概日リズムの乱れが煙の吸入に及ぼす影響

参加者: 健康な大学時代の男性 (n = 15)、睡眠障害がなく、最近 (過去 2 週間以内に) 子午線横断旅行をしていない者が、この研究のために募集されます。 参加者は、中間のクロノタイプを確立するためにクロノタイプ アンケート (朝-夕方アンケート; MEQ、ミュンヘン クロノタイプ アンケート; MCTQ) に記入します。 これにより、朝の煙への暴露に対する概日嗜好の影響が最小限に抑えられます。 参加者はその後、実験期間中の睡眠と身体活動を監視するために活動モニター (ActiCal) を装備します。 参加者は、実験に至るまでの少なくとも 3 日間は通常の睡眠スケジュールを維持し、確認のために睡眠ログを記録するよう求められます。

実験的試験: 参加者は、ランダム化されたクロス オーバー デザインで 2 つの実験的試験を受け、試験間に少なくとも 1 週間のウォッシュ アウト期間があります。 1) NS-250: 250 μg/m^3 の木煙への曝露による通常の睡眠、および RS-250: 250 μg/m^3 での木煙への曝露による制限睡眠。 参加者は、NS 試験 (22:00-06:00) 中に自宅で 8 時間の睡眠の機会があり、RS 試験 (00:00-04:00) 中に 4 時間の睡眠の機会があります。 すべての試験で、参加者は実験的な睡眠の夜の翌朝 07:30 に研究室に報告します。 PM 暴露は、消防の身体的要求をシミュレートするために 70% の予備心拍数 (HRR) でサイクリングしている間、08:00 ～ 08:45 に発生します。

呼気凝縮液 (EBC): EBC は、標準化された 10 分間の収集技術を使用して収集されます。 潜在的に不安定なバイオマーカー (酸化ストレスなど) のサンプルの完全性を維持するために、サンプルの pH は、複数のクライオチューブ (500 ～ 700 μl) に分注する直前に測定し、瞬間凍結し、さらなるアッセイまで -80 ℃ で保存します。 酸化ストレスと炎症の標準化されたバイオマーカーパネルは、単一の解凍アプローチを使用して実行されます。

炎症性バイオマーカー分析: PM2.5曝露の前(PRE)および直後(POST)に血液をヘパリン化バキュテナーに採取し、血漿採取のためにスピンダウンします。 血漿は、標準的な酵素結合免疫吸着アッセイ（ELISA）を使用して、炎症性バイオマーカー（インターロイキン（IL）-6、腫瘍壊死因子（TNF）-α、ペントラキシン-3、およびC反応性タンパク質（CRP））についてアッセイされます。

概日リズムの評価: 実験プロトコル全体を通して、概日リズムは 2 つの方法で評価されます。 1) アクチグラフィーおよび 2) 頬細胞スワブにおける時計遺伝子発現。 睡眠の変数 (タイミング、持続時間、質) を収集するために、アクティカルをずっと着用します。 時計遺伝子発現 (CLOCK、BMAL1、PER2) は、6 時間間隔 (00:00、06:00、12:00、18:00) に頬から採取したスワブで測定され、分子への睡眠不足の影響を評価します。概日リズム。 頬の綿棒は、分離まですぐに RNA 安定化バッファーに配置されます。 00:00 に採取されたスワブは、睡眠の中断を避けるために最小限の光への露出で実行されます。 これらの方法は、通常の睡眠と中断された睡眠を評価するために以前に使用されてきました。