小児HIVにおけるビタミンDとカルシウムの骨への影響

A.1.a. はじめに これは、HIV に感染した子供と青年の骨量増加に対するビタミン D3 とカルシウムの 24 か月の補給の効果を評価するために設計された、前向き無作為化二重盲検臨床試験です。

A.1.b.被験者の募集 i. HIV に感染した被験者は、包含および除外基準を満たす参加施設で治療を受ける HIV に感染した子供および青年の中から、共同研究者によって登録されます。

A.1.c.測定:

血清 25(OH)D レベルを測定するための血液は、参加している臨床施設によって HIV に感染したすべての小児および青年から採取されます。 サンプルは分析され、結果は横断研究訪問の前に知られています。 血清 25(OH)D レベルは、参加者を選択するために使用されます。 以下の措置が実施されます。

投薬を含む病歴 出産能力のある女性の妊娠検査 身長と体重 思春期の評価 カルシウムとビタミン D の食事摂取量の評価 身体活動の評価 全身骨ミネラル含有量 (TBBMC)、全身骨密度の測定 ( TBBBMD)、脊椎の BMC および BMD、および骨年齢 X 線写真 ミネラル代謝の指標のための空腹時の朝の採血: 血清カルシウム、リン酸塩、アルブミン、総アルカリホスファターゼ活性、25(OH)D、1,25(OH)2D、iPTH、尿中カルシウムとクレアチニン。

骨ターンオーバーのマーカー：血清N-テロペプチド（N-tx、吸収のマーカー）、骨特異的アルカリホスファターゼ（BALP）、およびオステオカルシン（形成のマーカー） これらの測定は、SLRHC小児体組成ユニットで行われます。

A.2.a.研究デザイン:

この二重盲検無作為化試験では、24 か月間のビタミン D3 とカルシウムの補給とプラセボの効果を比較します。 HIV に感染した 8 歳から 16 歳の 60 人の子供と青年が無作為に割り付けられ、ビタミン D3 とカルシウムまたはプラセボが投与されます。 一次結果変数であるBMCとBMDは、無作為化の前、および1年後と2年後に測定されます。 血清２５（ＯＨ）Ｄ、１，２５（ＯＨ）２Ｄ、ＰＴＨ、骨代謝回転のマーカーの連続測定は、試験前および試験中の定義された間隔で評価される。

A.2.b.治療アーム:

適格な被験者は、無作為化によって割り当てられ、次のいずれかを受け取ります。

1. ビタミン D3 (100,000 IU または 2.5 mg) を 60 日ごとに経口投与し、元素カルシウム 500 mg を 1 日 2 回。また

2. ビタミン D3 プラセボを 60 日ごとに経口投与し、カルシウム プラセボを 1 日 2 回投与。

   A.2.c. エントリーおよび無作為化訪問:

   適格なすべての被験者は、横断研究（セクションD.2.f）への参加により、SLRHC小児体組成ユニットで最初の研究登録評価が行われます。 適格な血清 25(OH)D レベルは横断的研究訪問の前に知られるため、無作為化臨床試験に適格な研究参加者は、横断的研究訪問中に 2 つのうちの 1 つにランダムに割り当てることができます (方法を参照)。治療アーム;このような場合、横断的訪問はエントリー/ベースライン訪問としても機能します。 各被験者には、ビタミンD3/プラセボの最初の用量が与えられ、最初の30日間のカルシウム/プラセボが分配されます。 出産能力のある女性

   A.2.d.フォローアップ訪問:

   参加者は、調査の最初の年は毎月、2 年目は 2 か月ごとに診察を受けます。 エントリー/ベースライン、12 か月および 24 か月の訪問は、SLRHC 体組成ユニットで行われます。 他のすべての訪問は、通常のケアが受けられるサイトで行われます。 ビタミンD3 /プラセボは、2か月ごとの研究訪問中に投与されます。 無作為化後の最初の年は毎月の訪問で、2年目は2か月ごとに、カルシウム/プラセボの30日または60日の供給が調剤されます。 カルシウム補給の順守は、各来院時に評価されます。

   A.2.e. 12か月および24か月の研究訪問:

   これらの訪問は、SLRHC 体組成ユニットで行われます。 訪問ごとに、次のテストが実行されます。

   投薬を含む病歴 出産能力のある女性の妊娠検査 身長と体重 思春期段階の評価 カルシウムとビタミン D の食事摂取量の評価 身体活動の評価 TBBMC、TBBBMD、脊椎 BMC および BMD の測定 骨年齢 X 線写真

