대사성 비만의 바이오마커.

작업의 주요 목표:

1. 피하 및 내장 지방 조직의 분포가 다른 사람들의 혈청 및 타액에서 선택된 전 염증 매개 변수의 농도 분석.
2. 타액 및 혈청 내 대사성 비만 바이오마커 분석.
3. 대사성 비만 및 그 합병증의 위험을 조기에 결정하기 위한 새로운 진단 방법의 평가.

연구 프로토콜은 의과 대학 생명 윤리위원회의 승인을 받았습니다. R-I-002/647/2019 및 APK.002.39.2021. 모든 참가자는 연구 시작 전에 연구 참여에 대한 정보에 입각한 서면 동의를 제공했습니다. 이 연구는 2020년 1월에 시작하여 2022년 5월에 종료되었습니다.

이 연구는 식이요법 및 임상영양학과(Bialystok 의과대학 건강과학부), 생화학적 진단학과(Bialystok 대학 임상병원) 및 생명공학과(약학부)에서 수행되었습니다. Bialystok 의과대학 진단검사의학과).

첫 번째 방문은 Bialystok 의과 대학의 영양 및 임상 영양학과에서 이루어졌습니다. 여기에는 포함 및 제외 기준에 따른 연구 자격, 연구 목적에 대한 논의, 참가자의 연구 동의서 서명, 개인 데이터 보호 및 완전한 익명성에 대한 정보가 포함되었습니다. 200명이 연구에 자원했습니다. 포함 및 제외 기준에 따라 119명(여성 79명, 남성 41명)을 대상으로 관찰 연구가 수행되었습니다. 각 참가자는 개별 코드(예: A01, A02, B01, B02 등), 연구의 추가 단계에서 참가자를 식별하는 데 사용되었습니다.

모든 참가자가 완료한 항목: 세계보건기구 삶의 질(WHOQOL-BREF) 설문조사, 국제 신체 활동 설문지 - IPAQ, 행동 조건 영양 팀, 인간 영양 과학 위원회, 폴란드 과학 아카데미에서 만든 신념 및 식습관 설문지, 3일 영양 일기(참가자는 근무일 2일과 휴일 1일을 포함하여 다음 3일 동안 섭취한 식사를 설명했습니다.)

연구 참가자는 인체 측정 매개변수(체중, 키, 허리 및 엉덩이 둘레)를 측정하고 BMI(체질량 지수)를 계산했습니다. 이를 바탕으로 참가자를 연구 그룹과 통제 그룹으로 나누었습니다. 또한 WHR 비율(Waist to Hip Ratio), WHtR ratio(Waist to Height Ratio) 및 RFM 비율(Relative Fat Mass)을 계산했습니다.

연구 참가자의 체성분을 결정하기 위해 BioScan 920-2(영국, Essex) 및 InBody 270(한국, 서울) 장치를 사용하여 전기 생체 임피던스 체성분 분석을 수행했습니다. 검사는 아침에 금식하고 격렬한 신체 활동없이 수행되었습니다.

발목에서 측정한 혈압과 팔에서 측정한 혈압을 비교하는 발목-상완 지수 검사(MESI, Cracow, Poland)도 연구에 사용했다. 이 분석은 하지 죽상동맥경화증의 위험을 평가하기 위해 수행되었습니다. 또한 전기 혈압계를 사용하여 모든 연구 참여자를 대상으로 혈압과 안정 시 심박수를 측정했습니다.

두 번째 방문은 생화학적 진단 부서(Bialystok에 있는 대학 임상 병원)에서 이루어졌습니다. 연구의 모든 참가자로부터 10ml의 정맥혈을 수집했습니다. 경구 당부하 검사(OGTT)를 실시하고 이를 바탕으로 포도당과 인슐린의 농도를 측정하였다(공복 시, 검사 60분 및 120분 후). ALINITY ci, Abbott에서 총 콜레스테롤, LDL 콜레스테롤, HDL 콜레스테롤, 중성지방, C 반응성 단백질, 포도당, 인슐린, 혈청 요소, 혈청 크레아티닌, 혈청 요산, 알라닌 아미노전이효소(ALT) 및 아스파르테이트 아미노전이효소(AST)의 농도를 평가했습니다. .

환자의 혈액 샘플을 채취하여 -80°C에서 동결했습니다. 총 아디포넥틴(Quantikine ELISA Human Total Adiponectin/Acrp30 Immunoassay, R&D Systems, Abingdon, UK), 레지스틴(Quantikine ELISA Human Resistin Immunoassay, R&D Systems, Abingdon, UK), IL-6(Quantikine ELISA Human IL-6 Immunoassay)의 혈청 수준 , R&D Systems, Abingdon, UK), TNFα(Quantikine ELISA Human TNFα Immunoassay, R&D Systems, Abingdon, UK), IL-1β(Quantikine ELISA Human IL-1β/IL-1F2 Immunoassay, R&D Systems, Abingdon, UK), IL -23(Quantikine ELISA Human IL-23 Immunoassay, R&D Systems, Abingdon, UK), MMP-9(Quantikine ELISA Human MMP-9 Immunoassay, R&D Systems, Abingdon, UK) 및 총 MMP-2(Quantikine ELISA Total MMP-2) Immunoassay, R&D Systems, Abingdon, UK)를 제조업체의 지침에 따라 효소 결합 면역흡착 분석법(ELISA)으로 평가했습니다.

세 번째 방문은 생명공학과(Bialystok 의과대학 진단검사의학과 약학부)에서 이루어졌습니다.

타액은 표준 방법을 사용하여 수집되었습니다. 대상자의 샘플은 오전 9시에서 11시 사이에 수집되었습니다. 모든 피험자들은 2시간 동안 음식과 음료를 금했습니다. 대상자들은 탈이온수로 입을 헹구고 눈을 뜨고 머리를 약간 앞으로 향하게 한 채 편안한 자세로 앉아 있었다. 자극받지 않은 전체 타액은 Navazesh에 의해 설명된 침으로 10분 동안 수집되었습니다. 타액 샘플을 균질화하고 4°C에서 15분 동안 1200 RPMI에서 원심분리하여 정화했습니다. 정화된 상청액의 분취액을 ELISA 측정을 위해 -70°C에 보관했습니다.

고감도 분석 키트(R&D Systems, Minneapolis, USA)를 사용하여 연구 참가자. 테스트는 제조업체의 프로토콜에 따라 수행되었습니다. 키트에 제공된 마이크로타이터 플레이트는 분석된 단백질에 특이적인 단클론 항체로 사전 코팅되었습니다. 표준 및 샘플을 적절한 마이크로타이터 플레이트 웰에 추가했습니다. 실온에서 배양한 후, 효소 결합된 다클론 항체를 첨가하였다. 그런 다음, 마이크로플레이트 웰을 흡인하고 4회 세척하였다. 다음으로 기질 용액을 각 웰에 첨가하였다. 정지 용액을 첨가하여 효소-기질 반응을 종료하고 색상 변화를 450nm ±2nm에서 분광광도계로 측정했습니다. 샘플의 항원 농도는 O.D. 표준 곡선으로. 샘플의 항원 농도는 O.D. 표준 곡선으로.