Características das células dendríticas antes e depois da banda gástrica

A obesidade continua a ser uma importante fonte de morbidade e mortalidade nos Estados Unidos. A associação entre obesidade e diabetes tipo II é bem conhecida. Vários estudos sugerem que a gordura pode gerar uma resposta inflamatória de baixo grau que pode ser responsável pelas alterações metabólicas em pacientes obesos. Mais especificamente, um certo tipo de glóbulo branco que causa inflamação, chamado célula dendrítica, foi encontrado em altas concentrações na gordura omental. Esta célula não foi extensivamente estudada em pacientes humanos com obesidade mórbida, embora possa desempenhar um papel central no desenvolvimento da resistência à insulina. Além da perda de peso, o tratamento cirúrgico da obesidade também resulta na diminuição dos marcadores de inflamação. Muitas das comorbidades da obesidade mórbida melhoram ou são curadas. A banda gástrica ajustável laparoscópica é mais segura do que outros procedimentos de bypass gástrico e resulta em quantidades semelhantes de perda de peso após 2 anos de pós-operatório.

Grande parte do trabalho sobre células dendríticas em seres humanos tem sido em pacientes com doença de Crohn. Tanto o perfil de citocinas quanto as características das células dendríticas foram extensivamente estudados em pacientes com doença de Crohn, mas não em indivíduos obesos. Além disso, essas células não foram reavaliadas após um período de perda de peso.

Uma análise mais detalhada da inflamação da obesidade e sua posterior resolução com perda de peso contribuirá para o crescente corpo de informações sobre o assunto. Trabalhos futuros fornecerão informações sobre a patogênese das comorbidades da obesidade e podem contribuir para descobrir possíveis tratamentos para essas doenças. As células dendríticas têm sido extensivamente estudadas em modelos animais. Agora conhecemos marcadores específicos de superfície celular e vias de sinalização para essas células, suas respostas a fatores estimulantes e sua capacidade de secretar citocinas anti-inflamatórias, como a IL-10. Esperamos traduzir essas descobertas para os seres humanos.

Agora é reconhecido que a inflamação crônica de baixo grau é o elemento crítico que leva à resistência à insulina nas células-alvo da insulina. A evidência para isso é substancial, incluindo medições consistentes de marcadores inflamatórios elevados no plasma de humanos e roedores resistentes à insulina/diabéticos. Este conceito foi ainda estabelecido pela recente descoberta de que o tecido adiposo obeso contém um grande número de macrófagos residentes. De fato, no estado magro, cerca de 10% de todos os tipos de células no tecido adiposo consistem em macrófagos, e esse número pode chegar a 50% na obesidade. Além disso, a classificação FACS de macrófagos do tecido adiposo com base em marcadores de superfície indicou que é uma subpopulação de macrófagos que responde por esse aumento notável. Esta subpopulação envolve macrófagos que são positivos para F4/80, CD11B e CD11C e são, portanto, dendríticos em seu fenótipo. Há também relatos na literatura que sugerem que o tecido adiposo visceral pode estar particularmente "inflamado" em comparação com o tecido adiposo subcutâneo e que o aumento da infiltração de macrófagos e marcadores inflamatórios são expressos na gordura visceral. Evidências mais recentes, nas quais a via inflamatória do macrófago é especificamente desativada, em camundongos knockout, demonstram conclusivamente que o macrófago pode ser o tipo de célula iniciadora ou orquestradora responsável pela resposta inflamatória que, em última análise, leva à resistência sistêmica à insulina.

Esses conceitos serão avaliados usando as amostras de gordura subcutânea e visceral obtidas sob este protocolo. As amostras de tecido adiposo serão digeridas com colagenase para liberar todos os adipócitos e tipos de células não adipócitos dentro do tecido. Usando centrifugação diferencial e filtração, a fração vascular estromal (SVF) será separada dos adipócitos. O SVF contém os macrófagos, e essas células serão submetidas à análise FACS com base na expressão de F4/80, CD11B e CD11C para determinar o número absoluto de macrófagos dentro de uma determinada amostra de tecido adiposo e a proporção de macrófagos clássicos versus células dendríticas semelhantes macrófagos. As células serão então classificadas e a expressão de marcadores inflamatórios será medida nos macrófagos clássicos (F4/80 positivo, CD11B positivo, mas CD11C negativo) versus células dendríticas (F480 positivo, CD11B positivo e CD11C positivo). Esta análise envolverá medição direta da expressão de citocinas por essas células (TNF, IL-1 e IL-6), bem como medições baseadas em PCR da expressão de mRNA de componentes da via inflamatória. Essas medidas serão realizadas no tecido adiposo subcutâneo e visceral obtido no momento da cirurgia inicial, bem como nas amostras de tecido adiposo subcutâneo no acompanhamento após a redução de peso.