Kosttilskud og parodontal sårheling

Introduktion Den gavnlige effekt af vitaminer og kosttilskud på oral sårheling er for nylig blevet rapporteret i kliniske forsøg (for gennemgang se Van der Valden, JCP 2011). I periodontalt væv inducerer det ubalancerede forhold mellem virulens af patogene bakterier og proportional værtsrespons en destruktiv proces af periodontale ledbånd, cementum og alveolær knogle. Betydningen af ​​mikronæringsstoffer, herunder vitaminer, calcium og antioxidanter for parodontose, blev rapporteret i flere kliniske undersøgelser, og integrationen mellem traditionelle (ikke-kirurgiske og kirurgiske indgreb) og mikroernæringsmæssige tilgange blev foreslået til behandling af paradentose (Van der Velden et al. 2011).

Kliniske forsøg rapporterede, at dagligt tilskud af frugt-, grøntsags- og bærjuicepulver, D-vitamin, Calcium ser ud til at forbedre parodontitis hos patienter med kronisk parodontitis, som blev behandlet med ikke-kirurgisk eller kirurgisk parodontal terapi eller var i vedligeholdelsesprogram (Chapple et al. 2012) , Garcia et al. 2011, Miley et al. 2009, Bashutski et al. 2011). De gavnlige virkninger af mikronæringsstoffer på parodontal sundhed og heling skal dog undersøges dybere. Desuden skal et kosttilskud, der er specielt formuleret til parodontal sundhed, testes.

Regenium er et kosttilskud med Q-TER (coenzym q10 terclatrat), DHA Omega 3, Boswellia serrata, vitaminer og mineralsalte, der er formuleret til at forbedre kollagendannelsen og opretholdelsen af ​​mundslimhindens sundhed. Q-TER spiller en nøglerolle i ATP-syntesen og det energiske stofskifte og har en stærk antioxidantfunktion. Et nyligt studie rapporterede også funktionen af ​​Q-10 som hæmmer af osteoklastdifferentiering (Moon et al. 2012). DHA Omega 3 (Resolvine) har en vigtig antioxidantfunktion, som påvirker den cellulære aldring og modererer de antiinflammatoriske mekanismer. Boswellia serrata viste gavnlige effekter på sårheling og sammentrækning (Mallik et al. 2010). Dette mikronæringsstof reducerer syntesen af ​​leukotriener i intakte neutrofiler ved at hæmme 5-lipoxygenase, nøgleenzymet involveret i biosyntesen af ​​leukotriener og i den inflammatoriske proces.

Formålet med nærværende undersøgelse er at vurdere, om patienter, der er ramt af alvorlig parodontal sygdom og behandlet med periodontal ikke-kirurgisk terapi, har gavn af kosttilskud (Regenium). Det vil blive vurderet effekten af ​​Regenium på kliniske parametre for parodontal sårheling og på systemisk inflammation relateret til periodontal sygdom.

1. Eksperimentel procedure

   1.1 Undersøgelsespopulation I alt 60 patienter, der lider af alvorlig parodontal sygdom, og som har behov for ikke-kirurgisk parodontal terapi, vil blive indskrevet.

   Inklusionskriterier

   • alvorlig parodontal sygdom: mindst 2 steder med sonderingslommedybde (PPD)>7 mm, blødning ved sondering (BOP)> 25 %
   • Alder mellem 18 og 65 år
   • Underskrevet informeret samtykke

   Ekskluderingskriterier:

   • Systemiske sygdomme, der kan påvirke periodontal status
   • Metaboliske forstyrrelser
   • Ernæringsmæssige forhold, der kan ændre dannelsen og modningen af ​​bindevæv
   • Graviditet eller amning

   1.2 Emnebeskyttelse Der vil blive indhentet informeret samtykke fra alle forsøgspersoner, der skal indgå i undersøgelsen. Ved indhentning af det informerede samtykke og i udførelsen af ​​undersøgelsen bør principperne i Helsinki-erklæringen om eksperimenter, der involverer mennesker, overholdes. Ved hvert besøg vil klinikeren evaluere patienterne for eventuelle uønskede virkninger. I tilfælde af at en patient har behov for nogen form for behandling i løbet af undersøgelsen, vil den nødvendige behandling blive givet efter klinikerens skøn og i overensstemmelse med den nuværende standard for pleje.

