Dendriittisolujen ominaisuudet ennen ja jälkeen mahalaukun vyöhykkeen

Liikalihavuus on edelleen merkittävä sairastuvuuden ja kuolleisuuden lähde Yhdysvalloissa. Liikalihavuuden ja tyypin II diabeteksen välinen yhteys tunnetaan hyvin. Useat tutkimukset viittaavat siihen, että rasva voi aiheuttaa matala-asteisen tulehdusvasteen, joka voi olla vastuussa lihavien potilaiden metabolisista muutoksista. Tarkemmin sanottuna tietyntyyppistä tulehdusta aiheuttavaa valkosolua, jota kutsutaan dendriittisoluksi, on löydetty korkeina pitoisuuksina rasvarasvasta. Tätä solua ei ole tutkittu laajasti ihmispotilailla, joilla on sairaalloinen liikalihavuus, vaikka sillä voi olla keskeinen rooli insuliiniresistenssin kehittymisessä. Painonpudotuksen lisäksi liikalihavuuden kirurginen hoito johtaa myös tulehduksen merkkiaineiden vähenemiseen. Monet sairaalloisen liikalihavuuden liitännäissairaudet paranevat tai paranevat. Laparoskopinen säädettävä mahalaukun kiinnitys on turvallisempi kuin muut mahalaukun ohitustoimenpiteet ja johtaa samanlaiseen painonpudotukseen 2 vuoden jälkeen leikkauksen jälkeen.

Suuri osa dendriittisoluja koskevasta työstä ihmisillä on tehty Crohnin tautia sairastavilla potilailla. Sekä sytokiiniprofiilia että dendriittisolujen ominaisuuksia on tutkittu laajasti Crohnin potilailla, mutta ei liikalihavilla yksilöillä. Tämän lisäksi näitä soluja ei ole arvioitu uudelleen painonpudotuksen jälkeen.

Yksityiskohtaisempi analyysi liikalihavuuden tulehduksesta ja sen myöhempi ratkaiseminen painonpudotuksen myötä myötävaikuttaa kasvavaan tietomäärään tästä aiheesta. Jatkotyö antaa käsityksen liikalihavuuden liitännäissairauksien patogeneesistä ja voi auttaa löytämään mahdollisia hoitomuotoja näihin sairauksiin. Dendriittisoluja on tutkittu laajasti eläinmalleilla. Tiedämme nyt näiden solujen spesifiset solupinnan markkerit ja signalointireitit, niiden vasteet stimuloiville tekijöille ja niiden kyvyn erittää anti-inflammatorisia sytokiinejä, kuten IL-10:tä. Toivomme, että voimme kääntää nämä löydöt ihmisille.

Nyt tiedetään, että krooninen matala-asteinen tulehdus on kriittinen tekijä, joka johtaa insuliiniresistenssiin insuliinin kohdesoluissa. Todisteet tästä ovat merkittäviä, mukaan lukien johdonmukaiset mittaukset kohonneista tulehdusmarkkereista plasmassa insuliiniresistenssistä/diabeettisista ihmisistä ja jyrsijöistä. Tätä käsitettä vahvisti entisestään äskettäinen löytö, jonka mukaan liikalihava rasvakudos sisältää suuren määrän makrofageja. Itse asiassa laihassa tilassa noin 10 % kaikista rasvakudoksen solutyypeistä koostuu makrofageista, ja tämä määrä voi nousta jopa 50 prosenttiin liikalihavuudessa. Lisäksi pintamarkkereihin perustuva rasvakudosmakrofagien FACS-lajittelu on osoittanut, että tämä merkittävä kasvu johtuu makrofagien alapopulaatiosta. Tämä alapopulaatio sisältää makrofageja, jotka ovat positiivisia F4/80:lle, CD11B:lle ja CD11C:lle ja ovat siksi fenotyypiltään dendriittisiä. Kirjallisuudessa on myös raportteja, jotka viittaavat siihen, että viskeraalinen rasvakudos voi olla erityisen "tulehtunut" verrattuna ihonalaiseen rasvakudokseen ja että lisääntynyt makrofagien tunkeutuminen ja tulehdusmerkkiaineet ilmentyvät sisäelinten rasvassa. Uusimmat todisteet, joissa makrofagien tulehdusreitti on spesifisesti estetty knock-out-hiirillä, osoittaa lopullisesti, että makrofagi voi olla aloittava tai järjestävä solutyyppi, joka on vastuussa tulehdusvasteesta, joka lopulta johtaa systeemiseen insuliiniresistenssiin.

Nämä käsitteet arvioidaan käyttämällä tämän protokollan mukaisesti saatuja ihonalaisia ​​ja viskeraalisia rasvanäytteitä. Rasvakudosnäytteet pilkotaan kollagenaasilla, jotta kaikki kudoksessa olevat rasvasolut ja ei-rasvasolutyypit vapautuvat. Differentiaalisen sentrifugoinnin ja suodatuksen avulla stromaalinen vaskulaarinen fraktio (SVF) erotetaan rasvasoluista. SVF sisältää makrofagit, ja näille soluille suoritetaan FACS-analyysi, joka perustuu F4/80:n, CD11B:n ja CD11C:n ilmentymiseen makrofagien absoluuttisen lukumäärän määrittämiseksi tietyssä rasvakudosnäytteessä sekä klassisten makrofagien osuuden dendriittisolun kaltaisiin verrattuna. makrofagit. Sitten solut lajitellaan ja tulehdusmarkkerin ilmentyminen mitataan klassisissa makrofageissa (F4/80-positiivinen, CD11B-positiivinen, mutta CD11C-negatiivinen) verrattuna dendriittien kaltaisiin soluihin (F480-positiivinen, CD11B-positiivinen ja CD11C-positiivinen). Tämä analyysi sisältää näiden solujen (TNF, IL-1 ja IL-6) suoran sytokiiniekspression mittaamisen sekä tulehdusreitin komponenttien mRNA-ilmentymisen PCR-pohjaiset mittaukset. Nämä mittaukset tehdään ihonalaiselle ja viskeraaliselle rasvakudokselle, joka on saatu ensimmäisen leikkauksen yhteydessä, sekä ihonalaisista rasvakudosnäytteistä painonpudotuksen jälkeisen seurannan yhteydessä.