Synovialt vev og fettpute Stromal vaskulær fraksjon Bioengineering hos pasienter med kneleddbruskskade

Innledning: Bruskskader rammer opptil 63 % av befolkningen, og kan gi smerter og viktige funksjonsbegrensninger. Evolusjonen til slitasjegikt kan føre til forverring av livskvalitet, i tillegg til å være svært invalidiserende. Artrose regnes som en offentlig helsesykdom med høy økonomisk og sosial belastning uten definitiv behandling. Til tross for de ulike teknikkene som er tilgjengelige i dag, er fullstendig regenerering av skadet hyalinbrusk ikke mulig. Av disse grunnene har celleterapi med mesenkymale celler fått mer oppmerksomhet i forskning på grunn av den relative enkle behandlingen. Synovia og infra-patellar fettpute er forutsigbare og lett tilgjengelige kilder under rutinemessig artroskopisk prosedyre, i tillegg til å vise det største potensialet for kondrogen differensiering mellom mesenkymale celledonorsteder. I en tidligere pre-klinisk translasjonsstudie (FAPESP - State of São Paulo Government Research Sponsor Agency), utviklet forfattergruppen vevsbioingeniørprotokollen i en stor dyremodell i henhold til god laboratoriepraksis for bruksteknikker for mennesker (GMP). Etter å ha fullført dette trinnet, foreslår forfatterne nå fase I/II klinisk studie.

Hensikt: Målet med studien er å evaluere effektivitet og sikkerhet for behandling av leddbruskskader, med en forbindelse av stromal vaskulær fraksjon ervervet fra synovia og infrapatellar fettpute i kneet, assosiert med et kollagen stillas.

Metoder: En fase I/II klinisk studie (første gang hos mennesker) for å vurdere sikkerheten og effekten av behandlingen av bruskskader med en vevsteknisk konstruksjon.

Inklusjonskriterier: Pasienter diagnostisert med en enkelt brusklesjon på 3 til 6 cm2 i full tykkelse, symptomatisk og uten bedring med ikke-operativ behandling. Alder mellom 18 og 40 år.

Eksklusjonskriterier: enhver tidligere operasjon for å behandle skaden, tilstedeværelse av patologi i det kontralaterale kneet eller andre patologier som forstyrrer utvinningen. Serologiske tester vil bli utført for autologe givere, komplett serologi: HIV, hepatitt C-virus, hepatitt B, humant T-lymfotropt virus, syfilis og Chagas.

Våre institusjonelle etiske komiteer godkjente protokollen (lokal CEP: 4.285.308 og nasjonal CAAE: 34798720.5.0000.0068).

Bioingeniørkonstruksjonen vil være sammensatt av stromal vaskulær fraksjon samlet fra synovialmembranen og infrapatellært fett i det skadde kneet, underkastet enzymatisk prosessering i en enkelt kirurgisk tid, assosiert med et kollagen stillas (Chondro-Gide, Geistlich, Sveits). Synovial- og fettvevet samles opp gjennom den vanlige ruten for det første kirurgiske snittet for bruskreparasjon, og sentrifugeres deretter i 3 minutter.

Isoleringen av den vaskulære-stromale fraksjonen vil bli utført gjennom enzymatisk fordøyelse med kollagenase IA. Cellesuspensjonen vil bli sentrifugert og celleknappen vil bli suspendert i 1 ml 0,9 % saltvannsløsning. I ett gram fettvev er det funnet gjennomsnittlig 2x106 celler, hvorav 10% består av stromale celler avledet fra fettceller.

Demografiske data om pasienter vil bli samlet inn, samt data om hyppighet av komplikasjoner i den perioperative, umiddelbare og sene postoperative perioden. Påvirkning på livskvalitet og knefunksjon vil bli vurdert ved hjelp av spørreskjemaer. Lengden på sykehusoppholdet, samt kostnader til kirurgi og poliklinisk behandling, vil bli dokumentert. Vevet som dannes etter intervensjonen vil bli evaluert ved å bruke den modifiserte 3D MOCART-score.

Demografiske data vil bli presentert i form av grafer og tabeller, samt de respektive frekvensfordelingene av mulige komplikasjoner i den perioperative og postoperative perioden, og vurdering av økonomisk gjennomførbarhet. Det vil bli utført statistiske analyser for å sammenligne den preoperative og postoperative perioden.

For å vurdere antakelsen om normalfordeling vil Shapiro-Wilk-testen bli utført, og for analyse av homogenitet av varianser vil Levene-testen bli utført. I alle inferensielle analyser vil en type I feilsannsynlighet (α) på 0,05 bli vurdert. For å evaluere de kvantitative variablene vil Students t-test (eller Mann-Whitney-test, hvis variablene ikke presenterer normalfordeling) eller Multivariate Analysis of Variance (MANOVA) brukes. For å verifisere assosiasjonen mellom kategoriske variabler, vil kjikvadrat assosiasjonstesten bli brukt. For alle analyser vil SIGMAPlot 12.5-programvaren (Systat Software, Inc.) brukes.

Forfatterne vil også utføre vurderingen ved laboratoriekarakterisering av den vaskulære stromale fraksjonen av mesenkymale stromaceller med to metoder: flowcytometri immunfenotypingsanalyse og celledifferensieringsanalyse for osteogen avstamning, tidligere validert av forskergruppen.

Resultater:

De primære resultatene vil bli vurdert preoperativt, 6 og 12 måneder postoperativt ved 3T magnetisk resonansavbildning (mengde og kvalitet på reparasjon), livskvalitet og knefunksjon spørreskjemaer, i tillegg til perioperative og postoperative komplikasjoner. Sekundære utfall vil bli evaluert ved å måle helseressursene som brukes for å sikre kompatibilitet, reproduserbarhet og generaliserbarhet av teknikken.

Hypotese: Forfatterne mener at uønskede hendelser som smerte, blødning og feber vil ligne på dagens kirurgiske prosedyrer. Forfatterne mener at det vil være en forbedring i knefunksjonsscore og livskvalitet for pasienter som gjennomgår prosedyren fra den ikke-invasive evalueringen ved magnetisk resonans med bruskvev av god kvalitet.