   A.3.方法

   A.3.a.ランダム化:

   HIV 感染児の治療群への無作為化は、コンピューターで生成された乱数 (SAS バージョン 8.2 for Windows、SAS Institute、Cary、NC) によって実行されます。 治療グループがこれらの変数に関してバランスが取れていることを確認するために、無作為化は性別と年齢 (例: > または < 14 歳) によって階層化されます。 ブロック無作為化を使用して、各アームの被験者数が時間の経過とともにほぼ同じになるようにします。 無作為化シーケンスは、研究の生物統計学者によって作成され、被験者が登録されたときに実薬またはプラセボ薬を調剤する研究薬剤師に伝達されます。

   A.3.b.遵守:

   カルシウム/プラセボへの順守は、ピルカウントとブリスターパッケージの使用を通じて、各訪問で評価されます. ビタミンD /プラセボへの遵守は、定義された研究訪問中の管理された投与によって保証されます.

   A.3.c. 小児および青年の骨ミネラル状態の測定:

   HIV感染被験者の骨ミネラル状態は、全身および腰椎DXAスキャンによって決定されます。 これらは、Hologic Delphi-A スキャナーを使用して、SLRHC 小児体組成ユニットで実行されます。

   DXA によるグラム単位の骨ミネラル含有量の測定は、全身のカルシウムとよく相関します (Ellis 1996)。 現在までに、この研究所は 50 以上の研究プロジェクトと臨床試験のために 13,000 人以上の被験者で DXA を使用して骨ミネラルと体組成のデータを提供してきました。

   私たちの研究室でのヒト被験者の骨密度の cv は 0.8% です。 ホロジック・デルファイ

   A.4.d. 骨格年齢の評価:

   骨格年齢は、DXA スキャンと同じ日に SL サイト放射線科で行われる標準化された左手首の骨年齢 X 線写真によって決定されます。 Greulich and Pyle の Atlas からの手と手首のプレーン フィルムを使用した性別固有の骨年齢基準が、標準参照として使用されます (Greulich and Pyle 1959)。 被験者の年齢と治療状況を知らされない 1 人の小児放射線科医が、すべての骨年齢のレントゲン写真を読み取ります。

   入場時に骨格が成熟していることが判明した被験者（つまり、 骨端融合）。

   成熟は、骨ミネラルの蓄積に大きな影響を与えます。 思春期の身体的兆候が現れる前に、相対的な成熟度または「生物学的年齢」を評価する唯一の利用可能な方法は、標準化されたX線による骨格または「骨年齢」を測定することです. 思春期の身体的兆候が現れた後でも、骨格年齢は引き続き使用されます。これは、思春期に伴う骨の成熟の進行速度が個人間で異なるためです。 治療や疾患活動の変化に応じて、一般的な健康状態、成長率および思春期の進行率が「キャッチアップ」または「キャッチダウン」する可能性がある慢性疾患の子供では、特に変化しやすい. 慢性疾患の子供では、骨年齢は、実年齢、サイズ、または思春期の段階よりも成熟状態のより良い指標である可能性があります. したがって、骨年齢は、このプロトコルの重要な共変量です。

   A.3.e. 思春期の評価:

   治験責任医師（Drs. スティーブン・アルパディとメアリー・ホーリック）は、性的成熟のレベルを決定するための手順と根拠を被験者と家族に説明した後. これらは、タナーの方法を使用して、SLRHC小児体組成ユニットへの研究訪問中に実行されます（Tanner 1970、Tanner 1971）。 エントリー時に性的成熟を経験したと判断された被験者（つまり、 タナー段階 5)。

   思春期のタイミングとペースには通常の大きな変動性があるため、思春期の影響と研究治療の影響、年齢、身長、体重の増加が骨塩量に及ぼす影響を区別するために、研究参加者の思春期状態の標準化された連続評価が行われます。 . この変数の測定は、性的成熟の遅れが一般的である HIV 感染などの慢性疾患を持つ子供の研究において潜在的に非常に重要です (de Martino 2001)。

