슬관절 연골손상 환자의 활액조직 및 지방 패드 기질 혈관 분획 생명공학

소개: 연골 손상은 인구의 최대 63%에 영향을 미치며 통증과 중요한 기능 제한을 유발할 수 있습니다. 골관절염으로의 진화는 심각한 장애가 될 뿐만 아니라 삶의 질을 악화시킬 수 있습니다. 골관절염은 확실한 치료가 이루어지지 않아 경제적·사회적 부담이 큰 공공의료질환으로 꼽힌다. 오늘날 이용 가능한 다양한 기술에도 불구하고 손상된 유리질 연골의 완전한 재생은 불가능합니다. 이러한 이유로 중간엽 세포를 이용한 세포 치료는 상대적으로 처리가 용이하여 연구에서 더 많은 관심을 받고 있습니다. 윤활막과 슬개골 아래 지방 패드는 일상적인 관절경 시술 중에 예측 가능하고 쉽게 접근할 수 있는 소스이며 중간엽 세포 공여 부위 사이의 연골 분화 가능성이 가장 큽니다. 이전의 전임상 중개 연구(FAPESP - 상파울루주 정부 연구 후원 기관)에서 저자 그룹은 인간 사용 기술(GMP)에 대한 우수한 실험실 관행에 따라 대형 동물 모델에서 조직 생명 공학 프로토콜을 개발했습니다. 이 단계를 완료한 후 저자는 이제 I/II 임상 시험을 제안합니다.

목적: 무릎의 윤활막과 슬개골 아래 지방 패드에서 획득한 간질 혈관 분획을 콜라겐 지지체와 결합하여 관절 연골 손상의 치료에 대한 유효성과 안전성을 평가하고자 한다.

방법: 조직 공학 구조로 연골 손상 치료의 안전성과 효능을 평가하기 위한 1상/2상 임상 시험(인간 최초).

포함 기준: 증상이 있고 비수술적 치료로 개선되지 않는 단일, 3~6 cm2 전층 연골 병변으로 진단된 환자. 18세에서 40세 사이의 연령.

제외 기준: 부상을 치료하기 위한 이전 수술, 반대측 무릎에 병리학의 존재 또는 회복을 방해하는 기타 병리학. 자가 기증자, 완전 혈청학: HIV, C형 간염 바이러스, B형 간염, 인간 T-림프친화성 바이러스, 매독 및 샤가스에 대해 혈청학적 검사를 수행할 것입니다.

우리 기관 윤리 위원회는 프로토콜을 승인했습니다(현지 CEP: 4.285.308 및 국가 CAAE: 34798720.5.0000.0068).

생명 공학 구조는 콜라겐 스캐폴드(Chondro-Gide, Geistlich, 스위스)와 결합하여 단일 수술 시간에 효소 처리에 제출된 부상당한 무릎의 윤활막과 슬개골 아래 지방에서 수집한 간질 혈관 분획으로 구성됩니다. 윤활막 및 지방 조직은 연골 복구를 위해 초기 외과적 절개의 일반적인 경로를 통해 수집된 후 3분 동안 원심분리됩니다.

혈관-기질 분획의 분리는 콜라게나제 IA를 사용한 효소 분해를 통해 수행됩니다. 세포 현탁액을 원심분리하고 세포 버튼을 0.9% 식염수 1mL에 현탁합니다. 지방 조직 1g에는 평균 2x106개의 세포가 있으며, 10%는 지방 세포에서 유래한 간질 세포로 구성되어 있습니다.

환자의 인구통계학적 데이터와 수술 전후 기간, 수술 직후 및 후기 기간의 합병증 빈도에 대한 데이터를 수집합니다. 삶의 질과 무릎 기능에 미치는 영향은 설문지에 의해 평가될 것입니다. 입원 기간, 수술 및 외래 환자 치료 비용이 문서화됩니다. 개입 후 형성된 조직은 수정된 3D MOCART 점수를 사용하여 평가됩니다.

인구 통계학적 데이터는 수술 전후 기간에 가능한 합병증의 빈도 분포와 경제성 평가뿐만 아니라 그래프와 표의 형태로 제시될 것입니다. 통계 분석은 수술 전과 수술 후 기간을 비교하기 위해 수행됩니다.

정규분포의 가정을 평가하기 위해 Shapiro-Wilk 검정을 수행하고 분산의 동질성 분석을 위해 Levene 검정을 수행합니다. 모든 추론 분석에서 0.05의 제1종 오류 확률(α)이 고려됩니다. 정량적 변수를 평가하기 위해 스튜던트 t 테스트(또는 변수가 정규 분포를 나타내지 않는 경우 Mann-Whitney 테스트) 또는 다변량 분산 분석(MANOVA)이 사용됩니다. 범주형 변수 간의 연관성을 확인하기 위해 카이제곱 연관성 검정이 사용됩니다. 모든 분석에는 SIGMAPlot 12.5 소프트웨어(Systat Software, Inc.)가 사용됩니다.

저자는 또한 두 가지 방법론인 중간엽 간질 세포의 혈관 간질 분획의 실험실 특성화에 의한 평가를 수행할 것입니다: 이전에 연구 그룹에 의해 검증된 유세포 분석 면역 표현형 분석 및 골 형성 계통에 대한 세포 분화 분석.

결과:

1차 결과는 수술 전, 수술 후 6개월 및 12개월에 3T 자기 공명 영상(수리의 양 및 질), 삶의 질 및 무릎 기능 설문지, 수술 전후 및 수술 후 합병증에 의해 평가됩니다. 이차 결과는 기술의 호환성, 재현성 및 일반화 가능성을 보장하기 위해 사용되는 건강 자원을 측정하여 평가됩니다.

가설: 저자는 통증, 출혈, 열과 같은 부작용이 현재의 수술 절차와 유사할 것이라고 믿습니다. 저자들은 양질의 연골 조직을 이용한 자기 공명에 의한 비침습적 평가를 통해 시술을 받는 환자의 무릎 기능 점수와 삶의 질이 향상될 것이라고 믿습니다.