Efecto del ácido fólico en la presentación de anomalías nucleares en personas con antecedentes de abuso de drogas

Objetivos.

• Objetivo general. Determinar el efecto de la suplementación con ácido fólico en la presentación de anomalías nucleares asociadas al daño citogenotóxico en sujetos sanos y usuarios crónicos de drogas.

• Objetivos específicos.

  1. Determinar la presencia de micronúcleos y otras anomalías nucleares en muestras basales del grupo de consumidores crónicos de drogas y del grupo de referencia sano.

  2. Comparar determinaciones de daño citotóxico basal con determinaciones de daño posteriores, a los 15 y 30 días, en consumidores crónicos de drogas suplementados con ácido fólico.

     Material y métodos.

• Diseño del estudio. Estudio cuasi-experimental de diseño pretest-postest con grupo control no equivalente en sujetos con abuso de sustancias y sujetos sanos. La intervención consistirá en la administración de 15 mg de ácido fólico repartidos en 3 tomas al día. Se tomarán muestras de mucosa oral por duplicado de cada participante para determinar la frecuencia de micronúcleos (MN), brotes nucleares (NBUD), células binucleadas (BN), cromatina condensada (CC), cariorrexis (CR), picnosis (PIC) y cariolisis. (CL) en diferentes eventos temporales: pretratamiento, a los 15 días ya los 30 días.

Este proyecto se llevará a cabo en internos de un centro de rehabilitación en El Salto, Jalisco, México, en participantes mayores de 18 años usuarios crónicos de drogas (Más de 6 meses de consumo). Lo anterior bajo consentimiento informado previo, en una muestra de conveniencia de 45 usuarios crónicos de drogas, así como en una muestra equivalente de 45 individuos sanos sin tales antecedentes.

• Tamaño de la muestra A conveniencia. Se considerarán 45 usuarios crónicos de drogas, internos de un centro de rehabilitación en Salto, Jalisco, así como 45 individuos sanos sin antecedentes de consumo de drogas.
• Técnicas e instrumentos de recogida de datos. Se realizará mediante la toma de citología oral, así como por medio de un cuestionario confidencial, en el cuestionario se recogerán datos sociodemográficos tales como: sexo, edad, profesión, escolaridad, así como información relacionada con el consumo de sustancias psicoactivas como como: tabaco, marihuana, alcohol, inhalables, cocaína y metanfetaminas, antecedentes personales patológicos y no patológicos significativos. Además de datos referentes al consumo de algún suplemento nutricional o vitamina como folatos, B12, C, E, A, luteína o melatonina, o algún otro antioxidante, medicamentos para tratamiento farmacológico de enfermedad crónica y/o enfermedad periodontal activa grave. Exposición a fertilizantes, radiación, metales pesados, así como lugar de residencia para descartar que vivan en zonas con altos niveles de contaminación atmosférica (Tlaquepaque, Miravalle, Las Juntas y Las Pintas). Asimismo, se realizará un examen físico de la cavidad oral por parte de un odontólogo. Todo lo anterior con el fin de identificar patologías que han demostrado generar sesgos en los resultados obtenidos.

El ácido fólico se utilizará en la etapa de intervención en tabletas de 5 mg, caja con 20 tabletas, bajo el nombre comercial Colicid de Bruluagsa.

---Análisis cito-genotóxico por micronúcleos en células exfoliadas de mucosa oral. Se evaluará el efecto citogenotóxico generado por las drogas, así como el efecto conferido a la administración de ácido fólico en la presentación de anomalías nucleares asociadas al daño citogenotóxico en usuarios crónicos de drogas.

En individuos suplementados y no suplementados, a través del bioensayo de micronúcleos de células de la mucosa oral, se obtendrán muestras duplicadas de cada individuo, esparcidas en portaobjetos y teñidas con tinción específica de ácidos nucleicos (NA), frecuencia de micronúcleos (MN), yemas nucleares ( NBUD), células binucleadas (BN), cromatina condensada (CC), cariorrexis (CR), picnosis (PIC) y cariolisis (CL).

---Gestión y análisis de datos El análisis de los datos se realizará en el programa GraphPad 9.2.0 para Windows. Para las variables cuantitativas continuas, los datos se presentarán con medidas de tendencia central y dispersión: media y desviación estándar. Para las variables cuantitativas ordinales, se presentarán en frecuencias y porcentajes, para la comparación de frecuencias entre sexos y grupos de edad con la prueba Fisher X2 considerando una p < 0,05.

El análisis estadístico para encontrar diferencias entre los grupos se realizará mediante la prueba T y para las variables ordinales se calculará mediante Chi2.