   1.3 Behandling Efter at have inkluderet patienten i undersøgelsen, vil hver patient blive tilfældigt tildelt en af ​​forsøgsgrupperne (test, kontrol). Ved T0 vil kliniske målinger blive høstet, spytprøver vil blive indsamlet og serumanalyse vil blive udført. Desuden vil hver patient modtage mundhygiejneinstruktioner og regelmæssig professionel supragingival debridering. Behandling med Regenium eller placebo vil blive givet til patienten og starter ved T0.

   Fire uger efter påbegyndelse af behandlingen (T1), vil kliniske målinger og spytprøver blive høstet, og serumanalyse vil blive udført. Efter målinger udføres en et-trins fuldmunddesinfektion som beskrevet nedenfor. Skalering og rodhøvling af alle lommer vil blive udført inden for 24 timer i kombination med en omfattende påføring af klorhexidin (0,20%) til alle intraorale nicher såsom (parodontale lommer, tungerygg, mandler) og i kombination med systemisk antibiotikabehandling (amoxicillin) cp. 1gr 2/die + 250 mg metronidazol 3/die).

   For at genoptage patienter vil indtage Ragenium eller placebo i 3 måneder (fra 1 måned før og indtil 2 måneder efter ikke-kirurgisk parodontal terapi), hver patient vil indtage en pille Regenium Tablet om morgenen (med morgenmad) og en kapsel Regenium Capsule i aftenen (med aftensmad). Patienter tilknyttet kontrolgruppen (n=30) vil indtage placebotabletter og -kapsler som foreskrevet i testgruppen. Overholdelse vil blive evalueret ved pilletælling ved afslutningen af ​​undersøgelsen.

   Tre måneder efter behandling med Regenium eller placebo (T2), vil kliniske målinger og spytprøver blive høstet, og serumanalyse vil blive udført.

   Behandlingsopgave For at deltage i en patient i undersøgelsen vil hver investigator udfylde en screening og en tilmeldingsformular og faxe dem til den centrale registrator, der er placeret på Clinical Research Support Unit of Periodontology, Dental Clinic, Dep. for biologiske, kirurgiske og odontologiske videnskaber, Universitetet i Milano, Fondazione IRCCS Ca' Granda Polyclinic Milano, Italien. Efter modtagelse af disse formularer vil registratoren fortsætte med at verificere, at alle adgangskriterier er opfyldt, og vil optage emnet i undersøgelsen. Patientkoder vil blive tildelt fortløbende og vil være lavet af i alt 2 cifre, der koder emnenummeret (fra 01 til 60). Disse vil blive tildelt ved det første besøg, hvorved inklusionskriterierne verificeres og patienten indgår i undersøgelsen. Efter at være blevet optaget patienter i undersøgelsen, vil forsøgspatienter blive randomiseret af Central Registrar til et af de to behandlingsregimer i henhold til foruddefinerede randomiseringstabeller.

   En balanceret tilfældig permuteret blok tilgang vil blive brugt til at udarbejde randomiseringstabellerne for at undgå ulige balance mellem 2 behandlinger. For at reducere chancen for ugunstige opdelinger mellem test- og kontrolpatienter med hensyn til nøgleprognostiske faktorer, vil randomiseringsprocessen tage højde for følgende variabel: røg. Behandlingstildeling vil blive noteret i tilmeldings- og behandlingsskemaet, som opbevares af den centrale registrator. For at skjule opgave fra investigator indtil tidspunktet, ved afslutningen af ​​den ikke-kirurgiske parodontale terapi vil den centrale registrator instruere investigatoren i at tildele en forseglet kuvert indeholdende behandlingen til hver patient, hver kuvert er udstyret med en behandlingskode, sammensat af et bogstav (der svarer til det kliniske center) og to tal.