   思春期の DXA による骨ミネラル量の変化とそれに伴う成長スパートは、男性と女性の両方で報告されています (Glastre 1990、Gilsanz 1991、Rico 1993、Mora 1999)。 しかし、DXA 製造業者および最近の縦断研究によって作成された参照基準は、年齢および性別のみに固有のものです (Bachrach 1999)。 年齢または思春期のみに基づく参照基準は、成長、思春期のタイミングに影響を与え、独立して骨ミネラルの獲得に影響を与える可能性がある HIV 感染などの障害を持つ患者の評価には役立ちません (Leonard 1999、Thearle 2000、Arpadi 2002)。

   A.3.f. 思春期の評価手順:

   このプロジェクトにおける思春期の評価は、BMDCS プロジェクトのプロトコルに正確に従います。 思春期の段階が骨ミネラルの発生に与える影響は、参加者とその家族が思春期の身体検査の目的を理解できるように、入学試験の訪問時にすべての参加者に説明されます。 小児内分泌学者 (MH) は、多施設 BMDCS プロジェクト用に確立されたプロトコルに従って、思春期の段階を評価します。 女の子の場合、乳房の発達は視覚的基準によって評価されますが、思春期の初期段階では触診によっても評価されます (Marshall and Tanner 1971, Biro 1992)。 男児の場合、睾丸の大きさは、プラダーオーキドメーターの卵形を使用して評価されます (Zachman 1974, Biro 1995)。 男の子と女の子の両方について、陰毛の発生はタナーの基準によって評価されます (マーシャルとタナー 1970、1971)。

   A.3.g. 身長と体重の測定手順：

   立っている高さは、壁に取り付けられたスタディオメーター (Holtain、Crosswell、ウェールズ) を使用して、0.1cm 単位で測定されます。 指定された各時点で 3 つの個別の測定値が取得され、結果が平均化されます。 体重は、病院のガウンを着た被験者で取得し、0.1 kg 単位で測定します (Weight Tronix、ニューヨーク、NY)。

   A.3.h. 骨ミネラルの蓄積に影響を与える修正可能な行動要因の評価:

   この研究の栄養摂取量の推定値を提供するために、食事データ収集に食物頻度アンケート（FFQ）を使用します。 食事摂取量に関する標準化された情報が利用できるようになると、HIV 感染した子供の成長期における食物/栄養素の摂取量と骨の増加との関係を調査することも可能になります。

   Slemenda et al (1991) の公開された自己報告ツールを使用して、体重を支える身体活動を決定します。 いくつかの研究が子供の身体活動の自己報告の測定の妥当性を支持していますが、Slemenda の研究のみが子供の体重負荷身体活動の自己報告の使用を報告しました (Sallis 1993, Slemenda 1991)。

   A.3.i. 食事摂取と身体活動アンケートの手順:

   多施設 BMDCS プロジェクト用に確立されたプロトコルに従って、被験者は FFQ を完了します (14 歳未満の場合は親または保護者の助けを借りて)。 アンケートの所要時間は約20分で、ご来院時に完了となります。 各 FFQ には、さまざまなサービング サイズを含む写真が含まれます。 被験者は、どの写真が自分のサービングサイズに最も合っているかを示すように求められます. 対象者は、提供された量ではなく、通常の食事量を示すように注意されます。

   すべての参加者は、いくつかの身体活動のそれぞれに関与した過去 1 週間の時間数を思い出すように求めるアンケートを受けます。 捜査官は、参加者に自分の活動をできるだけ正確に思い出すように促します。 子供は親に助けを求めるかもしれません。 アンケートの所要時間は約 10 分です。

   FFQ、BLOCKIDS (NutritionQuest、バークレー大学、カリフォルニア州バークレー校) は、NHANES III によって、この年齢および人口統計グループにとって重要であると特定された食品で構成されています。 このプロジェクトに関連して、測定にはビタミン D とカルシウムの食事摂取が含まれます。 FFQ は、8 歳から 10 歳のアフリカ系アメリカ人の子供 (ブロック 2000) でいくつかの主要栄養素と微量栄養素 (例: カルシウムの相関 = 0.64)。 BMDHC プロジェクトの一環として、追加の検証研究が計画されています。

   A.3..j. 生化学分析の手順:

   CBC、リンパ球サブセット（CD4、CD8）、HIVウイルス量、腎機能および肝機能検査を含む一般的な臨床検査は、研究サイトの臨床化学検査室で実施されます。 特殊な生化学 (PTH、ビタミン D 代謝産物、OC、BSAP、NTx) 用の血清を分注し、収集後すぐに凍結し、-70 度で保存される SLRHC に移します。 凍結サンプルは、コロンビア大学のアービング臨床研究センターのコア研究室で分析されます。 個々の被験者からのすべてのサンプルは、アッセイ間の変動を減らすために、同じアッセイでバッチで分析されます。 計画されたすべてのアッセイは現在、コアラボで実施されています。

