio
Stato
Condizioni
Intervento / Trattamento
Descrizione dettagliata
Oltre il 50% dei pazienti con malattia celiaca sviluppa una malattia penetrante o una stenosi dovuta alla fibrostenosi, che nella maggior parte dei casi richiede un intervento chirurgico, poiché non sono state ancora trovate terapie efficaci. La malattia porta ad alterazioni sia strutturali che funzionali della mucosa intestinale. Sebbene l’alterazione funzionale della mucosa sia principalmente causata dal continuo danno tissutale che si verifica durante l’infiammazione cronica associata alla malattia di Crohn, studi recenti hanno suggerito che la fibrosi associata alla malattia di Crohn potrebbe essere guidata da fattori scatenanti indipendenti dall’infiammazione, come la disbiosi della mucosa microbiota. La nostra proposta mira a stabilire il nesso causale tra disbiosi intestinale e fibrosi studiando il ruolo delle principali proteine batteriche presenti nel tessuto intestinale fibrotico.
Questo progetto offrirà in definitiva nuovi bersagli molecolari per lo sviluppo di possibili trattamenti antifibrotici su misura, con probabili benefici per l’assistenza sanitaria, poiché faciliterà la gestione della malattia celiaca grave, evitando l’intervento chirurgico e riducendo i costi del SSN.
Tipo di studio
Iscrizione (Stimato)
Contatti e Sedi
Contatto studio
- Nome: Silvio Danese, PhD.-MD
- Numero di telefono: +39 0226432807
- Email: danese.silvio@hsr.it
Backup dei contatti dello studio
- Nome: Federica Ungaro, PhD.
- Numero di telefono: +39 0226437864
- Email: ungaro.federica@hsr.it
Luoghi di studio
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Milan, Italia, 20132
- IRCCS San Raffaele
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Contatto:
- Andrea Galli
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Contatto:
- Andrea Vignali
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Contatto:
- Pierpaolo Sileri
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Contatto:
- Federica Ungaro, PhD.
- Numero di telefono: +39 0226437864
- Email: ungaro.federica@hsr.it
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Contatto:
- Francesco Fiorio
- Numero di telefono: +39 0226437159
- Email: fiorio.francesco@hsr.it
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Contatto:
- Silvio Danese
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Contatto:
- Federica Ungaro
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Contatto:
- Luca Albarello
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Contatto:
- Andrea Balla
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Contatto:
- Alice Frontali
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Contatto:
- Federico Scarfò
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Contatto:
- Andrea Municchi
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Contatto:
- Stefania Vetrano
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Criteri di partecipazione
Criteri di ammissibilità
Età idonea allo studio
- Adulto
- Adulto più anziano
Accetta volontari sani
Metodo di campionamento
Popolazione di studio
Arruolaremo 15 pazienti con malattia di Crohn e 5 pazienti senza malattie correlate alle IBD (es. diverticolite) sottoposti ad intervento chirurgico secondo la normale pratica clinica per un totale di 20 pazienti come segue:
- 15 pazienti con CD (5 pazienti/stadio: B1 (più infiammatorio, non strutturante), B2 (strutturante, non penetrante) e B3 (strutturante e penetrante).
I pazienti verranno stratificati in base all'analisi TC, MRI o ecografica (stratificazione già nota prima dell'intervento chirurgico)
- 5 pazienti senza malattie correlate alle IBD (ad es. diverticolite)
Tutti i pazienti verranno reclutati esclusivamente dall'Ospedale San Raffaele (OSR). La partecipazione è volontaria e il paziente può rifiutare un'ulteriore partecipazione al protocollo ogni volta che lo desidera.
La partecipazione allo studio non modificherà il trattamento diagnostico-terapeutico a cui vengono sottoposti i pazienti a seguito della pratica clinica, poiché i pazienti continueranno ad essere trattati secondo la pratica clinica indipendentemente dai risultati di tale studio.
