Пищевые добавки и заживление пародонтальных ран

Введение Благоприятное влияние витаминов и пищевых добавок на заживление ран в ротовой полости недавно было подтверждено клиническими испытаниями (см. обзор Van der Valden, JCP 2011). В тканях пародонта несбалансированное соотношение между вирулентностью бактерий-возбудителей и пропорциональным ответом хозяина вызывает деструктивный процесс периодонтальной связки, цемента и альвеолярной кости. О важности микронутриентов, включая витамины, кальций и антиоксиданты, для здоровья пародонта сообщалось в нескольких клинических исследованиях, и для лечения пародонтита была предложена интеграция между традиционными (нехирургическими и хирургическими вмешательствами) и микронутриентными подходами (Van der Velden et al. 2011).

Клинические исследования показали, что ежедневный прием порошка фруктового, овощного и ягодного сока, витамина D и кальция, по-видимому, улучшает состояние пародонта у пациентов с хроническим пародонтитом, которые лечились нехирургическим или хирургическим пародонтологическим лечением или проходили поддерживающую программу (Chapple et al 2012). , Гарсия и др., 2011 г., Майли и др., 2009 г., Башутски и др., 2011 г.). Тем не менее, благотворное влияние микронутриентов на здоровье и заживление пародонта требует более глубокого изучения. Кроме того, пищевая добавка, специально разработанная для здоровья пародонта, должна быть протестирована.

Regenium — это пищевая добавка с Q-TER (терклатрат коэнзима Q10), DHA Omega 3, Boswellia serrata, витаминами и минеральными солями, которая была разработана для улучшения образования коллагена и поддержания здоровья слизистой оболочки полости рта. Q-TER играет ключевую роль в синтезе АТФ и энергетическом метаболизме и обладает сильной антиоксидантной функцией. В недавнем исследовании также сообщалось о функции Q-10 как ингибитора дифференцировки остеокластов (Moon et al. 2012). DHA Omega 3 (Resolvine) выполняет важную антиоксидантную функцию, влияя на клеточное старение и смягчая противовоспалительные механизмы. Boswellia serrata продемонстрировала благотворное влияние на заживление и сокращение ран (Mallik et al. 2010). Этот микронутриент снижает синтез лейкотриенов в интактных нейтрофилах путем ингибирования 5-липоксигеназы, ключевого фермента, участвующего в биосинтезе лейкотриенов и в воспалительном процессе.

Целью настоящего исследования является оценка пользы пищевых добавок (Регениум) для пациентов с тяжелыми заболеваниями пародонта, получающих пародонтальную нехирургическую терапию. Будет оценено влияние Регениума на клинические параметры заживления пародонтальных ран и на системное воспаление, связанное с заболеванием пародонта.

1. Экспериментальная процедура

   1.1 Исследуемая популяция Всего будет включено 60 пациентов с тяжелыми заболеваниями пародонта, нуждающихся в нехирургическом пародонтологическом лечении.

   Критерии включения

   • тяжелое заболевание пародонта: не менее 2 участков с глубиной кармана при зондировании (PPD) > 7 мм, кровотечением при зондировании (BOP) > 25%
   • Возраст от 18 до 65 лет
   • Подписанное информированное согласие

   Критерий исключения:

   • Системные заболевания, которые могут повлиять на состояние пародонта
   • Метаболические нарушения
   • Условия питания, которые могут изменить формирование и созревание соединительной ткани
   • Беременность или лактация

   1.2 Защита субъектов Информированное согласие будет получено от всех субъектов, которые будут включены в исследование. При получении информированного согласия и проведении исследования следует придерживаться принципов, изложенных в Хельсинкской декларации об экспериментах с участием людей. При каждом посещении клиницист будет оценивать пациентов на предмет любых неблагоприятных эффектов. В случае, если пациенту требуется какое-либо лечение в ходе исследования, необходимое лечение будет предоставлено по усмотрению врача и в соответствии с действующим стандартом лечения.

   1.3 Лечение. После включения пациента в исследование каждый пациент будет случайным образом распределен в одну из экспериментальных групп (испытательная, контрольная). В Т0 будут собраны клинические измерения, взяты образцы слюны и проведен анализ сыворотки. Кроме того, каждый пациент получит инструкции по гигиене полости рта и регулярную профессиональную санацию наддесневой полости. Терапия препаратом Регениум или плацебо будет назначена пациенту и начнется в Т0.

   Через четыре недели после начала терапии (T1) будут взяты клинические измерения и образцы слюны, а также будет проведен анализ сыворотки. После измерений будет проведена одноэтапная дезинфекция всего рта, как описано ниже. Удаление зубного камня и полировка корней всех карманов будет выполняться в течение 24 часов в сочетании с обширным применением хлоргексидина (0,20%) во всех внутриротовых нишах, таких как пародонтальные карманы, спинка языка, миндалины, и в сочетании с системным лечением антибиотиками (амоксициллин). ср. 1 г 2 шт. + 250 мг метронидазола 3 шт.).

