패혈증의 토대를 밝히기 위한 치주 치료의 균혈증

패혈증의 토대를 밝히기 위한 치주 치료로 인한 균혈증 가설 심혈관 질환(CVD) 및 패혈증과 관련하여 이 연구는 (1) 치주 질환이 치주 질환을 치료함으로써 어느 정도 역전될 수 있는 특정 CVD 표현형을 유발하고; (2) 패혈증 클리닉에서 사용할 수 있는 바이오마커를 평가하기 위한 인간 균혈증 모델로 비수술적 치주 치료를 사용할 수 있다. (3) 내인성 항미생물 펩티드 프로파일이 균혈증의 중증도를 지시한다; (4) 구강 생물막의 단백분해효소가 구강 세균 및 그 생성물에 의해 유도된 세균혈증의 중증도에 영향을 미칠 수 있습니다.

Aims A. 치료되지 않은 그룹과 비교하여 치주 질환 치료로 인한 장기 임상 및 'omics 관련 CVD-표현형 효과는 무엇입니까? B. 균혈증 또는 이전 균혈증을 검출하기 위해 바이오마커를 사용할 수 있습니까? C. 심혈관 바이오마커에 대한 균혈증의 영향은 개인의 항균 펩타이드 프로필과 관련이 있습니까? D. 진기페인과 같은 세균성 프로테아제의 존재가 치주 치료로 인한 균혈증 및 균혈증으로 인한 전신 반응과 관련이 있습니까? 프로젝트 설명 치과 의자와 패혈증 강도 치료실의 임상 문제에 답하기 위해 조사관은 Bacteremia 연구를 설계했습니다. 목표 1은 중재 연구이고 목표 2와 3은 협회의 병태생리학적 토대를 조사하는 것입니다. 치주 질환이 있다는 말을 들었음에도 불구하고 치과 치료를 받지 않은 CVD 표현형 Malmö Offspring Dental Study(MODS) 참가자에 대한 치주 치료의 장기적 효과를 연구할 때 비치료 대조군으로 초대될 것입니다. 주요 결과 변수는 연간 총 경동맥 플라크 면적(TPA)의 변화입니다.

목표 2와 3에서 매개변수는 균혈증의 다양한 측면을 해부하는 데 사용됩니다. AMP 프로필은 더 심각한 균혈증(혈액 배양으로 측정)이 있는 대상과 균혈증이 없는 대상에서 다를 수 있습니다. 1차 결과는 혈액 배양이 음성인 사람과 비교하여 균혈증(양성 혈액 배양) 동안 및 이후에 CVD 바이오마커의 농도가 될 것입니다.

모집 참가자들은 Lund에 있는 Skåne의 Swedish Dental Service에서 Periodontics 부서로 모집됩니다. 포함 기준은 치주 질환(PD)이 5mm 초과인 2개 이상의 치아가 있는 1개 사분면이며 혈액 샘플을 채취할 때 이 사분면이 치료됩니다. 치료는 기계적 비수술 치주 치료입니다. 제외 기준은 치주 치료 시 예방적 항생제가 필요한 상태입니다.

모집된 참가자 수 이 연구는 100명의 참가자와 치주 치료를 받지 않은 MODS 참가자의 재검사를 모집합니다. 불행하게도 치주 치료에서 균혈증에 관한 이용 가능한 문헌은 매우 이질적이어서(13-75%) 의미 있는 검정력 계산을 수행하기 어렵습니다. 조사관은 100명의 참가자를 결정했으며 이는 윤리 심사 기관의 승인을 받았습니다.

심혈관 표현형 기준선과 1년 및 2년 후 참가자는 Skåne 대학 병원의 임상 연구 부서(Kliniska Forskningsenheten, KFE)에서 심혈관 표현형을 받습니다. 이 프로젝트의 심혈관 표현형은 아래에 언급된 몇 가지 무증상 매개변수를 기반으로 하지만 가장 중요한 것은 경동맥 플라크 영역 및 안정성 평가를 위한 경동맥 초음파입니다. Jönsson 부교수는 치주 질환과 경동맥 총 플라크 면적 사이의 연관성을 조사하는 간행물의 첫 번째 저자이자 Olle Melander 공동 저자입니다. 이 프로젝트의 경동맥 이미징은 Jönsson et al.과 동일한 장비를 사용하여 동일한 개인이 수행합니다.

