추간판의 무증상 Propionibacterium Acnes 감염 추정(SPInE-ID) (SPInE-ID)

소개 요통은 일반 인구의 최대 6%, 환자의 최대 46%에 영향을 미치는 Modic et al.(1,2)에 의해 기술된 척추 종판 이상뿐만 아니라 인구에서 빈번한 상태입니다. 요통으로(3). Modic 유형 I 변화는 급성 요통과 관련된 척추 골수 부종으로 설명됩니다(4). Modic 변화가 감지되면 비특이성 요통을 나타낼 가능성이 4.5배 더 높습니다(1,2).

독성이 낮은 병원체에 의한 준임상 감염은 자기 공명 영상(MRI) 연구에서 발견되는 척추 종판 이상을 유발할 수 있으며 감염과 Modic 변화 사이의 구별이 어려울 수 있습니다(5,6). 무증상 감염은 또한 요통 증가와 연관될 수 있습니다(7). Albert 등(8)은 요추 추간판 탈출증에 대한 외과적 치료를 받은 61명의 환자를 보고했으며, 사례의 46%가 양성 배양을 보였습니다. 같은 저자는 또한 혐기성 병원체에 대해 양성 배양을 한 환자의 80%가 2년 추적 조사 후 인접한 척추에서 Modic 유형 I 변화를 나타냈고 음성 배양 환자의 44%에 대해 보고했습니다. 일부 연구에서는 추간판 조직 배양(6-10)에서 독성이 낮은 병원균의 존재를 입증했으며(6-10), 가장 일반적으로 Propionibacterium acnes에 보고되었습니다.

만성 요통 및 Modic 유형 I 변화는 가짜 치료에 비해 우수한 결과로 최대 100일 동안 항생제로 치료되었습니다(7). 환자들은 좌골신경통이 프로피오니박테리움 아크네스(8)와 연관되어 있다는 연구에 근거하여 아목시실린/클라불라네이트(500mg/125mg)(7)로 치료를 받았습니다.

그러나 Carricajo 등(11)은 추간판에 P. acnes가 존재하는 것은 외부 수술이나 검사실 오염 때문이라고 제안합니다. 이 저자들은 54명의 환자 중 3.7%에서만 양성 디스크 배양을 발견했습니다. 또한, 동일한 저자는 절차가 끝날 때 수술 중 수집된 척수 근육 및 황색 인대 샘플이 디스크 배양 음성인 경우의 14.8%에서 양성 배양을 가졌다는 것을 입증했습니다.

Urquhart 등(12)이 수행한 체계적 검토에서는 긍정적인 문화와 Modic 유형 I 변화 및 요통 사이의 관계에 대한 중간 정도의 증거가 존재하지만 원인과의 관계에 대한 증거는 낮았다고 결론지었습니다. 이를 위해 저자들은 추간판 내 병원균이 외부 오염에 의한 것인지 아니면 만성 요통의 발생에 진정으로 관여하고 있는지를 규명하기 위한 새로운 연구가 이루어져야 한다고 결론지었다.

가설 요추 추간판 탈출증은 추간판의 무증상 감염과 관련이 있습니다 귀무 가설: 수술 치료를 받은 요추 추간판 탈출증 환자에서 무증상 감염의 발생률은 감염이 없는 경우와 동일합니다.

OBJECTIVES 이 연구의 주요 목적은 추간판에 감염 병원균의 존재가 실제인지 또는 수술 중 오염인지 확인하는 것입니다.

2차 목적은 환자의 임상적 예후인자와 감염의 진단을 분석하는 것이다. 이 연구는 또한 방사선학적 변화(Modic I 및 II)와 감염 사이의 관계를 분석할 것을 제안한다.

행동 양식

연구 설계:

공개 전향적 코호트 연구가 단일 센터(이스라엘리타 앨버트 아인슈타인 병원 - HIAE)에서 모집에 1년이 걸리고 마지막 환자 포함 후 1년에 종료됩니다. 환자의 데이터는 이 연구를 위해 생성된 특정 양식으로 수집됩니다. 환자는 수술 후 1년 후에 요추의 새로운 자기 공명 영상을 위해 소환됩니다.

포함된 모든 환자는 수술 후 물리 치료의 10회 세션에 대한 추가 치료를 받게 됩니다.

인구:

요추 감압 개복 수술(현미경 추간판 절제술) 중 요추 추간판 탈출증에 대한 보존적 치료에 실패한 환자를 순차적으로 본 연구에 포함시킨다.