   血清: 無傷の PTH、ビタミン D 代謝産物、およびオステオカルシンのキットは、Corning-Nichols Laboratory (San Juan Capistrano, CA) から購入します。

   副甲状腺ホルモン: PTH は現在化学発光法によって測定されており、この方法は PTH の 7-84 フラグメントと分子の完全な形 (1-84) を検出することが知られています (72)。 アッセイ内およびアッセイ間の変動性は、それぞれ 3.4% および 5.6% です。 このアッセイの正常な成人の範囲は 10 ～ 65 pg/ml です。

   ビタミン D 代謝物: 血清サンプルの抽出後、25OHD を放射結合アッセイで測定します。 アッセイ内およびアッセイ間の変動性は、それぞれ 7.5% および 9.6% です。 正常範囲は 9 ～ 52 ng/ml です。 血清 1,25(OH)2D は、放射性受容体アッセイでアッセイされます。 通常の成人の範囲は 15 ～ 60 pg/ml です。 アッセイ内およびアッセイ間の変動性は、それぞれ 7.6% および 9.8% です。

   オステオカルシン： オステオカルシンは、Gundbergらの方法に従ってRIAによって測定されます。 アッセイ内およびアッセイ間の変動性は、それぞれ 4.3% および 5.7% です。 正常範囲は、成人男性で 3.4 ～ 11.7 ng/ml、2.4 ～ 10.0 ng/ml です。 閉経前の成人女性では ng/ml。

   骨特異的アルカリホスファターゼ (BSAP): BSAP は、血清中のアルカリホスファターゼの骨格アイソザイムを特異的に測定する固相 2 サイト免疫放射測定アッセイによって測定されます。 キットは、Hybritech Incorporated (カリフォルニア州サンディエゴ) から購入します。 アッセイ内およびアッセイ間の変動性は、それぞれ 4.2% および 7.2% です。 正常範囲は、成人女性で 8.0 ～ 16.6 ng/ml、成人男性で 7.2 ～ 15.8 ng/ml です。

   血清Ｎ－テロペプチド（Ｏｓｔｅｏｍａｒｋ、Ｏｓｔｅｘ、ワシントン州シアトル）は、ＮＴｘが吸着された固相としてマイクロウェルを利用する競合阻害酵素結合免疫吸着アッセイを使用して測定される。 アッセイ値は、1 リットルあたりの骨コラーゲン当量 (BCE) nmoles で報告されます。 正常範囲は、成人女性で 6.2 ～ 19.0、成人男性で 5.4 ～ 24.2 です。 アッセイ内およびアッセイ間の変動性は、それぞれ 4.6% および 6.9% です。

   A.3.l. HIV 疾患の免疫学的およびウイルス学的測定：

   被験者のCD-4+リンパ球数およびCD4%値は、患者ケアの一環として臨床現場の検査室で実施された結果から得られます。 定量的ウイルス負荷アッセイ - 共同臨床施設での臨床ケアの一環として実施されるポリメラーゼ連鎖反応法によって決定された HIV RNA が収集され、この研究に使用されます。

   午前3時 安全監視と毒性管理の手順:

   尿妊娠検査は、各SLRHC訪問時および放射線研究が行われる直前に、出産能力のあるすべての女性に投与されます。 出産能力のあるすべての女性は、尿検査とDEXAスキャンの前に妊娠しているかどうかを尋ねられます。

   高カルシウム血症、高カルシウム尿症、および低カルシウム血症の監視: 被験者の治療割り当ての盲検化を維持するために、実験室のレポートは、ニューヨーク長老派病院に所在する共同研究者であるシェーン博士によってレビューされます。臨床研究施設。 これは、GCRC の特別な実験室アッセイが行われる場所でもあります。

   血清カルシウムおよびアルブミンならびにスポットの朝の空腹時尿は、研究の最初の年は毎月、2年目は2か月ごとに監視されます。 これらのアッセイは、便利なサンプルとして Quest Diagnostics Laboratory を通じて実行されます (つまり、収集時に実行されます)。