• 양쪽 경동맥의 경동맥 초음파(GE logiq E9).

• 경동맥 플라크의 존재.
• 경동맥 플라크의 수.
• 경동맥 플라크의 면적.
• 비주얼 캡.
• 협착 정도.
• 경동맥 플라크의 회색조 중간(GSM).
• SGF(Statistical Geometric Feature) - 플라크의 반점. GSM 및 SGF(실제로는 SGF/플라크 영역 또는 SGF/협착 정도)는 초음파에서 플라크의 이질성을 나타내는 표현이며 사이토카인 발현뿐만 아니라 지질, 대식세포 및 출혈에 대해 염색된 플라크 영역과 관련이 있습니다. GSM이 플라크의 전반적인 에코 발생을 제공하는 반면 SGF는 플라크 내 그레이 스케일 수준의 분포를 설명하는 측정입니다.

프로젝트에 포함된 심혈관 표현형의 기타 매개변수:

• 혈압 - 앉아있는 혈압.
• BMI 및 엉덩이/허리 측정.
• 총 콜레스테롤(TC), LDL-C 및 HDL-C.
• 공복 혈당(FBG) 및 HbA1c.
• CVD와 관련된 유전자에 대한 GWAS. 혈액 배양 및 혈액 16S 시퀀싱 배양 및 혈액 16S 시퀀싱 분석을 위해 모든 시점에서 혈액을 채취합니다. 배양을 위해 본 연구의 채혈자는 배양을 위해 혈액을 채취하는 방법에 대해 감염 클리닉의 간호사로부터 교육을 받았습니다. - 시점당 4개의 혈액 배양 플라스크 - 각 팔에 하나의 혐기성 세균과 하나의 호기성 세균.

PBMC에서 혈액을 채취하고 DNA를 추출합니다. 후속 시퀀싱을 위해 16S amplicon 시퀀싱은 amplicon 시퀀싱 변이체(ASV) 기반 생물 정보학 파이프라인과 함께 사용되며, 이는 분해능을 높이고 박테리아의 더 많은 부분을 종 분해능으로 식별할 수 있게 합니다. 그런 다음 혈액 16S 시퀀싱의 결과를 구강 생물막의 내용과 비교합니다.

바이오마커 바이오마커는 이 프로젝트에서 두 가지 중요한 역할을 합니다. 첫째, 그들은 연구자가 평가하는 균혈증의 바이오마커이고 혈액 박테리아의 시퀀싱은 위에서 설명한 바와 같이 이전 균혈증의 바이오마커로 간주됩니다. 둘째, 아마도 더 중요한 것은 시스템적 반응을 종합적으로 반영한다는 것입니다. 균혈증은 패혈증을 일으킬 수 있지만 숙주 반응이 상태를 유발합니다.

분석을 위한 바이오마커는 병원 검사실로 즉시 보내지는 바이오마커와 모든 검체가 채취되면 조사관이 분석하는 바이오마커로 나뉜다. 즉시 분석된 바이오마커는

• 프로칼시토닌(PCT)
• 고감도 트로포닌 T(hsTNT)
• 고감도 C 반응성 단백질(hs-CRP)
• 뇌 나트륨 이뇨 펩티드(NT-proBNP)의 N-말단 프로호르몬

이후 단계에서 조사관은 다음을 분석할 것입니다.

• 중간 지역 pro-adrenomedullin (MR-pro-ADM)
• C-말단 프로엔도텔린-1(CT-pro-ET-1)

조사관이 모든 샘플을 수집하면 조사관은 OLINK 프로테오믹스와 같은 새로운 바이오마커 검출을 위해 다중 접근 방식을 활용합니다.