연구에 환자 등록:

참여를 수락하는 환자는 정보에 입각한 동의서(ICF)에 날짜를 기입하고 서명합니다. ICF에 제대로 서명한 후 환자는 인터뷰를 통해 초기 인구 통계 데이터 및 전처리 양식을 작성합니다.

환자 모집은 24개월 동안 수행되며, 이때 95명의 환자가 포함됩니다(샘플 크기 결정 시 보고된 예상 n의 세부 사항).

환자 할당:

환자는 외과 의사의 선호도에 따라 수술을 받게 됩니다. 주치의는 경험과 선호도에 따라 선택한 수술 기술을 결정합니다.

눈부신:

환자는 주치의뿐만 아니라 병원체에 대한 조직 배양 결과에 접근할 수 없습니다.

수행된 자기 공명 영상 연구를 분석할 방사선 전문의는 또한 환자의 데이터나 실험실 배양 결과에 대해 눈이 멀게 됩니다. 맹검 수사관은 통증 및 기능 점수를 분석합니다.

연구 참여의 조기 중단:

환자는 다음과 같은 경우 연구에서 제외됩니다.

• ICF 철회
• 병든
• 환자 선택 결함 - 호환되지 않는 자격 기준
• 후속 조치에 실패
• 환자가 심한 요추 또는 신경근 통증, 다른 병소가 없는 발열, 비정상적인 ESR, CRP, 백혈구, 및 배양 검사 결과의 눈가림 중단으로 이어지는 영상 검사 변경과 같은 감염의 임상 증상을 나타내는 경우.

연구 단계

샘플 수집:

포함된 환자는 표준 패션 전신 마취를 받고 클로르헥시딘 용액으로 준비됩니다. 예방적 정맥 항생제는 병원 약학 매뉴얼에 게시된 HIAE 감염 통제 위원회의 표준 프로토콜에 따라 피부 절개 1시간 이내에 투여됩니다.

수술 전 혈액 샘플은 백혈구, 적혈구 침강 속도(ESR) 및 C 반응성 단백질(CRP)에 대해 수집됩니다. 동일한 실험실이 1, 6 및 12개월 시점에서 반복됩니다.

절제된 탈장 디스크 조각은 다음과 같이 처리하기 위해 30분 이내에 범용 멸균 용기(스크류 캡 튜브)에 있는 미생물 실험실 분석으로 즉시 보내집니다. 수술 절차가 끝날 때 심부 근육 및 황색 인대 샘플에도 동일한 프로세스가 적용됩니다. 각 환자에 대해 추간판의 3개 배양과 황인대 3개 및 다열근 3개를 배양할 것입니다.

병원체 검색:

탈출된 추간판은 2x2x5mm가 넘는 3개의 동일한 크기 조각으로 분할되고 균질한 재료가 얻어질 때까지 층류 캐비닛에서 찌그러집니다. flavum 인대 및 multifidus 근육 샘플에 대해 동일한 프로세스가 수행되지만 세 조각으로 나뉩니다. 조직은 특정 성장 배지에서 배양되고 각각의 배양에 따라 배양됩니다.

미국 전염병 학회(IDSA)에서 관절 대체 감염을 탐지하기 위해 사용하는 유사한 기준이 채택될 예정이며, 이는 감염 진단을 확인하기 위해 동일한 병원균에 의한 최소 2개의 양성 조직 배양에 대한 권장 사항입니다(13).

• A - 호기성 배양 호기성 배양의 경우 샘플을 5% 양 혈액 한천, 초콜릿 한천 및 MacConkey 한천 플레이트에서 배양하고 35°C 인큐베이터(CO2 대기)에서 5일 동안 배치합니다. 플레이트에서 양성 박테리아 배양이 검출되면 콜로니는 MALDI TOF(Matrix Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight) Microflex LT(Bruker Daltonics/BD)로 식별됩니다.
• B - 혐기성 배양 혐기성 배양의 경우 조직을 티오글리콜산 튜브에서 배양하고 최대 21일 동안 35°C 인큐베이터에서 배양합니다. Thioglycolate 배지가 탁해지면 혐기성 혈액 한천에서 배양하고 35°C에서 혐기성 분위기에서 배양합니다. 식민지 성장 후 식별은 MALDI TOF에 의해 수행됩니다.

