香港における結核菌セルフリー DNA の診断的有用性 (MYDNITE-3)

結核（TB）は依然として世界的に重要な感染症の負担となっています。 世界保健機関 (WHO) の 2023 年の世界結核報告書によると、2022 年には 700 万人以上が結核に感染し、130 万人が結核で死亡しました。 中国は結核負担が最も高い上位 3 か国の中に入るが、香港の結核負担は中間であり、新規感染者数は年間平均 4,000 人である。

結核感染は、患者の約 25% で肺実質の外側にさまざまな症状を示す疾患 (肺外結核、EPTB) を引き起こす可能性があり、肺結核よりも悪い治療成績と関連しています。 結核性胸膜炎 (TBP) は、香港と中国で最も蔓延している病型です (全 EPTB の 41% ～ 50%)。 TBP は急性から亜急性の片側胸水、息切れ、発熱を呈することがありますが、その症状は非特異的であることがよくあります。 TBP は臨床的および疫学的に重要であるため、診断プロセスを短縮し、これらの患者の転帰を最適化するには、TBP を他のタイプの胸水から正確に識別することが重要です。

TBP を診断するための臨床検査の課題 TBP は胸膜腔内の少数の細菌 (少数細菌性) によって引き起こされるため、診断は困難であり、これにより従来のさまざまな診断法の診断性能が制限されます。 これらの制限には、胸水微生物学的検査 (抗酸菌 [AFB] 染色、結核菌 [MTB] 培養および MTB ポリメラーゼ連鎖反応 [PCR]) の感度が低いこと、および胸水バイオマーカー (アデノシン デアミナーゼ [ADA]) に対する特異性の欠如が含まれます。特に結核罹患率が低い地域では。 胸膜組織での MTB 培養および PCR の収率はより高くなりますが、胸膜生検 (ベッドサイド手順または胸膜鏡検査による) は侵襲性があり、追加の手順が必要です。 現在、高い検出感度、他の疾患を除外する高い特異性、短い所要時間、低侵襲性、薬剤耐性の検出など、複数の診断目標を同時に達成できる理想的な検査はありません。 TBP の診断は実際には、臨床、放射線学的、および検査室のエンドポイントの複合に基づいています。 診断は、微生物学的または組織学的証拠なしに臨床的に確立される場合があります (おそらくTBP)。

TBP 診断の遅れによる影響 TBP の診断が難しいことによる主な臨床的欠点には、不必要な侵襲的な胸膜介入と治癒治療の開始の遅れが含まれます。 最近、当社の内部監査により、確定検査の結果を待っている間に治療の開始が遅れ、患者は診断を確定するために中央値で1回の追加処置を必要としており、その中にはより侵襲性の高い胸膜生検が含まれていたことが明らかになった。 これらの患者は、未解決の発熱に対する精密検査や複数の抗生物質の治験のために長期入院していた。 一部の患者は、代わりに、確認的な診断調査結果が得られずに、互換性のある臨床症状に基づいて経験的な抗結核治療を受ける場合があります。 ただし、これにはリスクがないわけではありません（例: 肝毒性）、特にTBPにかかりやすい高齢者で顕著です。 TBP のより優れた診断ツールがあれば、これらの臨床上の課題が軽減されるでしょう。

胸水におけるリキッドバイオプシー: 当社グループの最新開発 体液中の無細胞 DNA (cfDNA) を検出するリキッドバイオプシーは、潜在的な解決策です。 結核菌が死ぬか分解すると、DNA 断片が胸膜腔に放出され、結核菌 cfDNA (MTB cfDNA) が形成されます。 胸水中の MTB cfDNA を検出すると、胸腔内に TB 桿菌またはそのサブユニットが存在することを直接証明できるため、これは魅力的なオプションです。 以前の研究ではTBPの診断にMTB cfDNAが採用されていましたが、そのパフォーマンスにはばらつきがありました。 Cheらはまず、IS6110挿入配列を検出することによってMTB cfDNAを測定した。 TBPを診断する感度は75.0%でした (95% 信頼区間 [CI] 63.7-86.3%) 特異度 100.0% (95% CI 100.0-100.0%)、 胸水 MTB 培養陰性症例は TBP 群に含まれた。 MTB cfDNA の診断感度は、Xpert MTB/RIF による胸水 ADA、MTB 培養および MTB PCR よりも優れていました。 Yangらは、同じ検査技術を採用し、胸水MTBまたはPCR陽性状態によって定義されるTBP症例において96.6％（95％CI 92.0～100.0％）という高い診断感度を発見した。 ただし、診断感度は 79.5% (95% CI 72.4-86.7%) に低下しました。 胸水MTB培養またはPCR陰性症例がTBPグループに含まれている場合。 同様の発見は Sharma らによっても報告されました。 これらすべての研究結果は、MTB cfDNA の不均一な診断性能を反映しています。 胸水 MTB 培養または PCR ステータスが陰性であり、細菌量が低いことを示す場合、MTB cfDNA の臨床的有用性が損なわれる可能性があります。

私たちのグループは最近、キャプチャープローブシステムと新しいバイオインフォマティクスアルゴリズムによるターゲットシークエンシングを含む、MTB cfDNAレベルを測定する新しい実験室アッセイを開発しました。 胸水 MTB 培養陰性症例が含まれていたにもかかわらず、診断性能は依然として堅調であり、別の侵襲的な診断手順を回避できる可能性があります。

臨床現場に導入する前に検証コホートが必要である 開発コホートには確定診断が得られる限られた数の胸水サンプルしか含まれていないため、新しい MTB cfDNA アッセイの真の診断精度は、前向きの非選択的コホートを反映してのみ決定できます。現実世界の状況に基づいて、現実的な診断パフォーマンスを提供します。 これにより、臨床現場に導入される前に、MTB cfDNA アッセイの臨床的有用性が確認されます。 我々は、新しい MTB cfDNA アッセイが将来のコホートにおいて依然として堅牢であり、TBP による胸水を非 TBP から識別する点で以前に報告された方法よりも優れていると仮説を立てます。