항균 펩타이드 항균 펩타이드는 그룹에서 이전에 발표한 작업에 따라 정량적 선택 반응 모니터링 질량 분석법(SRM-MS)으로 분석됩니다.

프로테아제 프로테아제, 특히 진지페인 형태의 포르피로모나스 진지발리스(Porphyromonas gingivalis)는 알츠하이머병의 질병 진행에 대한 진지페인의 효과에 대해 보고하는 최근 간행물을 통해 주목을 받았습니다. 프로테이나제 및 진기페인은 특히 GCF 및 혈장에서 분석될 것입니다. 이전 자금 지원 덕분에 연구자들은 Innovagen과 공동으로 Malmö 대학의 Bertil Kinnby 부교수 및 Claes Wickström 부교수와 공동으로 평가할 항진지페인 항체를 만들었습니다.

통계 목표 1 통계 - 개입 시험 측면은 주로 경동맥 총 플라크 면적(TPA)의 변화를 기반으로 합니다. TPA의 연간 변화는 MODS로부터 치료받지 않은 피험자에서 먼저 평가됩니다. TPA의 변화는 선형 회귀에서 종속 변수로 처리됩니다. 치주 치료 대 치료되지 않은 대조군이 독립 변수로 사용됩니다. 다른 독립 변수는 연령, 흡연 상태, 교육, 약물, 혈압 등과 같은 교란 요인이 될 것입니다. 그런 다음 연구자들은 OLINK 단백질과 같은 '오믹스 관련 바이오마커'를 독립 변수로 사용하여 계속할 것입니다.

목표 2 통계 - 심혈관 바이오마커와 균혈증 사이의 연관성을 조사하기 위해 조사관은 각 시점(그림 1)을 개별적으로 조사합니다. 균혈증과 CVD 바이오마커 간의 연관성을 조사하기 위해 양성 혈액 배양/이전 혈액 배양/콜로니 형성 단위(CFU)를 종속 변수로 사용하고 바이오마커를 로지스틱/선형 회귀 분석에서 독립 변수로 사용하여 교란자를 조정합니다. 양성 혈액 배양/이전 혈액 배양을 예측하기 위해 각각의 시점에서 균혈증의 바이오마커를 테스트하기 위해 ROC-곡선이 구성될 것입니다.

목표 3 통계 - AMP 프로파일의 영향을 평가하기 위해 개별 펩타이드가 주성분 분석(PCA)에 포함됩니다. 종속 변수로 바이오마커를 사용하고 독립 변수로 혈액 배양 및 PCA 요인을 사용하는 선형 회귀 모델을 구성합니다.

목표 4 통계 - 프로테아제는 혈액 배양 및 바이오마커를 각각 종속 변수로 하는 로지스틱 및 선형 회귀 모델에서 독립 변수로 포함됩니다.

microbiome에 대한 혈액 시퀀싱 결과는 3과 4의 목적에서 각각 바이오 마커와 혈액 배양에 미치는 영향과 관련하여 분석됩니다.

의의 CVD와 치주 질환 사이의 연관성에 대한 철저한 조사와 치주 질환이 CVD 과정에 미치는 영향에 대한 철저한 조사는 연관성을 이해하는 데 중요합니다. 수십 년간 빈번한 저등급 균혈증은 심장 전문의의 보다 개인화된 관심이 필요한 심혈관계에 더 심각한 손상을 야기했을 수 있습니다. 이 연구는 심장전문의가 무엇을 찾아야 하는지를 설명합니다.

패혈증의 맥락에서 현재 프로젝트는 상태를 시작하는 박테리아를 보다 정확하고 빠르게 표적화하여 더 많은 패혈증 환자가 질병에서 살아남도록 기여할 수 있는 잠재력을 가지고 있습니다. 혈액 배양보다 균혈증에 더 민감하고 빠른 분석이 가능한 바이오마커는 항생제 치료 시간 단축에 기여할 것이며, 이는 입원 기간 단축과 패혈증으로 인한 사망 감소에 가장 중요한 요소입니다.