Bio-ingénierie de la fraction vasculaire stromale du tissu synovial et du coussinet adipeux chez les patients présentant une lésion du cartilage articulaire du genou

Introduction : Les lésions cartilagineuses touchent jusqu'à 63 % de la population et peuvent entraîner des douleurs et des limitations fonctionnelles importantes. L'évolution vers l'arthrose peut entraîner une dégradation de la qualité de vie, en plus d'être très invalidante. L'arthrose est considérée comme une maladie de santé publique avec un lourd fardeau économique et social sans traitement définitif. Malgré les différentes techniques disponibles aujourd'hui, la régénération complète du cartilage hyalin endommagé n'est pas possible. Pour ces raisons, la thérapie cellulaire avec des cellules mésenchymateuses a reçu plus d'attention dans la recherche en raison de la relative facilité de traitement. La synovie et le coussinet adipeux infra-patellaire sont des sources prévisibles et facilement accessibles lors d'une procédure arthroscopique de routine, en plus de présenter le plus grand potentiel de différenciation chondrogénique entre les sites donneurs de cellules mésenchymateuses. Dans une précédente étude translationnelle préclinique (FAPESP - State of São Paulo Government Research Sponsor Agency), le groupe des auteurs a développé le protocole de bio-ingénierie tissulaire dans un grand modèle animal selon les bonnes pratiques de laboratoire pour les techniques d'utilisation humaine (GMP). Après avoir terminé cette étape, les auteurs proposent maintenant l'essai clinique de phase I/II.

Objectif : L'objectif de l'étude est d'évaluer l'efficacité et l'innocuité pour le traitement des lésions du cartilage articulaire, avec un composé de la fraction vasculaire stromale acquise à partir de la synovie et du coussinet adipeux infrapatellaire du genou, associé à un échafaudage de collagène.

Méthodes : Un essai clinique de phase I/II (premier chez l'homme) pour évaluer l'innocuité et l'efficacité du traitement des lésions cartilagineuses avec une construction d'ingénierie tissulaire.

Critères d'inclusion : Patients diagnostiqués avec une seule lésion cartilagineuse de 3 à 6 cm2 de pleine épaisseur, symptomatique et sans amélioration avec un traitement non chirurgical. Âge entre 18 et 40 ans.

Critères d'exclusion : toute intervention chirurgicale antérieure pour traiter la blessure, la présence d'une pathologie dans le genou controlatéral ou d'autres pathologies qui interfèrent avec la récupération. Des tests sérologiques seront effectués pour les donneurs autologues, sérologie complète : VIH, virus de l'hépatite C, hépatite B, virus T-lymphotrope humain, syphilis et Chagas.

Nos comités d'éthique institutionnels ont validé le protocole (CEP local : 4.285.308 et CAAE national : 34798720.5.0000.0068).

La construction de bio-ingénierie sera composée d'une fraction vasculaire stromale collectée à partir de la membrane synoviale et de la graisse infrapatellaire du genou blessé, soumise à un traitement enzymatique en un temps chirurgical unique, associée à un échafaudage de collagène (Chondro-Gide, Geistlich, Suisse). Le tissu synovial et adipeux est prélevé par la voie habituelle de l'incision chirurgicale initiale pour la réparation du cartilage, puis centrifugé pendant 3 minutes.

L'isolement de la fraction vasculaire-stromale sera réalisé par digestion enzymatique avec la collagénase IA. La suspension cellulaire sera centrifugée et le bouton cellulaire sera mis en suspension dans 1 mL de solution saline à 0,9 %. Dans un gramme de tissu adipeux, on trouve en moyenne 2x106 cellules, 10% étant composées de cellules stromales issues d'adipocytes.

Des données démographiques des patients seront recueillies, ainsi que des données sur la fréquence des complications dans les périodes périopératoire, immédiate et postopératoire tardive. L'impact sur la qualité de vie et la fonction du genou sera évalué par des questionnaires. La durée du séjour à l'hôpital, ainsi que les coûts des soins chirurgicaux et ambulatoires, seront documentés. Le tissu formé après l'intervention sera évalué à l'aide du score MOCART 3D modifié.

Les données démographiques seront présentées sous forme de graphiques et de tableaux, ainsi que les distributions de fréquence respectives des complications possibles en période périopératoire et postopératoire, et l'évaluation de la faisabilité économique. Des analyses statistiques seront effectuées pour comparer les périodes préopératoire et postopératoire.

Pour évaluer l'hypothèse de distribution normale, le test de Shapiro-Wilk sera effectué, et pour l'analyse de l'homogénéité des variances, le test de Levene sera effectué. Dans toutes les analyses inférentielles, une probabilité d'erreur de type I (α) de 0,05 sera considérée. Pour évaluer les variables quantitatives, le test t de Student (ou le test de Mann-Whitney, si les variables ne présentent pas de distribution normale) ou l'analyse multivariée de la variance (MANOVA) seront utilisés. Pour vérifier l'association entre les variables catégorielles, le test d'association du chi carré sera utilisé. Pour toutes les analyses, le logiciel SIGMAPlot 12.5 (Systat Software, Inc.) sera utilisé.

Les auteurs effectueront également l'évaluation par la caractérisation en laboratoire de la fraction stromale vasculaire des cellules stromales mésenchymateuses avec deux méthodologies : analyse d'immunophénotypage par cytométrie en flux et analyse de différenciation cellulaire pour la lignée ostéogénique, préalablement validée par le groupe de recherche.

Résultats:

Les critères de jugement principaux seront évalués en préopératoire, à 6 et 12 mois postopératoires par imagerie par résonance magnétique 3T (quantité et qualité de la réparation), questionnaires de qualité de vie et de fonction du genou, en plus des complications périopératoires et postopératoires. Les résultats secondaires seront évalués en mesurant les ressources de santé utilisées pour assurer la compatibilité, la reproductibilité et la généralisabilité de la technique.

Hypothèse : Les auteurs pensent que les événements indésirables tels que la douleur, les saignements et la fièvre seront similaires aux procédures chirurgicales actuelles. Les auteurs pensent qu'il y aura une amélioration des scores de fonction du genou et de la qualité de vie des patients subissant la procédure à partir de l'évaluation non invasive par résonance magnétique avec du tissu cartilagineux de bonne qualité.