Synovialt væv og fedtpude Stromal vaskulær fraktion Bioengineering hos patienter med knæledsbruskskade

Introduktion: Bruskskader rammer op til 63 % af befolkningen, og kan forårsage smerter og vigtige funktionelle begrænsninger. Udviklingen til slidgigt kan ud over at være stærkt invaliderende føre til en forringelse af livskvaliteten. Slidgigt betragtes som en offentlig sundhedssygdom med en høj økonomisk og social byrde uden endelig behandling. På trods af de forskellige teknikker, der er tilgængelige i dag, er fuldstændig regenerering af beskadiget hyalinbrusk ikke mulig. Af disse grunde har celleterapi med mesenkymale celler fået mere opmærksomhed i forskningen på grund af den relative lette behandling. Synovia og infra-patellar fedtpude er forudsigelige og let tilgængelige kilder under rutinemæssig artroskopisk procedure, ud over at de udviser det største potentiale for chondrogen differentiering mellem mesenkymale celledonorsteder. I et tidligere præklinisk translationelt studie (FAPESP - State of São Paulo Government Research Sponsor Agency), udviklede forfattergruppen vævsbioingeniørprotokollen i en stor dyremodel i overensstemmelse med god laboratoriepraksis for humane brugsteknikker (GMP). Efter at have gennemført dette trin, foreslår forfatterne nu fase I/II kliniske forsøg.

Formål: Formålet med undersøgelsen er at evaluere effektivitet og sikkerhed til behandling af ledbruskskader, med en forbindelse af stromal vaskulær fraktion erhvervet fra synovia og infrapatellar fedtpude i knæet, forbundet med et kollagen stillads.

Metoder: Et fase I/II klinisk forsøg (først i mennesker) for at vurdere sikkerheden og effektiviteten af ​​behandlingen af ​​bruskskader med en vævsteknisk konstruktion.

Inklusionskriterier: Patienter diagnosticeret med en enkelt brusklæsion på 3 til 6 cm2 i fuld tykkelse, symptomatisk og uden bedring med ikke-operativ behandling. Alder mellem 18 og 40 år.

Eksklusionskriterier: enhver tidligere operation til behandling af skaden, tilstedeværelse af patologi i det kontralaterale knæ eller andre patologier, der forstyrrer helbredelse. Serologiske tests vil blive udført for autologe donorer, komplet serologi: HIV, hepatitis C-virus, hepatitis B, human T-lymfotropisk virus, syfilis og Chagas.

Vores institutionelle etiske udvalg godkendte protokollen (lokal CEP: 4.285.308 og national CAAE: 34798720.5.0000.0068).

Den biotekniske konstruktion vil være sammensat af stromal vaskulær fraktion indsamlet fra synovialmembranen og infrapatellar fedt fra det skadede knæ, underkastet enzymatisk behandling på en enkelt kirurgisk tid, forbundet med et kollagen stillads (Chondro-Gide, Geistlich, Schweiz). Synovial- og fedtvævet opsamles via den sædvanlige vej ved det indledende kirurgiske snit til bruskreparation og centrifugeres efterfølgende i 3 minutter.

Isoleringen af ​​den vaskulære-stromale fraktion vil blive udført gennem enzymatisk fordøjelse med collagenase IA. Cellesuspensionen vil blive centrifugeret, og celleknappen vil blive suspenderet i 1 ml 0,9 % saltvandsopløsning. I et gram fedtvæv findes det i gennemsnit 2x106 celler, hvoraf 10% er sammensat af stromale celler afledt af adipocytter.

Demografiske data om patienter vil blive indsamlet, samt data om hyppigheden af ​​komplikationer i de perioperative, umiddelbare og sene postoperative perioder. Påvirkningen af ​​livskvalitet og knæfunktion vil blive vurderet ved hjælp af spørgeskemaer. Længden af ​​hospitalsophold samt udgifter til kirurgisk og ambulant behandling vil blive dokumenteret. Vævet dannet efter interventionen vil blive evalueret ved hjælp af den modificerede 3D MOCART-score.

Demografiske data vil blive præsenteret i form af grafer og tabeller, samt de respektive frekvensfordelinger af mulige komplikationer i den perioperative og postoperative periode samt vurdering af økonomisk gennemførlighed. Der vil blive udført statistiske analyser for at sammenligne de præoperative og postoperative perioder.

For at vurdere antagelsen om normalfordeling vil Shapiro-Wilk testen blive udført, og til analyse af varianshomogenitet vil Levene testen blive udført. I alle inferentielle analyser vil en type I fejlsandsynlighed (α) på 0,05 blive taget i betragtning. For at evaluere de kvantitative variabler vil Students t-test (eller Mann-Whitney-test, hvis variablerne ikke præsenterer normalfordeling) eller Multivariate Analysis of Variance (MANOVA) blive brugt. For at verificere sammenhængen mellem kategoriske variabler vil chi-kvadrat associationstesten blive brugt. Til alle analyser vil SIGMAPlot 12.5-softwaren (Systat Software, Inc.) blive brugt.

Forfatterne vil også udføre vurderingen ved laboratoriekarakterisering af den vaskulære stromale fraktion af mesenkymale stromaceller med to metoder: flowcytometri immunfænotypeanalyse og celledifferentieringsanalyse for osteogen afstamning, tidligere valideret af forskergruppen.

Resultater:

De primære resultater vil blive vurderet præoperativt, 6 og 12 måneder postoperativt ved 3T magnetisk resonansbilleddannelse (mængde og kvalitet af reparation), livskvalitet og knæfunktionsspørgeskemaer, foruden perioperative og postoperative komplikationer. Sekundære resultater vil blive evalueret ved at måle de sundhedsressourcer, der bruges til at sikre kompatibilitet, reproducerbarhed og generaliserbarhed af teknikken.

Hypotese: Forfatterne mener, at uønskede hændelser som smerte, blødning og feber vil ligne nuværende kirurgiske procedurer. Forfatterne mener, at der vil være en forbedring i knæfunktionsscore og livskvalitet for patienter, der gennemgår proceduren fra den ikke-invasive evaluering ved magnetisk resonans med bruskvæv af god kvalitet.