   Når en patient deltager i undersøgelsen, tildelte investigator ham en sekventiel patientkode, hvorefter klinikeren sender screeningsformularen og tilmeldingsformularen til undersøgelsesregistratoren. Den centrale registrator vil matche randomiseringskonvolutten med emnenummeret baseret på randomiseringstabellerne, og han sender registreringsformularen med overensstemmelsen mellem patientens kode og behandlingens kode. Efter modtagelse af registreringsformularen fra den centrale registrator, vil investigator ordinere behandlingen (Regenium eller placebo) til patienten og vil bestille alle de efterfølgende aftaler i henhold til protokollen.

2. Målinger Kliniske målinger For at evaluere inflammatorisk status, plaquekontrol og sværhedsgraden af ​​paradentose, vil der blive taget kliniske målinger ved T0 (umiddelbart før start med kosttilskud eller placebo), ved T1 (4 uger efter start af kosttilskud) og på den sidste dag af tilskud (T2= 3 måneder efter T0).

Følgende kliniske parametre vil blive taget:

• Full Mouth Plaque Score (FMPS), Full Mouth Bleeding Score (FMBS)
• Periodontal Pocket Depth (PPD), Clinical Attachment Level (CAL), tandmobilitet.

Alle kliniske målinger vil blive taget af en blindkalibreret undersøger.

Radiografiske evalueringer En røntgenstatus med en parallel teknik vil blive taget ved baseline under den diagnostiske proces af paradentose.

Serum analyse

Blodprøver vil blive udført ved T0, T1 og T2 hos alle patienter for at evaluere den systemiske inflammation og for at vurdere ændringer på denne tilstand efter parodontal behandling og indtagelse af kosttilskud. Følgende blodmarkører for systemisk inflammation vil blive evalueret (Graziani et al. 2010):

• Højfølsomt C-reaktivt protein (hsCRP)
• D-dimerer og nyrefunktion (cystatin C)

Hel spytopsamling Ustimuleret hel spyt vil blive indsamlet fra hvert individ i begyndelsen af ​​aftalen, som tidligere beskrevet af Ramseier et al. Forsøgspersonerne vil kraftigt skylle deres mund med postevand i 20 sekunder for at fjerne groft snavs. Forsøgspersonen opspyter derefter vandet. Efter en venteperiode på 2 minutter vil forsøgspersonerne vippe hovedet over det graduerede reagensglas og passivt ekspektoreret hele spyt ind i plastiktragten placeret inde i plastikrøret (Mandel et al. 1976). Hvert rør vil være mærket med forsøgspersonens initialer, høstdato og prøvenavn. Indsamlingen vil blive afsluttet, når 2 ml hel spyt er opsamlet, eller maksimalt 15 minutters prøveudtagningstid er nået. Prøven vil derefter straks placeres på is, suppleret med en proteinasehæmmer kombination af 1 % aprotinin (1 mg/ml) og 0,5 % phenylmethylsulfonylfluorid (PMSF) (200 mM i MeOH) (Sigma Chemical Company, St-Louis, MO), og alikvoteret før opbevaring ved -20°C indtil analyse.

Analyse af spytbiomarkører Ekspression af inflammatoriske biomarkører vil blive kvantificeret ved hjælp af et tilpasset humant cytokinprotein-array|| til evaluering af matrix metalloproteinase-8 og -9 (MMPs-8 og -9).

Efter modtagelsen vil Quantibody® Array-sættene blive opbevaret ved -20°C. Før hver analyse vil hele spytprøver blive optøet ved stuetemperatur og mikrocentrifugeret i 5 minutter for at opnå en cellefri supernatant til analyse.