   治験責任医師が治験薬に関連すると考える臨床的異常または検査異常は、次のように管理されます。

   高カルシウム血症 (>10.5 mg/dl、アルブミン補正) が発生した場合は、カルシウムの投与量を 1 日あたり 250 mg 減らし、1 週間後にレベルを再チェックします。 異常が解消されない場合は、正常レベルに達するまで、またはカルシウムの補給を中止するまで、経口カルシウムを毎週段階的に減らします。 ビタミン D3 またはプラセボは、血清カルシウムが正常に戻るまで控えます。

   異常が持続する被験者は、担当医師に紹介されます。 ビタミン D3 またはプラセボは、血清カルシウムが正常に戻るまで控えます。

   重度の高カルシウム血症が発症した場合 (>12.0 mg/dl)、すべてのカルシウム サプリメントおよびビタミン D/プラセボを直ちに中止し、被験者を研究から除外します。

   高カルシウム血症 高カルシウム尿症が発生した場合 (スポット尿検体で尿中カルシウム/クレアチニン比 >0.25)、被験者は確認のために 24 時間の尿収集を行います。 確認された高カルシウム尿症 (> 4mg/kg/24 時間) の場合、カルシウムの投与量を 250mg 減らし、1 週間後にスポット尿を繰り返します。 異常が解消されない場合は、高カルシウム血症が解消されるか、カルシウムの補給が中止されるまで、カルシウムの毎週の段階的な減少が続きます. 必要に応じて、尿カルシウムが正常に戻るまで、ビタミン D3 またはプラセボを差し控えます。

   低カルシウム血症が発生した場合 (< 8.4 mg/dl、アルブミンで補正)、血中尿素窒素、血清電解質、クレアチニン、25-OHD、PTH、クレアチニン、マグネシウム、およびアルブミンのために採血します。

   -ビタミンD欠乏症（25-OHD <10 ng / dlおよびPTH > 73）に関連する低カルシウム血症が確認された被験者は、研究から取り下げられ、治療のために医療提供者に紹介され、研究から取り下げられます

   ビタミンD欠乏症のモニタリング

   研究の最初の年の間、25-OH および iPTH の測定のための血清は、2 番目の研究年の間に毎月および 2 か月ごとに引き出されます。 各被験者の検体は採取直後に凍結され、-70 度で保管される SLRHC に移されます。 1 年間隔で、各被験者のサンプルは「バッチ」方式で分析されます。 これらの毎年の決定に基づいて、冬と夏の両方の月を通して持続する持続的なビタミン D 欠乏症 (25-OHD < 10ng/l および PTH > 73) を持つ被験者は、研究から除外され、医療提供者に紹介されます。

   これらの特定の異常の発生率は低いと予想されます。 同じ用量のビタミン D3 (100,000 IU) が 60 日ごとに 6 か月間投与された以前の研究では、Guillemant ら.季節性ビタミンD欠乏症の13～16歳のフランスの思春期男性に高カルシウム血症の事例は報告されていません(Guillemant 2000)。 さらに、シェーン博士によって実施された進行中の研究 (心臓移植後の骨粗鬆症の予防、ROI AR 46124-04) では、ビタミン D の代謝的に活性な形態であるカルシトリオール (0.25 ug BID) を投与された 74 人の被験者の間で、 400 mg/g クレアチニンを超える尿中カルシウム排泄は 4 回のみでした。 これらの被験者は、カルシトリオールを服用しているほかに、尿中カルシウム排泄も増加させるコルチコステロイドを投与されていました。 コルチコステロイドは、本研究では許可された同時投与薬ではありません。

   ビタミン D3 が HIV 感染や抗レトロウイルス薬に悪影響を与えるとは考えていません。 ただし、CD4 数または CD4% に基づいて、そうでなければ説明できない免疫状態の低下を経験する HIV 感染被験者、または治験薬に関連している可能性があると治療担当医が信じている HIV ウイルス負荷の測定値の増加は、研究から除外されます。参加。 CD4 数、CD%、および HIV ウイルス負荷の測定値は、標準治療に従って臨床治療施設で測定されます。 結果は担当医師によって監視されます。

   １年間の治療中のＤＸＡでＴＢＢＭＣのｚスコアがベースラインから＞０．５低下した被験者は、研究を中止し、治療する医師による追加の臨床評価のために紹介される。 さらに、低衝撃または繰り返しの骨折が発生した場合、担当医師、安全担当者、および治験責任医師による臨床評価により、被験者が治験を継続すべきかどうかが決定されます。治験被験者の DXA スキャン結果のモニタリングは、ホーリック博士が行いますセント・ルークス・ルーズベルトの小児体組成研究所の共同研究者兼所長。

