Laxantes PEG para Preparação Intestinal e Microbiota Intestinal em Colecistectomia

A disbiose da microbiota intestinal tem sido implicada em vários distúrbios gastrointestinais e metabólicos. Os laxantes à base de polietilenoglicol (PEG), administrados rotineiramente para limpeza intestinal antes da colonoscopia, induzem diarreia osmótica transitória e demonstraram, em modelos animais, causar alterações prolongadas na composição e função microbiana. Entretanto, a colecistectomia, uma das cirurgias abdominais mais frequentemente realizadas, altera o fluxo de ácidos biliares e a circulação enterohepática, o que pode modular o ecossistema microbiano intestinal e tem sido associada a um aumento do risco de diarreia pós-operatória e até mesmo de neoplasia colorretal. Apesar destes efeitos independentes, a influência combinada da colecistectomia e da preparação intestinal à base de PEG no microbioma intestinal humano não foi investigada sistematicamente.

Este é um estudo de coorte observacional, prospetivo, de grupos paralelos, realizado no Hospital Tongji, Universidade de Ciência e Tecnologia de Huazhong. Serão recrutados aproximadamente 20 participantes no total, alocados em dois grupos: o grupo de colecistectomia, constituído por indivíduos que foram submetidos a colecistectomia pelo menos seis meses antes do recrutamento e estão agendados para uma colonoscopia de rastreio ou vigilância; e o grupo de controlo, composto por indivíduos com vesícula biliar intacta, emparelhados por idade e sexo, e também agendados para colonoscopia.

Os participantes elegíveis têm entre 18 e 75 anos, não têm historial de doença grave de órgãos principais, não utilizaram antibióticos, probióticos ou prebióticos nos seis meses anteriores ao recrutamento, e não têm contraindicações para a colonoscopia ou ingestão de PEG. Os critérios de exclusão incluem gravidez, insuficiência cardiorrespiratória grave, perturbações mentais e incapacidade de cumprir os procedimentos de recolha de fezes.

Todos os participantes serão submetidos à preparação intestinal padrão utilizando 2-4 L de solução de PEG-4000/3350, de acordo com a prática clínica habitual. Nenhuma intervenção experimental será administrada.

As amostras de fezes, com aproximadamente 10 g cada, serão autorrecolhidas pelos participantes em casa, utilizando kits de recolha fornecidos, em cinco momentos predefinidos: nos três dias anteriores à preparação intestinal (linha de base), na primeira dejeção não aquosa após a colonoscopia, e um mês, três meses e seis meses após a colonoscopia, cada um com uma janela permitida de ±7 dias para a visita de um mês e ±14 dias para as visitas de três e seis meses. As amostras serão imediatamente congeladas a -80 °C até à extração de ADN. O ADN genómico fecal será submetido a sequenciação metagenómica shotgun na plataforma DNBSEQ-T7. As leituras brutas serão filtradas com o fastp para remover contaminação por adaptadores e sequências de baixa qualidade. As leituras de alta qualidade serão alinhadas ao genoma humano para excluir ADN do hospedeiro, e as leituras restantes serão utilizadas para perfil taxonómico com MetaPhlAn ou Kraken2/Bracken, e perfil funcional com HUMAnN3 contra as bases de dados UniRef90 e KEGG.

O resultado primário é a alteração na α-diversidade microbiana intestinal, medida pelos índices de Shannon, Simpson e Chao1, e na β-diversidade, avaliada pela dissimilaridade de Bray-Curtis e distâncias de UniFrac, tanto dentro como entre grupos, ao longo dos cinco momentos temporais.

Os resultados secundários incluem a dinâmica temporal de táxons específicos, como a razão dos filos Firmicutes/Bacteroidetes e géneros produtores de butirato; a abundância diferencial de espécies e vias funcionais, incluindo módulos KEGG e reações MetaCyc; e a correlação entre mudanças na composição microbiana e parâmetros clínicos, por exemplo, tempo desde a colecistectomia e frequência de evacuações.

Todas as análises estatísticas serão realizadas utilizando o R. As comparações intragrupo ao longo do tempo serão avaliadas pelo teste de Friedman ou ANOVA de medidas repetidas, ou equivalentes não paramétricos, seguidos de testes post-hoc de Wilcoxon de sinais emparelhados com correção da taxa de descoberta falsa. As comparações intergrupos em cada momento temporal serão analisadas utilizando o teste U de Mann-Whitney ou modelos de efeitos mistos lineares ajustados para potenciais fatores de confusão. A análise de coordenadas principais baseada nas distâncias de Bray-Curtis visualizará a separação da comunidade, e a análise de variância multivariada permutacional testará a existência de agrupamentos significativos. A análise do tamanho do efeito por discriminante linear identificará táxons com abundância diferencial entre grupos, utilizando um limiar de pontuação LDA >2,0 e p <0,05.

O protocolo do estudo foi aprovado pela Comissão de Ética Médica do Hospital Tongji, Faculdade de Medicina de Tongji, Universidade de Ciência e Tecnologia de Huazhong. O consentimento informado por escrito será obtido de todos os participantes antes do recrutamento. Os resultados serão divulgados através de publicações em revistas com revisão por pares e conferências científicas.

Ao perfilar longitudinalmente a microbiota intestinal de indivíduos colecistectomizados e não colecistectomizados expostos ao mesmo regime de preparação intestinal, este estudo delineará se a remoção prévia da vesícula biliar predispõe os doentes a uma disbiose induzida por PEG mais grave ou prolongada. Os resultados podem fornecer uma justificação microbiológica para protocolos de preparação intestinal personalizados ou intervenções direcionadas à microbiota, como probióticos ou orientação dietética pós-colonoscopia, nesta crescente população de doentes.