Descrizione
Criteri di inclusione:
- Pazienti adulti ≥18 e <70 anni
- Pazienti in grado di firmare autonomamente il consenso informato
- Pazienti non in gravidanza o in allattamento
- Per i pazienti con malattia celiaca: pazienti con malattia di Crohn con diagnosi consolidata e inoltre classificati in 3 stadi: B1 (più infiammatorio, non restrittivo), B2 (stenosi, non penetrante) e B3 (stenosi e penetrante). I pazienti verranno stratificati sulla base dell'analisi TC, MRI o ecografica (stratificazione già nota prima dell'intervento chirurgico)
- Per pazienti non IBD: pazienti con altre patologie ma non affetti da IBD secondo i criteri di valutazione clinica ed endoscopica precedentemente riportati (es. diverticolite)
Criteri di esclusione:
- Pazienti <18 anni o >70 anni
- Pazienti in gravidanza o in allattamento
- Per pazienti con malattia celiaca: soggetti con malattia celiaca che non soddisfano i criteri di valutazione sopra descritti
- Per i pazienti non affetti da IBD: pazienti sottoposti a trattamenti antinfiammatori e/o immunosoppressivi per malattie correlate alle IBD
Piano di studio
Come è strutturato lo studio?
Dettagli di progettazione
Coorti e interventi
Gruppo / Coorte |
Intervento / Trattamento |
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Pazienti CD
Pazienti con malattia di Crohn con diagnosi accertata e ulteriormente classificati in 3 stadi: B1 (più infiammatorio, non restrittivo), B2 (stenosi, non penetrante) e B3 (stenosi e penetrante).
I pazienti verranno stratificati sulla base dell'analisi TC, MRI o ecografica (stratificazione già nota prima dell'intervento chirurgico)
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Campioni di pazienti con malattia di Crohn e pazienti non correlati a malattie infiammatorie intestinali verranno raccolti durante l'intervento chirurgico eseguito per la pratica clinica, senza altri rischi per i pazienti, poiché utilizzeremo solo il materiale residuo dopo l'analisi del patologo.
Tutti i campioni chirurgici raccolti verranno utilizzati per questo progetto e, per questo motivo, non verranno conservati dopo il periodo di ricerca.
Eventuali campioni residui verranno distrutti.
Una settimana prima dell'intervento chirurgico per rimuovere la stenosi, verranno raccolti campioni fecali di pazienti con celiachia appartenenti ai gruppi B1, B2, B3.
Saranno utilizzati per l'obiettivo esplorativo.
Tutti i campioni fecali raccolti verranno utilizzati per questo progetto e, per questo motivo, non verranno conservati dopo il periodo di ricerca.
Eventuali campioni residui verranno distrutti.
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Pazienti non-IBD
Pazienti con altre patologie ma non affetti da IBD secondo i criteri di valutazione clinica ed endoscopica precedentemente riportati (es.
diverticolite)
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Campioni di pazienti con malattia di Crohn e pazienti non correlati a malattie infiammatorie intestinali verranno raccolti durante l'intervento chirurgico eseguito per la pratica clinica, senza altri rischi per i pazienti, poiché utilizzeremo solo il materiale residuo dopo l'analisi del patologo.
Tutti i campioni chirurgici raccolti verranno utilizzati per questo progetto e, per questo motivo, non verranno conservati dopo il periodo di ricerca.
Eventuali campioni residui verranno distrutti.
Una settimana prima dell'intervento chirurgico per rimuovere la stenosi, verranno raccolti campioni fecali di pazienti con celiachia appartenenti ai gruppi B1, B2, B3.
Saranno utilizzati per l'obiettivo esplorativo.
Tutti i campioni fecali raccolti verranno utilizzati per questo progetto e, per questo motivo, non verranno conservati dopo il periodo di ricerca.
Eventuali campioni residui verranno distrutti.
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Cosa sta misurando lo studio?
Misure di risultato primarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
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Identificare i sottotipi cellulari e i percorsi molecolari influenzati dai fattori batterici specifici durante la fibrosi associata a CD.