   最後に、これは子供を対象としたプラセボ対照試験であるため、12 か月の治療データで実行される中間データ分析を含めることを選択しました (ヒト被験者、セクション E.)。 NIHガイドラインに従って、生物統計学、小児HIV疾患、小児内分泌学、および小児骨獲得の専門家で構成されるデータ安全監視委員会が設立され、安全性と有効性に関する研究結果を監視し、相談に応じて研究を早期に終了するための基準を確立します。これらの基準が満たされているかどうか、いつ満たされているかを判断します。

   A.3.n データ分析と検出力の計算 特定の目的 1: HAART を受けている HIV に感染した小児および青年の骨ミネラル増加に対するカルシウムおよびビタミン D3 補給の効果を決定すること。

   この研究の主な仮説は、プラセボを投与された被験者と比較して、ビタミン D3 とカルシウムを投与されるように無作為に割り付けられた HIV 感染被験者で BMC と BMD が増加するというものです。 この仮説を、治療意図分析を使用して、ベースライン時および無作為化の 1 年後と 2 年後に行われた全身および脊椎の DXA スキャンによって測定された TBBMC、TBBMD、SBMC、および SBMD を比較することによってテストします。

   共分散の反復測定分析を使用して、骨発生データを分析します。 治療群とプラセボ群の間の骨ミネラル含有量の違いは、試験への参加時にグループ間で起こりうる違いを制御しながら、1年と2年で比較されます。 グループ間の主効果 (ビタミン D3 とカルシウム対プラセボ) は、グループ間に全体的な違いがあるかどうかをテストしますが、グループ内 x 時間相互作用効果は、グループ間の違いが 2 つのフォローアップで一定であるかどうかをテストします。年まで。 ビタミン D3 とカルシウムのグループの変化の大きさも BMDCS からの標準データと比較して、予備研究のセクション C.5 に示されているアルゴリズムを使用して、各グループの何人の子供が正常範囲内のレベル (95 % CI) に達しているかを判断します。 .

   以前のパイロット データに基づくと、7 ～ 14 歳の HIV 感染した 30 人の子供の TBBMC の年間平均変化は 120 g で、標準偏差は 84 でした。 男児と女児で SD の差が認められた。 控えめな推定値を維持するために、女の子で観察された SD を選択しました。 これは、プラセボ群で観察される年間変化のレベルであると想定できます。 Pediatric Rosetta Project (NIDDK 37352) のデータに基づくと、1,300 人を超える子供を対象とした横断研究では、健康なアフリカ系アメリカ人およびヒスパニック系の子供の 7 ～ 14 歳の TBBMC の年間平均変化は 195 g です。

   したがって、プラセボ群の 120 g の平均年間変化とビタミン D3 およびカルシウム群の 195 g の変化を比較した効果量 (d) は 0.89 です。 各グループの 21 人の子供は、アルファ = 0.05 およびベータ = 80% でこの大きさの効果サイズを検出するのに十分です。 各グループのサンプルサイズを 30 人の子供に増やすと、検出力はビタミン D3 とカルシウムのグループとプラセボグループの間で 61 gm の差をアルファ = 0.05 で検出力 = 80% で検出するのに十分です。 これは、カルシウム (RDA の 110%) またはプラセボ (Lloyd 1996) を投与された、健康な思春期の少女 (平均年齢 11.9 歳) の臨床試験で観察された違いに匹敵します。

   研究中の治療グループ間の性的成熟率の違いは、骨量の結果に対する重要な要因に関してグループの「バランスを崩す」可能性があります。 これに対処するために、分析の共変量として使用する標準化された測定の思春期段階を含めました。

   特定の目的 #2: ミネラル代謝の指標と骨代謝回転のマーカーに対する HIV 感染とビタミン D およびカルシウム補給の影響を決定します。

   ミネラル代謝の指標は異常であり（低血清25（OH）DおよびPTHの上昇）、骨形成および骨吸収の生化学的マーカーは、正常な対照と比較してHAARTのHIV感染児で増加していると仮定し、ミネラル代謝とマーカーの指標ビタミンDとカルシウムの補給を受けるために無作為に割り付けられたHIV感染の子供と青年では、骨の形成と吸収が正常に戻ります. この仮説を最初に、HIV に感染した健康な子供および横断研究に登録された青年の骨代謝回転のマーカー (オステオカルシン、BALP、および N-Tx) を比較して、独立したサンプルの t 検定を使用して平均を比較します。

