Altérations épigénétiques associées au stress chez les nouveau-nés après chirurgie fœtale

CONTEXTE ET OBJECTIFS :

Le spina bifida ouvert ou myéloméningocèle (MMC) est une anomalie congénitale dévastatrice du système nerveux central pour laquelle il n'existe aucun remède. L'étiologie de la MMC reste mal connue. L'échec primaire de la fermeture du tube neural au niveau du neuropore caudal au cours de la période embryonnaire entraîne l'exposition de la moelle épinière en développement à l'environnement utérin. Sans couverture tissulaire protectrice, une destruction secondaire du tissu neural exposé par un traumatisme ou du liquide amniotique peut se produire tout au long de la gestation. Afin de protéger la moelle épinière de cette destruction secondaire, une réparation chirurgicale fœtale peut être effectuée entre les semaines de gestation 20 et 26.

D'un point de vue psychologique, la réparation fœtale de MMC constitue un événement très stressant tant pour la mère que pour le fœtus. À ce jour, cependant, le stress des mères et des enfants en cas de chirurgie prénatale pour réparation de CMM n'a jamais été étudié. Il n'est donc pas clair si et dans quelle mesure la procédure et ses conséquences sont associées au stress, et s'il y a des conséquences à court ou à plus long terme.

Les objectifs de cette étude sont triples :

1. Les nouveau-nés après une chirurgie fœtale pour MMC présentent-ils des altérations épigénétiques dans les gènes impliqués dans la régulation du stress ?
2. A quelles variables médicales et psychosociales sont associées les altérations épigénétiques ?
3. A 3 mois, les nourrissons après chirurgie fœtale ont-ils un tempérament plus difficile que les témoins ?

MÉTHODES :

Échantillon : L'étude comprendra des nouveau-nés après une chirurgie fœtale pour MMC à l'hôpital universitaire de Zurich et deux groupes témoins. L'un incluant les nouveau-nés en bonne santé et l'autre incluant les nouveau-nés après une exposition prénatale aux glucocorticoïdes synthétiques (sGC) pendant la grossesse. Chaque groupe comprendra n=30 nouveau-nés (c'est-à-dire le nombre total de participants à l'étude : n=90).

Recrutement et procédures : Le recrutement aura lieu à l'hôpital pédiatrique universitaire et à l'hôpital universitaire de Zürich et se poursuivra jusqu'à ce que la taille d'échantillon requise soit atteinte. Pour chaque patient MMC, un recrutement secondaire d'un enfant témoin pour les groupes 2 et 3 sera effectué (apparié pour le sexe de l'enfant). Les parents de tous les groupes d'étude seront approchés par le personnel responsable de l'étude après vérification des critères d'inclusion et d'exclusion. Ils seront informés oralement de l'étude et la lettre d'information sur l'étude (voir pièce jointe) leur sera fournie. Les parents seront recontactés après > 24h en face à face ou par téléphone par le personnel de l'étude pour répondre à toute question, si nécessaire. Si les parents acceptent de participer à l'étude, ils fourniront le formulaire de consentement éclairé écrit signé (voir pièce jointe). Après inclusion dans l'étude, les parents seront à nouveau contactés à l'hôpital par le personnel de l'étude environ 24 à 36 heures après la naissance pour réexpliquer le prélèvement des échantillons de salive. Les échantillons de salive seront ensuite prélevés entre 24 et 72h post-partum. Six semaines et 3 mois après l'accouchement, les parents recevront les questionnaires de l'étude par courrier et il leur sera demandé de les remplir et de les retourner dans un délai d'une semaine. Si les questionnaires ne sont pas reçus après 10 jours, le personnel de l'étude contactera les parents par téléphone pour un rappel en douceur. Les parents ne sont pas rémunérés financièrement pour participer à l'étude.

Données collectées :

-) Le prélèvement d'échantillons d'ADN et d'ARN de l'enfant aura lieu entre 24 et 72 heures de vie pendant l'hospitalisation par le personnel du projet de recherche formé. Afin d'obtenir de l'ADN et de l'ARN, la salive sera collectée à l'aide d'éponges spéciales conçues pour être utilisées avec des nourrissons qui ne peuvent pas cracher seuls.

