結核性胸水および非結核性胸水における結核菌セルフリー DNA (MTB cfDNA) の診断上の有用性 (MYDNITE-2)

結核（TB）は依然として世界的に重要な感染症の負担となっています。 世界保健機関（WHO）の2023年の世界結核報告書によると、結核は2022年に新型コロナウイルス感染症に次いで感染性死亡原因の第2位となっている。 結核性胸膜炎（TBP）は最も一般的なサブタイプの 1 つである肺外結核は、診断が難しいため、世界的な結核対策にさらなる障害をもたらします。 ＴＢＰの発生率には大きな地理的変動があり、全結核患者に占めるＴＢＰの割合は２．２％から３１．４％の範囲である。 TBPの発生率の増加は、中国の2つの大規模な後ろ向きコホート研究で指摘されています。

TBP の少細菌性の性質は、その診断上の課題につながります。 代表的な診断検査であるにもかかわらず、胸水結核菌 (MTB) 培養の診断感度は最適以下です。 培地と HIV の状態に応じて、7.0% から 75.0% の間で変化します。 納期が約 4 ～ 8 週間と長いため、臨床での実用性も損なわれます。 Xpert MTB/RIF や Xpert Ultra などの市販の PCR 技術は、陽性結果が得られる迅速かつ特異的な検査です。 ただし、感度が最適ではないため、その有用性は制限されます。 組織学のための胸膜生検および組織学/培養を組み合わせた場合、感度は 66% および 79% に上昇する可能性がありますが、この手順は胸腔穿刺よりも侵襲的です。 胸水アデノシン デアミナーゼ (ADA) は最も一般的に研究されているバイオマーカーであり、40 U/L のカットオフで診断感度と特異度は 0.93 と 0.90 です。 そのカットオフ範囲は、患者の特性（年齢、併存疾患）によって異なる場合があります。 したがって、TBP の診断が難しいため、抗結核治療の開始が遅れることになります。 経験的な抗結核治療は、微生物学的診断結果を確認せずに、適合する臨床症状に基づいて開始される可能性があり、治療毒性（例：結核菌など）のリスクを伴います。 肝毒性）。 これは、TBP のより優れた診断ツールに対する臨床上のニーズが満たされていないことを示唆しています。

胸水中の MTB セルフリー DNA (cfDNA) を検出すると、上記の問題が解決される可能性があります。 これは、侵襲性が最小限であり、最も重要なことに、胸膜腔内の MTB を直接確認できる潜在的な診断ツールです。 しかし、以前の PCR ベースの方法では、TBP を診断するための感度が最適ではなく、約 40 ～ 80% であると報告されていました。 感度は、検出における低レベルの MTB cfDNA と単一遺伝子ターゲット (IS6110 または devR) によって制限される可能性があります。 次世代シーケンス (NGS) 技術の進歩により、メタゲノム NGS (mNGS) による微生物の cfDNA の検出が感染症の診断に応用されています。 チャンら。らは以前、結核診断のための血液および尿サンプル中の mNGS の使用を評価しました。 彼らは、そのような方法論が、低MTB濃度と、病原性MTBと類似の配列を共有する非結核性抗酸菌（NTM）DNAの混入の背景によって制限されることを明らかにした。

私たちのグループは最近、MTB cfDNA レベルを測定する新しい実験室アッセイを開発しました。 私たちは、新しい MTB cfDNA アッセイは、TBP による胸水を非 TBP から区別する際に、従来の微生物学的方法よりも優れた診断性能を備えていると仮説を立てています。 開発コホートには限られた数の胸水サンプルしか含まれていないため、臨床現場に導入される前に臨床的有用性を確認するには、幅広い原因の胸水を含む大規模な確認研究が必要です。 この研究には 3 つの大きな目的があります。 まず、TBP の診断における新しい MTB cfDNA アッセイの診断精度は、結核罹患率が異なる国々からのさまざまな原因の胸水サンプルを含む大規模コホートを使用して決定されます。 第二に、胸水 MTB cfDNA レベルを決定する臨床的および検査的要因が特定されます。 第三に、このアッセイがさまざまな抗結核薬耐性遺伝子を捕捉する能力を、DR-TB 流行地域の胸水で調査する予定です。