Nivelkudoksen ja rasvatyynyn stromaalisten vaskulaaristen fraktioiden biotekniikka potilailla, joilla on polven nivelrustovaurio

Johdanto: Rustovauriot vaikuttavat jopa 63 %:iin väestöstä ja voivat aiheuttaa kipua ja tärkeitä toimintarajoituksia. Evoluutio nivelrikkoon voi johtaa elämänlaadun heikkenemiseen sen lisäksi, että se on erittäin vammainen. Nivelrikkoa pidetään julkisen terveydenhuollon sairaudena, jolla on suuri taloudellinen ja sosiaalinen taakka ilman lopullista hoitoa. Huolimatta nykyään saatavilla olevista erilaisista tekniikoista, vaurioituneen hyaliiniruston täydellinen uudistuminen ei ole mahdollista. Näistä syistä soluterapia mesenkymaalisilla soluilla on saanut enemmän huomiota tutkimuksessa suhteellisen helppouden prosessoinnin vuoksi. Synovia ja polvilumpion sisäpuolinen rasvatyyny ovat ennustettavia ja helposti saatavilla olevia lähteitä rutiininomaisen artroskopian aikana, ja niillä on suurin potentiaali kondrogeeniseen erilaistumiseen mesenkymaalisten solujen luovutuskohtien välillä. Aiemmassa prekliinisessä translaatiotutkimuksessa (FAPESP - State of São Paulon hallituksen tutkimussponsorointivirasto) tekijöiden ryhmä kehitti kudosten biotekniikan protokollan suurissa eläinmalleissa ihmisten käyttötekniikoiden (GMP) hyvien laboratoriokäytäntöjen mukaisesti. Tämän vaiheen suorittamisen jälkeen kirjoittajat ehdottavat nyt vaiheen I/II kliinistä tutkimusta.

Tarkoitus: Tutkimuksen tavoitteena on arvioida nivelrustovaurioiden hoidon tehokkuutta ja turvallisuutta polven nivelkalvosta ja polven infrapatellarisesta rasvatyynystä saadun stromaalisen verisuonifraktion yhdisteellä, joka liittyy kollageenitelineeseen.

Menetelmät: Vaiheen I/II kliininen koe (ensin ihmisillä) rustovaurion hoidon turvallisuuden ja tehokkuuden arvioimiseksi kudostekniikkakonstruktilla.

Sisällytämiskriteerit: Potilaat, joilla on diagnosoitu yksittäinen, 3–6 cm2 kokopaksuinen rustovaurio, oireinen ja ilman paranemista ei-leikkaushoidolla. Ikä 18-40 vuotta.

Poissulkemiskriteerit: mikä tahansa aikaisempi leikkaus vamman hoitamiseksi, patologian esiintyminen kontralateraalisessa polvessa tai muut sairaudet, jotka häiritsevät toipumista. Serologiset testit suoritetaan autologisille luovuttajille, täydellinen serologia: HIV, hepatiitti C -virus, hepatiitti B, ihmisen T-lymfotrooppinen virus, kuppa ja Chagas.

Instituution eettiset komiteamme hyväksyivät pöytäkirjan (paikallinen CEP: 4.285.308 ja kansallinen CAAE: 34798720.5.0000.0068).

Biotekniikan rakenne koostuu stromaalisesta verisuonifraktiosta, joka on kerätty vammautuneen polven nivelkalvolta ja infrapatellaarisesta rasvasta, ja se saatetaan entsymaattiseen käsittelyyn yhdessä kirurgisessa ajassa ja joka liittyy kollageenirakenteeseen (Chondro-Gide, Geistlich, Sveitsi). Nivelkudos ja rasvakudos kerätään ruston korjaamista varten tavallisen alkuperäisen kirurgisen viillon kautta ja sen jälkeen sentrifugoidaan 3 minuuttia.

Verisuoni-stromaalifraktion eristäminen suoritetaan entsymaattisella digestiolla kollagenaasi IA:lla. Solususpensio sentrifugoidaan ja solunappi suspendoidaan 1 ml:aan 0,9 % suolaliuosta. Yhdessä grammassa rasvakudosta sitä löytyy keskimäärin 2 x 106 solua, joista 10 % koostuu adiposyyteistä peräisin olevista stroomasoluista.

Potilaiden demografisia tietoja kerätään sekä komplikaatioiden esiintymistiheydestä perioperatiivisessa, välittömässä ja myöhäisessä postoperatiivisessa jaksossa. Vaikutus elämänlaatuun ja polvien toimintaan arvioidaan kyselylomakkeilla. Sairaalahoidon pituus sekä leikkaus- ja avohoidon kustannukset dokumentoidaan. Intervention jälkeen muodostunut kudos arvioidaan käyttämällä modifioitua 3D MOCART -pistemäärää.

Demografiset tiedot esitetään kaavioiden ja taulukoiden muodossa sekä mahdollisten komplikaatioiden esiintymistiheysjakaumat perioperatiivisella ja postoperatiivisella jaksolla sekä taloudellisen kannattavuuden arviointi. Tilastollisia analyyseja tehdään ennen leikkausta ja postoperatiivista ajanjaksoa vertaamaan.

Normaalijakauman oletuksen arvioimiseksi suoritetaan Shapiro-Wilk-testi ja varianssien homogeenisuuden analysoimiseksi Levene-testi. Kaikissa päättelyanalyyseissä otetaan huomioon tyypin I virhetodennäköisyys (α) 0,05. Kvantitatiivisten muuttujien arvioimiseksi käytetään Studentin t-testiä (tai Mann-Whitneyn testiä, jos muuttujat eivät esitä normaalijakaumaa) tai monimuuttujavarianssianalyysiä (MANOVA). Kategoristen muuttujien välisen yhteyden tarkistamiseksi käytetään khin neliön assosiaatiotestiä. Kaikissa analyyseissä käytetään SIGMAPlot 12.5 -ohjelmistoa (Systat Software, Inc.).

Kirjoittajat suorittavat myös mesenkymaalisten stroomasolujen verisuonten stroomafraktion arvioinnin laboratoriossa kahdella menetelmällä: virtaussytometrinen immunofenotyyppianalyysi ja solujen erilaistumisanalyysi osteogeenista linjaa varten, jotka tutkimusryhmä on aiemmin validoinut.

Tulokset:

Ensisijaiset tulokset arvioidaan ennen leikkausta, 6 ja 12 kuukauden kuluttua leikkauksesta 3T-magneettikuvauksella (korjauksen määrä ja laatu), elämänlaatu- ja polven toimintakyselyillä sekä perioperatiivisten ja postoperatiivisten komplikaatioiden lisäksi. Toissijaisia ​​tuloksia arvioidaan mittaamalla käytettyjä terveysresursseja tekniikan yhteensopivuuden, toistettavuuden ja yleistettävyyden varmistamiseksi.

Hypoteesi: Kirjoittajat uskovat, että haittatapahtumat, kuten kipu, verenvuoto ja kuume, ovat samanlaisia ​​kuin nykyiset kirurgiset toimenpiteet. Kirjoittajat uskovat, että toimenpiteen saaneiden potilaiden polven toimintapisteet ja elämänlaatu paranevat magneettiresonanssilla tehdyn ei-invasiivisen arvioinnin ansiosta, jossa on hyvälaatuista rustokudosta.