胃バンディング前後の樹状細胞の特徴

肥満は米国における罹患率と死亡率の主要な原因であり続けています。 肥満と II 型糖尿病との関連はよく知られています。 いくつかの研究では、脂肪が低悪性度の炎症反応を引き起こし、それが肥満患者の代謝変化の原因となっている可能性があることを示唆しています。 より具体的には、樹状細胞と呼ばれる、炎症を引き起こすある種の白血球が大網脂肪中に高濃度で見つかっています。 この細胞は、インスリン抵抗性の発症において中心的な役割を果たしている可能性がありますが、病的肥満を患うヒト患者については広く研究されていません。 体重減少とは別に、肥満の外科的治療は炎症マーカーの減少にもつながります。 病的肥満の併存疾患の多くは改善または治癒します。 腹腔鏡による調整可能な胃バンディングは、他の胃バイパス手術よりも安全で、術後 2 年後には同様の体重減少が得られます。

ヒト被験者の樹状細胞に関する研究の多くは、クローン病患者を対象に行われています。 サイトカインのプロファイルと樹状細胞の特徴はどちらもクローン病患者では広く研究されていますが、肥満者では研究されていません。 これに加えて、これらの細胞は一定期間の減量後に再評価されていません。

肥満の炎症とその後の体重減少による解消についてのより詳細な分析は、この主題に関する情報の増加に貢献するでしょう。 さらなる研究により、肥満の併存疾患の病因に関する洞察が得られ、これらの病気の潜在的な治療法の発見に貢献する可能性があります。 樹状細胞は動物モデルで広く研究されています。 現在、これらの細胞の特異的な細胞表面マーカーとシグナル伝達経路、刺激因子に対する細胞の反応、IL-10などの抗炎症性サイトカインを分泌する能力がわかっています。 私たちはこれらの発見を人間に応用したいと考えています。

現在では、慢性的な軽度の炎症が、インスリン標的細胞におけるインスリン抵抗性を引き起こす重要な要素であることが認識されています。 これについての証拠は、インスリン抵抗性/糖尿病のヒトおよび齧歯動物の血漿中の炎症マーカーの上昇の一貫した測定を含めて、実質的である。 この概念は、肥満脂肪組織には多数の常在マクロファージが含まれているという最近の発見によってさらに確立されました。 実際、痩せた状態では、脂肪組織内のすべての細胞タイプの約 10% がマクロファージで構成されており、肥満ではこの数が 50% に達する可能性があります。 さらに、表面マーカーに基づく脂肪組織マクロファージのFACS分類により、この顕著な増加の原因はマクロファージの部分集団であることが示された。 この部分集団には、F4/80、CD11B、および CD11C に対して陽性であるマクロファージが含まれており、したがってその表現型は樹状突起に似ています。 文献には、皮下脂肪組織と比較して内臓脂肪組織が特に「炎症」している可能性があり、マクロファージ浸潤の増加と炎症マーカーが内臓脂肪で発現していることを示唆する報告もあります。 ノックアウトマウスにおいてマクロファージの炎症経路が特異的に無効化されている最近の証拠は、マクロファージが、最終的には全身性インスリン抵抗性を引き起こす炎症反応の原因となる細胞型の開始または調整を行っている可能性があることを決定的に示している。

これらの概念は、このプロトコルで得られた皮下脂肪および内臓脂肪のサンプルを使用して評価されます。 脂肪組織サンプルはコラゲナーゼ消化されて、組織内のすべての脂肪細胞および非脂肪細胞タイプの細胞が放出されます。 分画遠心分離と濾過を使用して、間質血管画分 (SVF) が脂肪細胞から分離されます。 SVF にはマクロファージが含まれており、これらの細胞は F4/80、CD11B、および CD11C の発現に基づいて FACS 分析を受け、特定の脂肪組織サンプル内のマクロファージの絶対数と、古典的マクロファージと樹状細胞様の比率が決定されます。マクロファージ。 次に細胞を選別し、古典的マクロファージ (F4/80 陽性、CD11B 陽性、ただし CD11C 陰性) と樹状細胞 (F480 陽性、CD11B 陽性、CD11C 陽性) の炎症マーカー発現を測定します。 この分析には、これらの細胞 (TNF、IL-1、および IL-6) によるサイトカイン発現の直接測定と、炎症経路構成要素の mRNA 発現の PCR ベースの測定が含まれます。 これらの測定は、最初の手術時に得られた皮下および内臓脂肪組織、ならびに減量後のフォローアップ時の皮下脂肪組織サンプルに対して行われます。