   ビタミン D とカルシウムのサプリメントを投与された HIV に感染した小児および青年における骨代謝回転マーカーの縦方向の変化も、プラセボを投与された患者と比較されます。 ビタミン D 代謝産物と骨代謝回転のマーカー ((オステオカルシン、BALP、および N-Tx) のレベルを間隔を置いて採取し、混合モデル回帰を使用して分析し、時間の経過に伴うこれらの測定値の傾向をモデル化して、これらの変数間の依存関係を評価します。

   特定の目的 #3: HAART を受けている HIV に感染した子供および青年のビタミン D 貯蔵を評価する。

   ビタミン D ストアは健康なコントロールと比較して HIV 感染児で減少していると仮定します。

   これをテストするために、HAART を受けている HIV 感染した子供と青年のビタミン D 代謝産物の血清レベルとミネラル代謝の指標 (25(OH)D 1,25(OH)2D) と PTH) を健康な対照と比較します。 これを検証するためのデータは、横断研究から得られます。 HIV感染グループは、研究への募集のためにスクリーニングされたHIV +子供のサンプルで構成され、健康グループは、同じ近所から募集された同様の年齢の子供で構成されます（HIV陽性子供の健康な兄弟を含む）。 HIV陽性の子供の血清ビタミンD代謝物とPTHのスクリーニングレベルは、独立したサンプルt検定を使用して健康な子供のレベルと比較されます。

   関心のある主な変数は 25(OH)D で、ビタミン D の貯蔵を最もよく反映しています。 以前のパイロット データに基づくと、HIV 感染被験者の 25(OH) の平均値 (SD) は 21 (11) ng/ml です。 本研究のサンプル サイズは、アルファ = 0.05 で 8 ng/ml の 25(OH) D の変化を検出する 80% の検出力を持っています。 次に、一般的な線形回帰モデルに基づく共分散分析を使用して、人種、性別、ビタミン D の推定食事摂取量、日光曝露などの他の要因を制御した後、可能なグループ差が残っているかどうかを判断します (研究の月を代用として使用)。日光暴露）。

   特定の目的 #4: HAART を受けている HIV に感染した小児および青年の骨量の決定要因がビタミン D 貯蔵量であるかどうかを評価する。

   私たちの仮説は、HAART を受けている HIV に感染した子供と青年の間で、血清 25(OH)D によって測定されるビタミン D 貯蔵量が骨量の重要な決定因子であるというものです。

   これらの変数と HIV 感染した子供と青年の TBBMC との関係を評価します。 これは、少なくとも 60 人の HIV 感染した小児および青年のサンプルから得られたデータの分析を通じて実施され、縦断的臨床試験への登録のためにスクリーニングされます。 HIV 陽性グループ内では、線形回帰を使用して、抗ウイルス薬、免疫不全マーカー (CD4count)、HIV ウイルス量、およびサイトカインのレベルを含む HIV 関連の要因が、血清ビタミン D レベルと骨量の予測に役割を果たすかどうかを判断します。 モデルに含まれる追加の共変量には、年齢、性別、人種、身長、体重、思春期が含まれます。

   これらの分析は、異常な骨量の病因と改善に関与する中間応答変数の両方の潜在的な機械的経路の開発を可能にするため、この臨床試験および分析に含めるために特に重要な測定値です。

   重回帰モデリングを使用して、TNF、IL-6 ビタミン D レベル、および TBBMC の関係を評価します。 スクリーニングされた HIV 陽性の子供の 50% が試験の選択基準を満たし、約 100 から 120 人の HIV 陽性の子供が横断的比較に利用できると推定されているため、同数の健康な子供も対象となります。募集した。 合計 200 人の子供の場合、サンプル サイズは、グループ化因子 (HIV 陽性対健康) に加えて最大 18 の共変量を追加し、アルファ = 0.05 および検出力 = で R2 の 5% 増加をテストするのに十分な大きさになります。 80%。 100 人の HIV 陽性の子供のサンプルだけで、結果変数 (TBBMC など) の分散の少なくとも 15% (アルファ = 0.05、検出力 = 80%) を集合的に説明する最大 9 つの予測因子を含む回帰分析が可能になります。 .