Vliv kyseliny listové na prezentaci jaderných abnormalit u lidí s anamnézou užívání drog

Cíle.

• Obecný cíl. Stanovit účinek suplementace kyseliny listové na prezentaci jaderných abnormalit spojených s cytogenotoxickým poškozením u zdravých subjektů a chronických uživatelů drog.

• Specifické cíle.

  1. Stanovte přítomnost mikrojader a dalších jaderných abnormalit ve výchozích vzorcích ze skupiny chronických uživatelů drog a zdravé referenční skupiny.

  2. Porovnat základní stanovení cytogenotoxického poškození s následným stanovením poškození po 15 a 30 dnech u chronických uživatelů drog suplementovaných kyselinou listovou.

     Materiály a metody.

• Studovat design. Kvazi-experimentální studie designu pretest-posttest s neekvivalentní kontrolní skupinou u subjektů užívajících návykové látky a zdravých subjektů. Intervence bude spočívat v podání 15 mg kyseliny listové rozdělené do 3 dávek denně. Každému účastníkovi budou odebrány duplicitní vzorky ústní sliznice za účelem stanovení frekvence mikrojader (MN), nukleárního klíčení (NBUD), dvoujaderných buněk (BN), kondenzovaného chromatinu (CC), karyorrhexie (CR), pyknózy (PIC) a karyolýzy. (CL) v různých dočasných událostech: předléčení, po 15 dnech a 30 dnech.

Tento projekt bude realizován u vězňů rehabilitačního centra v El Salto, Jalisco, Mexiko, u účastníků starších 18 let, chronických uživatelů drog (konzumace více než 6 měsíců). Výše uvedené na základě předchozího informovaného souhlasu na praktickém vzorku 45 chronických uživatelů drog a také ekvivalentním vzorku 45 zdravých jedinců bez takové anamnézy.

• Velikost vzorku Pohodlně. Posouzeno bude 45 chronických uživatelů drog, chovanci rehabilitačního centra v Salto v Jalisco a také 45 zdravých jedinců bez anamnézy užívání drog.
• Techniky a nástroje sběru dat. Bude prováděno odběrem ústní cytologie a také pomocí důvěrného dotazníku, v dotazníku budou shromažďovány sociodemografické údaje jako: pohlaví, věk, profese, vzdělání a také informace související s konzumací psychoaktivních látek, např. jako: tabák, marihuana, alkohol, těkavé látky, kokain a metamfetaminy, významná patologická i nepatologická osobní anamnéza. Kromě údajů o spotřebě výživového doplňku nebo vitaminu, jako jsou foláty, B12, C, E, A, lutein nebo melatonin nebo nějaký jiný antioxidant, léky pro farmakologickou léčbu chronického onemocnění a/nebo těžkého aktivního onemocnění parodontu. Vystavení hnojivům, radiaci, těžkým kovům a také místu bydliště, aby se vyloučilo, že žijí v oblastech s vysokou úrovní znečištění ovzduší (Tlaquepaque, Miravalle, Las Juntas a Las Pintas). Stejně tak fyzikální vyšetření dutiny ústní provede zubní lékař. Vše výše uvedené za účelem identifikace patologií, u kterých bylo prokázáno, že generují zkreslení získaných výsledků.

Kyselina listová bude použita v intervenční fázi v 5 mg tabletách, krabička s 20 tabletami, pod obchodním názvem Colicid od Bruluagsa.

--- Cyto-genotoxická analýza pomocí mikrojader v exfoliovaných buňkách ústní sliznice. Bude hodnocen cytogenotoxický účinek generovaný léčivy, stejně jako účinek udělený podávání kyseliny listové na prezentaci jaderných abnormalit spojených s cytogenotoxickým poškozením u chronických uživatelů drog.

U suplementovaných a nesuplementovaných jedinců budou prostřednictvím mikronukleárního biotestu na buňkách ústní sliznice získány duplicitní vzorky od každého jedince, rozprostřeny na sklíčka a obarveny specifickým barvením nukleových kyselin (NA), frekvencí mikrojader (MN), jaderných pupenů ( NBUD), dvoujaderné buňky (BN), kondenzovaný chromatin (CC), karyorrhexe (CR), pyknóza (PIC) a karyolýza (CL).

---Správa a analýza dat Analýza dat bude provedena v programu GraphPad 9.2.0 pro Windows. Pro spojité kvantitativní proměnné budou data prezentována s mírami centrální tendence a rozptylu: průměr a směrodatná odchylka. U ordinálních kvantitativních proměnných budou uvedeny ve frekvencích a procentech, pro srovnání frekvencí mezi pohlavími a věkovými skupinami s Fisherovým testem X2 s uvažováním p < 0,05.

Statistická analýza k nalezení rozdílů mezi skupinami bude provedena pomocí T testu a pro ordinální proměnné bude vypočítána pomocí Chi2.