胎儿手术后新生儿应激相关的表观遗传改变

背景和目标：

开放性脊柱裂或脊髓脊膜膨出 (MMC) 是一种破坏性的中枢神经系统先天性缺陷，无法治愈。 MMC 的病因仍然知之甚少。 胚胎期尾部神经孔神经管闭合的主要失败导致发育中的脊髓暴露于子宫环境。 如果没有保护性组织覆盖，外伤或羊水可能会在整个妊娠期间对暴露的神经组织造成二次破坏。 为了保护脊髓免受这种二次破坏，可以在妊娠 20 至 26 周之间进行胎儿手术修复。

从心理学的角度来看，MMC 的胎儿修复对母亲和胎儿来说都是一个高度紧张的事件。 然而，迄今为止，从未研究过母亲和儿童在进行 MMC 修复的产前手术时的压力。 因此，尚不清楚该程序及其后果是否以及在何种程度上与压力相关，以及是否存在短期或长期后果。

这项研究的目的有三个：

1. MMC 胎儿手术后的新生儿是否显示参与压力调节的基因的表观遗传改变？
2. 表观遗传改变与哪些医学和社会心理变量相关？
3. 在 3 个月大时，胎儿手术后的婴儿与对照组相比是否有更难相处的气质？

方法：

样本：该研究将包括在苏黎世大学医院进行 MMC 胎儿手术后的新生儿和两个对照组。 一个包括健康新生儿，另一个包括在怀孕期间产前接触合成糖皮质激素 (sGC) 后的新生儿。 每组应包括 n=30 名新生儿（即研究参与者总数：n=90）。

招募和程序：招募将在大学儿童医院和苏黎世大学医院进行，并将一直持续到达到所需的样本量为止。 对于每个 MMC 患者，将对第 2 组和第 3 组的对照儿童进行二次招募（与儿童性别匹配）。 在检查纳入和排除标准后，负责研究的工作人员将联系所有研究组的家长。 他们将被口头告知有关该研究的信息，并将提供研究信息函（见附件）。 如有必要，研究人员将在 >24 小时后再次面对面或通过电话联系家长，以回答任何问题。 如果父母同意参加研究，他们将提供签署的书面知情同意书（见附件）。 纳入研究后，研究人员将在出生后 24-36 小时左右在医院再次联系父母，以重新解释唾液样本的收集。 然后将在产后 24 至 72 小时之间收集唾液样本。 产后 6 周零 3 个月，父母将收到邮寄的研究问卷，并要求他们在 1 周内完成并寄回。 如果 10 天后仍未收到问卷，研究人员将通过电话联系家长进行温馨提醒。 父母不会因参加研究而获得经济补偿。

收集的数据：

-) 受过训练的研究项目人员将在孩子出生后 24 至 72 小时内采集 DNA 和 RNA 样本。 为了获得 DNA 和 RNA，将使用专为不能独立吐痰的婴儿设计的特殊海绵装置收集唾液。

对于 DNA，将使用用于儿科的 2x ORAcollect（OC-175；DNA Genotek Inc）收集唾液以获得足够的 DNA 样本。

对于 RNA，将使用 2x 儿科唾液收集设备（CP-190；DNA Genotek Inc）收集唾液，以便从新生儿中获取足够的 RNA 样本。

• 医疗数据： a) 儿童：出生时的胎龄；性别;出生身长和百分位数；出生体重和百分位数；出生时的头围和百分位数；阿普加评分；脐动脉 ph 值和乳酸；胎粪污染的羊水；胎儿手术时的胎龄；胎儿手术的时间和长度；必要的胎儿定位;转移到新生儿科（第 2 组和第 3 组）。 b) 母亲：产妇年龄；平价;糖皮质激素治疗时的胎龄；早产的治疗；怀孕期间的药物；手术和围产期变量；吸烟史、酒精史、尼古丁史、大麻史和其他违禁药物史； ECS 的适应症（第 2 组和第 3 组）。
• 社会心理数据：以下变量应通过标准化和有效的问卷从母亲那里评估：出生国（父母、祖父母）；社会经济地位、母亲和父母教育；目前的工作情况（无，兼职，全职）；母亲和父亲的创伤史（童年创伤问卷——Bernstein & Fink 的简表，1998 年；Karos 等人，2014 年）；怀孕期间的重大生活事件（Landolt & Vollrath 的生活事件量表，1998 年）；怀孕期间母亲和父亲的主观压力（Cohen、Kamarck 和 Mermelstein (1983) 和 Klein 等人 (2016) 的感知压力量表 PSS-10）；母亲和父亲在怀孕期间的心理健康状况以及目前在出生后的评估点：通过 Spitzer、Kroenke 和 Williams（1999）的患者健康问卷 PHQ 的两个模块进行焦虑和抑郁；通过国际创伤问卷 ITQ（Cloitre 等人，2018）进行创伤后应激障碍，以及通过指婴儿行为问卷 IBQ - Rothbart (1981) 的非常简短的表格。 所有措施都是标准化的，并提供经过验证的德语版本。

统计分析：目标 1 将使用 ANCOVA 进行检查，以比较 3 组研究基因区域的总甲基化/基因表达（mRNA 水平）。 将研究甲基化水平和基因表达之间的相关性，预计高甲基化会导致基因表达减少，反之亦然。

目标 2 将通过预测变量和总甲基化之间的（部分）相关分析进行检查。 如果满足要求，将进行多变量分析。

将使用 ANCOVA 比较三组的 IBQ 分数来检查目标 3。

数据在分析之前不会被转换。 如果数据不符合所选统计测试的要求，则修改测试（例如 单向测试）或适当的测试（例如 非参数方法）将被使用。

将使用社会科学统计软件包程序（SPSS，第 25 版）或统计程序 R 进行统计分析。统计显着性将设置为 α= <.05 的显着性水平。

样本量：根据程序 G*Power 3.1（Faul、Erdfelder、Buchner & Lang，2009）的功效分析计算，3 组 ANCOVA 所需的样本量，d=0.4 的效应量（小效应） ) 而 .90 的幂是 n=84。