(비)표적 대사체학을 이용한 페놀성 대사산물의 생체 내 내인성 및/또는 외인성 생산에 대한 조사 (ENDOPHENOL)

연구는 무작위 교차 시험으로 구성되며 각 병은 5일 동안 지속됩니다. 대학, 병원, 공공장소에 게시된 공지를 통해 총 30명의 건강한 자원봉사자가 파르마(PR)에서의 연구를 위해 모집됩니다. 각 부문에 피험자를 할당하기 위해 Random Number Generator Pro(Segobit 소프트웨어)를 사용하여 무작위 블록 설계를 사용하여 목록이 생성됩니다. 이 목록은 피험자의 등록에 관여하지 않은 동료가 봉인된 불투명 봉투에 번호가 매겨진 순서를 사용하여 작성되므로 PI와 자원봉사자에게는 공개되지 않습니다.

연구 참여를 자유롭게 수락하는 자원 봉사자에게는 서면 동의가 요청됩니다. 자원봉사자에 대한 정보는 동의서 이전 및 동의서와 별도로 제공됩니다. 이 정보 시트와 사전 동의서는 오비에도 협약에 따라 준비되었으며 지역 윤리위원회의 지침을 고려합니다. 서면 동의서를 받은 후, 자원봉사자는 자격 여부를 결정하고 개인 데이터를 수집하기 위해 선별 방문을 받게 됩니다.

자원봉사자의 개인정보는 개인 영숫자 코드를 사용한 의사익명화를 통해 보장됩니다. 모집된 자원봉사자는 개인정보 및 검색된 데이터의 사용에 대한 승인에도 서명합니다.

모집 후 피험자는 첫 번째 방문에 참석하여 개인 데이터를 수집하고 신체 구성 및 인체 측정 매개변수를 측정합니다. 그런 다음 연구를 수행하는 데 필요한 음식, 보충제 및 재료를 받게 됩니다. 모집된 피험자는 저(폴리)페놀 식단을 따르도록 요청받을 것이며, 이는 모든 지원자에게 동일하고 개입 연구의 전체 기간 동안 유지됩니다. 음식, 준비 방식, 식사 시간 등은 후원자가 제공합니다. 다이어트는 측정된 기초 대사율에 1.45로 설정된 신체 활동 수준을 곱하여 필요한 칼로리를 대략적으로 맞춤화하고 일일 에너지 요구량에 따라 저(폴리)페놀 다이어트에 정량적 변화가 있습니다. 1500kcal/일, 1750kcal/일, 2000kcal/일, 2250kcal/일, 2500kcal/일, 2750kcal/일 또는 3000kcal/일, 모두 영양학적으로 균형 잡힌 양의 단백질, 지방 및 탄수화물을 섭취합니다. 또한 참가자에게는 연구 기간 동안 신체 운동을 제한하도록 요청됩니다.

피험자는 식이요법 첫날 저녁부터 시작하여(식이요법 첫날 밤 21시부터) 개입 전 60시간 동안 생산된 소변을 수집하고 12시간마다(60~48시간, 48~36시간) 소변을 수집하도록 요청받게 됩니다. , 36-24h, 24-12h, 12-0h), 식사 일기를 작성하여 다이어트 준수 여부를 확인합니다. 피험자들은 수집된 소변을 파르마 대학교 식품의약학과의 인간 영양 부서로 가져오도록 요청 받았습니다.

식이요법 3일째 아침에 피험자는 금식한 상태로 파르마 대학교에 도착하도록 요청됩니다. 개입을 받기 전에 공복 소변 및 타액 샘플을 수집합니다. 이후 무작위 배정에 따라 무가당 커피(각각 50mL 및 설탕 5g 3회) 또는 설탕물(물 150mL 및 설탕 5g)을 제공하고 다음으로 구성된 표준화된 아침 식사를 제공합니다. (폴리)페놀이 없고 영양학적으로 균형 잡힌 고형 식사와 물(자유롭게)입니다.

아침 식사 후 피험자는 지정된 시점(0~3시간, 3~6시간, 6~9시간, 9~12시간, 12~24시간, 24~36시간, 36~48시간)에 다음 48시간 동안 자율적으로 소변을 수집하도록 요청받습니다. 똑같은 맞춤형 다이어트. 마지막으로 피험자는 개입 후 6~48시간 이내에 대변 샘플을 자율적으로 수집합니다.

마지막 날 아침, 마지막 소변 수집 후 피험자는 수집된 소변 및 대변 샘플과 5일간의 음식 일기를 파르마 대학 식품의약학과 인간 영양 부서로 가져옵니다.

첫 번째 팔 이후, 피험자는 연속 2주 동안 습관적인 생활 방식을 재개하게 되며, 이후에는 첫 번째 방문에서 수행된 모든 인체 측정 평가가 반복되고 개인화된 식단에 대한 음식과 정보가 포함된 다른 키트가 다시 방문하게 됩니다. 주어진. 연구는 교차 설계이기 때문에 프로토콜은 위에 설명된 것과 동일합니다(한 번만 수행되는 타액 샘플링 제외). 다이어트 3일째가 되면 연구의 이전 부문에서 커피를 섭취한 피험자는 물을 섭취하게 되며 그 반대의 경우도 마찬가지입니다.

이 연구에서는 소변 내 커피 유래 (폴리)페놀과 그 대사체의 평균 농도를 일차 결과로 고려하고 해당 분야에 대한 유사한 접근법과 연구에 대한 이용 가능한 문헌을 고려하여 표본 크기를 추정했습니다. 30명의 지원자 수는 임상 시험에 허용되는 매개변수(파워 세트 0.8 및 α 0.05로 설정) 가능한 탈락 가능성(15% 탈락률)과 통계 분석을 위한 샘플 파워를 유지하기 위한 자원자를 제외하는 점을 고려하여 설정되었습니다. 비교를 수행하기 전에 각 변수의 정규성을 평가하여 가장 적절한 통계 테스트를 선택합니다. 대사산물 데이터가 정규 분포를 따르는 경우 데이터는 평균 ± 표준 편차로 표시되고 사후 비교를 통해 반복 측정 t-테스트 또는 ANOVA를 사용하여 분석됩니다. 데이터가 정규 분포를 따르지 않는 경우 중앙값 및 사분위수 범위로 보고되며 사후 쌍별 비교를 통한 Friedman 테스트가 수행됩니다. P-값 < 0.05는 통계적으로 유의한 것으로 간주됩니다.

비지도 및 지도 다변량 분석은 페놀성 대사산물의 표적 대사체 분석을 위해 우리 연구 그룹이 개발한 절차에 따라 또는 비표적 대사체 데이터를 사용할 때 다양한 소변 대사체를 식별하고 특성화하는 데 사용됩니다. 우리는 기존 변동성을 더 잘 탐색하기 위해 다양한 클러스터링 접근 방식을 사용할 것입니다. 이는 클러스터(즉, 페놀 대사형)의 수, 각 클러스터를 형성하는 참가자 수 및 가능한 대사형 간의 유사성을 설정하는 데 도움이 됩니다.

LMWP의 패턴과 추정 결정 요인(나이, 성별, 민족, 생활 방식, 인체 측정, 신체 구성, 유전자형 및 장내 미생물군집) 간의 관계를 상관 테스트 및 다변량 분석을 사용하여 탐색합니다. P-값 < 0.05는 통계적으로 유의한 것으로 간주됩니다. 통계는 PI의 감독 하에 인간 영양 부서의 전문 직원이 미생물 프로파일링 및 유전형 분석을 담당하는 대학 팀과 협력하여 수행합니다.