Hvert objektglas, der indeholder cytokinstandarder, der anvendes til at fremstille kendte serielle fortyndinger, med prøvefortyndingsmiddel, der tjener som negativ kontrol, og eksperimentelle prøver vil derefter blive inkuberet natten over ved 4°C efterfulgt af vask af ubundne materialer. Detektionsantistoffet vil derefter binde til antigenerne i hver brønd. Cy3-ækvivalent farvestof-konjugeret streptavidin vil blive pipetteret i hver brønd, som binder til detektionsantistoffet forbundet med immunkomplekser. Objektglassene vil blive inkuberet og dækket med aluminiumsfolie for at undgå lyseksponering, og fluorescensen fra hver brønd blev detekteret ved hjælp af en laserscanner.¶ De resulterende signaler fra prøverne vil blive sammenlignet med standardkurven for hver af cytokinerne for at bestemme koncentrationerne af hvert cytokin i prøverne. Data vil blive udtrukket og analyseret ved hjælp af microarray analysesoftware.#

Overholdelse og dens evaluering Overholdelse er et alvorligt problem for kliniske forsøg, for at forbedre dette grundlæggende aspekt af undersøgelsen, vil klinikerne anvende en nyttig teknik.

Hver patient vil blive instrueret i at downloade en applikation på sin smartphone, der minder ham om at tage Regenium om morgenen og om aftenen; for det andet vil klinikeren ringe til patienterne to uger efter T0 og to og fem uger efter T1 med påskud for at minde om den næste aftale og for at have information om deres mundsundhed, men med den reelle hensigt at huske og verificere den regelmæssige antagelse om Regenium. Til sidst, ved T2, skal patienterne bringe blisteren tilbage, også de tomme, for at tælle pille.

Det er vigtigt ikke at fortælle patienterne om antallet af pille, for at undgå risikoen for bias skabt af patienten, som smider den resterende pille ud dagen før kontrollen. For at få blisteren tilbage, vil klinikere sige, at patienterne skal returnere blister af spildårsager, både for pakke og piller.

Referencer

J.D. Bashutski et al. Indvirkningen af ​​D-vitamin på resultaterne af periodontal kirurgi. Journal of Dental Research, bind 90, pp. 1007-12, 2011.

M.R. Chapple, et al. Supplerende daglige tilskud med indkapslet frugt-, grøntsags- og bærjuice-pulverkoncentrater og kliniske periodontale resultater: En dobbeltblind RCT. Journal of Clinical Periodontology, vol. 39, nr. 1, s. 62-72, 2012.

M. N. Garcia, C. F. Hildebolt, D. D. Miley, D. A. Dixon, R. A. Couture, C. L. Spearie, E. M. Langenwalter, W. D. Shannon, E. Deych, C. Mueller og R. Civitelli, "One-year Effects of Vitamin D and Chronic Supplementation on Calcium Supplementation Parodontitis," Journal of Periodontology, vol. 82, nr. 1, s. 25-32, 2011.

F. Graziani, et al. Systemisk inflammation efter ikke-kirurgisk og kirurgisk periodontal terapi Journal of Clinical Periodontology, vol. 37, nr. 9, s. 848-54, 2010.

A. Mallik et al. Evaluering af Boswellia Serrata oleogummiharpiks til sårhelende aktivitet. Der Pharmacia Lettre, , vol. 2, nr. 2, s. 457-463, 2010.

I.D. Mandel og S. Wotman, Spytsekretionerne i sundhed og sygdom. Oral Sciences Review, bind 8, pp. 25-47, 1976.

D. D. Miley, M. N. Garcia, C. F. Hildebolt, W. D. Shannon, R. A. Couture, C. L. Anderson Spearie, D. A. Dixon, E. M. Langenwalter, C. Mueller og R. Civitelli, "Tværsnitsundersøgelse af Vitamin D og Calcium Supplementation Periodronic Effects. "Journal of Periodontology, vol. 80, nej. 9, s. 1433-9, 2009.

H. Moon et al., Antioxidanter, som coenzym Q10, selenit og curcumin, hæmmede osteoklastdifferentiering ved at undertrykke generering af reaktive oxygenarter. Biochemical and Biophysical Research Communications vol. 418, s. 247-253, 2012.

C.A. Ramseier et al., Identifikation af patogen- og værtsresponsmarkører korreleret med periodontal sygdom. Journal of Periodontology vol 80, no. 3, s. 436-46, 2009.

U. Van der Velden, D. Kuzmanova og I. L. C. Chapple, "Micronutriional Approaches to Periodontal Therapy," Journal of Clinical Periodontology, vol. 38, s. 142-158, 2011.