• C - 조직학적 분석 다른 탈출된 디스크 조각(2x2x5mm)에 대한 해부학적 병리학적 분석이 수행됩니다. 샘플은 탐폰화된 포르말린(10%)과 함께 범용 용기로 운반되며, 그 다음 xylol에서 diafanized 알코올에서 탈수되고 hematoxylin-eosin(HE) 및 GRAM 염색으로 염색되는 파라핀(60-65°C)에 포함됩니다. .

  • HE: 4μm의 조직학적 절단을 수행한 후 자일롤로 10분 동안 2회 클리어링하고 농도를 증가시키는 알코올로 포매하고 5분 동안 헤마톡실린으로 염색하고 흐르는 물 5분, 에오신 1분, 흐르는 물 2분을 수행합니다. Entellan®으로 유리 현미경 슬라이드를 조립합니다.
  • 그램: 다른 슬라이드에 1분 동안 크리스탈 바이올렛을 묻히고, 1분 동안 흐르는 물에 이어 1분 동안 루골을 추가하고 흐르는 물로 추가 세척합니다. 슬라이드의 얼룩 제거는 알코올 95%로 10초 동안 수행한 후 흐르는 물에 이어 fuchsine으로 30초 동안 염색하고 다시 흐르는 물로 세척하고 건조하고 Entellan®으로 슬라이드 조립합니다.
• D - 병원균의 분자 분석 배양 중인 호기성 또는 혐기성 병원균을 제시하는 양성 배양균은 분리되어 후방 분자 분석을 위해 -80°C 냉동고에 냉장 보관됩니다.

결과 분석을 위해 Spe-I 제한 효소 및 Bionumerics 소프트웨어를 사용하여 Oprica et al.(14)에 의해 기술된 프로토콜에 따라 분리된 샘플의 Pulsed Field Gel Electrophoresis 기술을 통해 분자 타이핑을 수행합니다.

설문지 결과 측정 보기

이미징 연구 자기공명영상 연구는 Siemens 또는 General Electric 1.5T 장치에서 수행됩니다.

요추 추간판 탈출증은 적격 환자의 MRI를 통해 진단됩니다. 포함된 환자는 수술 후 12개월 후에 새로운 MRI에 제출됩니다.

근골격계 자기공명영상 전문의 2명이 독립적으로 분류하여 측정합니다.

교란변수 다음 교란변수에 대한 데이터를 수집합니다: 연령, 성별, 음주, 흡연, 체질량지수(BMI), 수술 전 6개월 이내 코르티코이드 척추 주사, 수술 전 3개월까지 경구 코르티코이드 사용, 당뇨병 .

이 정보는 시간이 지남에 따라 변경될 수 있으므로 데이터는 수술 전 마지막 평가 시점에 고려됩니다.

통계적 계획 무증상 감염률(또는 Modic 변화)은 수술 샘플의 양성 배양 수와 총 환자 수 사이의 비율로 얻어지며 추정치는 95% 신뢰 구간을 따릅니다. 감염 사례가 확인된 후 Modic 변화에 대한 로지스틱 회귀 모델, Modic 볼륨 및 크기에 대한 서수 로지스틱 회귀, 다음과 같은 수치 결과에 대한 선형 회귀 또는 일반 선형 모델을 통해 감지된 감염과 환자 결과 사이에 연관성이 있는지 조사합니다. : 요통, 삶의 질 및 기능. 모든 모델은 흡연 및 알코올 섭취, 당뇨병, 코르티코스테로이드 주사, BMI, 성별 및 연령과 같은 교란 변수를 고려합니다. 결과는 승산비 또는 평균비, 95% 신뢰 구간 및 p 값과 같은 효과 추정치로 표시됩니다. 이유를 불문하고 연구 중단 사례는 최종 분석을 위해 고려됩니다.

표본 크기 계산 요추 추간판 탈출증 환자의 무증상 감염 발생률을 추정하기 위해 표본 크기를 계산했습니다. 감염률이 약 46%(3)라는 점을 고려하면 10% 절대 정확도로 95% 신뢰 구간을 달성하려면 최소 95명의 환자를 관찰해야 합니다.

이차 종점을 분석하는 데 필요한 샘플 크기는 연구 샘플에서 관찰된 무증상 감염 사례 비율에 따라 달라집니다. 관찰된 비율이 너무 작으면 포함된 환자 수를 늘려야 합니다. 이를 더 잘 평가하기 위해 초기 계획된 샘플 크기(환자 48명)의 절반에 도달할 때까지 샘플 크기 계산을 다시 검토할 것입니다.