Lasso di tempo: Esperimenti e analisi: dall'11° al 36° mese
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I campioni chirurgici dei soggetti di controllo e quelli derivati da CD verranno processati per ottenere una sospensione cellulare, che verrà congelata e conservata per il successivo sorting cellulare. Le sospensioni di CD congelate e di cellule sane verranno quindi scongelate e sottoposte a FACS per marcatori cellulari specifici (CD31 per cellule endoteliali, EpCam per cellule epiteliali, CD90 per fibroblasti, CD45 per leucociti, inclusi CD4 e CD8 per cellule T, CD20 per cellule B, CD14 e CD163 per i macrofagi (MΦ), CD11b e c per le cellule dendritiche (DC). Le popolazioni unicellulari saranno sottoposte alla preparazione della libreria e saranno analizzate mediante ribo-minus RNAseq a 30 milioni di letture di profondità. Verranno eseguite la metatrascrittomica per la profilazione della composizione microbica, nonché la trascrittomica per determinare sia l'espressione genica differenziale (DGE) che la Gene Set Enrichment Analysis (GSEA). |
Esperimenti e analisi: dall'11° al 36° mese
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Misure di risultato secondarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
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Svelare i meccanismi e le dinamiche cellulari e molecolari indotte dai fattori batterici nei modelli 3D di fibrosi intestinale
Lasso di tempo: Esperimenti e analisi: dall'11° al 36° mese
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Isoleremo e sequenziaremo l'RNA di specifici sottotipi cellulari dal fenotipo B1, B2 e B3 di tessuti fibrotici CD e tessuti sani non IBD. Profileremo la composizione microbica mediante metatrascrittomica e determineremo sia l'espressione genica differenziale (DGE) che la Gene Set Enrichment Analysis (GSEA) mediante trascrittomica. Inoltre, per identificare il/i tipo/i cellulare/i in cui ci si aspetta che le proteine batteriche esercitino gli effetti pro-fibrotici più importanti, allestiremo la piattaforma sperimentale basata su transwell piastrando cellule epiteliali (organoidi) e/o cellule endoteliali, e /o fibroblasti nella camera superiore del transwell, mentre le cellule mononucleate della lamina propria (LPMC) saranno piastrate nella camera inferiore |
Esperimenti e analisi: dall'11° al 36° mese
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Altre misure di risultato
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
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Convalidare i risultati in vitro in un modello animale valutando il ruolo dei fattori microbici nell'indurre la fibrosi in un intero organismo. Inoltre, forniremo un possibile approccio terapeutico con forti implicazioni cliniche in futuro
Lasso di tempo: Esperimenti su modelli in vivo: dal 13° al 24° mese
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Valutare l'efficacia della terapia nanomedica nell'inibire i processi deleteri indotti da fattori batterici sfruttando modelli in vivo che ricapitolano la fibrosi associata alla CD. Valuteremo il potenziale pro-fibrotico di specifici fattori batterici durante la fibrosi intestinale sperimentale, testando un possibile trattamento attraverso l'inibizione mediata dai liposomi dei meccanismi indotti dai fattori batterici. Per questo. A questo scopo, i campioni fecali raccolti dai pazienti verranno trattati ed elaborati per l'analisi nel nostro laboratorio e verranno quindi spediti all'UO2 per studi in vivo |
Esperimenti su modelli in vivo: dal 13° al 24° mese
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Collaboratori e investigatori
Sponsor
Collaboratori
Investigatori
- Investigatore principale: Silvio Danese, PhD-MD, IRCCS San Raffaele
Studiare le date dei record
Studia le date principali
Inizio studio (Stimato)
Completamento primario (Stimato)
Completamento dello studio (Stimato)
Date di iscrizione allo studio
Primo inviato
Primo inviato che soddisfa i criteri di controllo qualità
Primo Inserito (Effettivo)
Aggiornamenti dei record di studio
Ultimo aggiornamento pubblicato (Effettivo)
Ultimo aggiornamento inviato che soddisfa i criteri QC
Ultimo verificato
Maggiori informazioni
Termini relativi a questo studio
Parole chiave
Termini MeSH pertinenti aggiuntivi
Altri numeri di identificazione dello studio
- PRIN-2022RKE4L
- Bando MUR 2022 PRIN-2022RKE4L (Altro numero di sovvenzione/finanziamento: Ministero dell'Università e della Ricerca (MUR))
Piano per i dati dei singoli partecipanti (IPD)
Hai intenzione di condividere i dati dei singoli partecipanti (IPD)?
Informazioni su farmaci e dispositivi, documenti di studio
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