Pour l'ADN, 2x ORAcollect pour pédiatrie (OC-175 ; DNA Genotek Inc) seront utilisés pour recueillir la salive afin d'obtenir suffisamment d'échantillon d'ADN.

Pour l'ARN, des dispositifs de collecte de salive 2x pour pédiatrie (CP-190 ; DNA Genotek Inc) seront utilisés pour recueillir la salive afin d'obtenir suffisamment d'échantillon d'ARN des nouveau-nés.

• Données médicales : a) Enfant : âge gestationnel à la naissance ; le sexe; la longueur et le centile à la naissance ; poids à la naissance et centile; circonférence crânienne à la naissance et centile ; score d'Apgar ; ph et lactate de l'artère ombilicale ; liquide amniotique teinté de méconium ; Âge gestationnel à la chirurgie fœtale ; heure et durée de la chirurgie fœtale; positionnement du fœtus nécessaire; transfert en néonatologie (groupe 2 et 3). b) Mère : âge maternel ; parité; âge gestationnel au traitement aux glucocorticoïdes ; traitement du travail prématuré; médicaments pendant la grossesse; variables chirurgicales et périnatales; antécédents en matière de tabagisme, d'alcool, de nicotine, de marihuana et d'autres drogues illicites ; Indication pour ECS (groupe 2 et 3).
• Données psychosociales : Les variables suivantes seront évaluées auprès des mères par des questionnaires standardisés et validés : pays de naissance (parents, grands-parents) ; Statut socio-économique, éducation maternelle et parentale ; situation professionnelle actuelle (non, temps partiel, temps plein); antécédents de traumatisme maternel et paternel (Childhood Trauma Questionnaire - Short Form from Bernstein & Fink, 1998; Karos et al. 2014); les événements marquants de la vie pendant la grossesse (Life Event Scale de Landolt & Vollrath, 1998) ; stress subjectif maternel et paternel pendant la grossesse (Perceived Stress Scale PSS-10 de Cohen, Kamarck, & Mermelstein (1983) et Klein et al. (2016); santé mentale maternelle et paternelle à la fois rétrospectivement pendant la grossesse et actuellement aux points d'évaluation après la naissance : l'anxiété et la dépression au moyen de deux modules du Patient Health Questionnaire PHQ de Spitzer, Kroenke, & Williams (1999); le trouble de stress post-traumatique au moyen de l'International Trauma Questionnaire ITQ (Cloitre et al., 2018) et le tempérament du nourrisson par au moyen du Infant Behavior Questionnaire IBQ - Very Short Form de Rothbart (1981). Toutes les mesures sont standardisées et disponibles dans des versions allemandes validées.

Analyses statistiques : l'objectif 1 sera examiné avec des ANCOVA pour comparer la méthylation totale / l'expression génique (niveau d'ARNm) pour les régions géniques étudiées dans les 3 groupes. La corrélation entre les niveaux de méthylation et l'expression génique sera étudiée, en supposant que l'hyperméthylation induit une expression génique réduite et vice versa.

L'objectif 2 sera examiné par des analyses corrélationnelles (partielles) entre les variables prédictives et la méthylation totale. Si les exigences sont remplies, des analyses multivariées seront effectuées.

L'objectif 3 sera examiné avec des ANCOVA comparant les scores IBQ des trois groupes.

Les données ne seront pas transformées avant l'analyse. Si les données ne répondent pas aux exigences des tests statistiques sélectionnés, des tests modifiés (par ex. tests à sens unique) ou des tests appropriés (par ex. méthodes non paramétriques) seront utilisées.

L'analyse statistique sera effectuée soit avec le programme Package statistique pour les sciences sociales (SPSS, version 25) soit avec le programme statistique R. La signification statistique sera fixée à un niveau de signification de α= <.05.

Taille de l'échantillon : Selon un calcul d'analyse de puissance avec le programme G*Power 3.1 (Faul, Erdfelder, Buchner & Lang, 2009), la taille d'échantillon requise pour une ANCOVA à 3 groupes, une taille d'effet de d=0,4 (petit effet ) et une puissance de 0,90 est n=84.