   Для возобновления пациенты будут принимать Ragenium или плацебо в течение 3 месяцев (от 1 месяца до и до 2 месяцев после нехирургической пародонтальной терапии), каждый пациент будет принимать одну таблетку Regenium Tablet утром (с завтраком) и одну капсулу Regenium Capsule во время еды. вечером (с ужином). Пациенты, отнесенные к контрольной группе (n=30), будут принимать таблетки и капсулы плацебо, как это было предписано в тестовой группе. Приверженность будет оцениваться путем подсчета таблеток в конце исследования.

   Через три месяца после терапии Регениумом или плацебо (Т2) будут взяты клинические измерения и образцы слюны, а также будет проведен анализ сыворотки.

   Назначение лечения Чтобы включить пациента в исследование, каждый исследователь заполняет анкету и форму заявки и отправляет их по факсу в Центральный регистратор, расположенный в Отделе поддержки клинических исследований пародонтологии, Стоматологическая клиника, отд. биологических, хирургических и стоматологических наук, Миланский университет, Fondazione IRCCS Ca' Granda Polyclinic Milan, Италия. После получения этих форм регистратор проверит соответствие всем критериям включения и включит субъекта в исследование. Коды пациентов будут назначаться последовательно и состоять из двух цифр, которые будут кодировать номер субъекта (от 01 до 60). Они будут назначены при первом посещении, при проверке критериев включения и включении пациента в исследование. После того, как пациенты будут включены в исследование, Центральный регистратор случайным образом назначит экспериментальных пациентов на одну из двух схем лечения в соответствии с предварительно определенными таблицами рандомизации.

   Для подготовки таблиц рандомизации будет использоваться сбалансированный подход со случайной перестановкой блоков, чтобы избежать неравного баланса между двумя видами лечения. Чтобы уменьшить вероятность неблагоприятного разделения между тестовыми и контрольными пациентами с точки зрения ключевых прогностических факторов, в процессе рандомизации будет учитываться следующая переменная: курение. Назначение лечения будет отмечено в форме регистрации и назначения лечения, которая будет храниться у центрального регистратора. Для сокрытия назначения от исследователя до тех пор, пока по окончании безоперационного пародонтологического лечения центральный регистратор не даст указание исследователю выдать запечатанный конверт с лечением для каждого пациента, каждый конверт снабжен Кодом лечения, составленным буква (соответствующая клиническому центру) и две цифры.

   Когда пациент включается в исследование, исследователь присваивает ему последовательный код пациента, после чего клиницист отправляет форму скрининга и форму регистрации регистратору исследования. Центральный регистратор сопоставит конверт рандомизации с номером субъекта на основе таблиц рандомизации и отправит регистрационную форму с соответствием между кодом пациента и кодом лечения. После получения регистрационной формы от Центрального регистратора исследователь назначит пациенту лечение (Регениум или плацебо) и запишется на все последующие приемы в соответствии с протоколом.

2. Измерения Клинические измерения Для оценки воспалительного статуса, контроля образования зубного налета и тяжести заболевания пародонта клинические измерения будут проводиться в Т0 (непосредственно перед началом приема пищевых добавок или плацебо), в Т1 (через 4 недели после начала приема добавок) и в последний день лечения. добавки (T2= 3 месяца после T0).

Принимаются следующие клинические параметры:

• Оценка зубного налета во рту (FMPS), оценка кровотечения во рту (FMBS)
• Глубина пародонтального кармана (PPD), уровень клинического прикрепления (CAL), подвижность зубов.

Все клинические измерения будут проводиться слепым экспертом.

Рентгенологические оценки Рентгенологический статус с помощью параллельного метода будет сделан на исходном уровне в процессе диагностики заболеваний пародонта.

Анализ сыворотки

Всем пациентам в Т0, Т1 и Т2 будет проведен анализ крови для оценки системного воспаления и оценки динамики этого состояния после пародонтологического лечения и приема биологически активных добавок. Будут оцениваться следующие маркеры системного воспаления в крови (Graziani et al. 2010):

• С-реактивный белок высокой чувствительности (hsCRP)
• D-димеры и функция почек (цистатин С)

Сбор цельной слюны Нестимулированная цельная слюна будет собираться у каждого субъекта в начале приема, как ранее описано Ramseier et al. Субъекты энергично полоскали рот водопроводной водой в течение 20 секунд, чтобы удалить крупный мусор. Затем субъект отхаркивает воду. После периода ожидания в 2 минуты испытуемые наклоняют голову над градуированной пробиркой и пассивно отхаркивают всю слюну в пластиковую воронку, помещенную внутри пластиковой пробирки (Мандель и др., 1976). Каждая пробирка будет помечена инициалами субъекта, датой сбора и названием образца. Сбор будет завершен после того, как будет собрано 2 мл цельной слюны или по истечении максимум 15 минут времени отбора проб. Затем образец немедленно помещают на лед, добавляют комбинацию ингибиторов протеиназ, состоящую из 1% апротинина (1 мг/мл) и 0,5% фенилметилсульфонилфторида (ФМСФ) (200 мМ в МеОН) (Sigma Chemical Company, Сент-Луис, Миссури), и делят на аликвоты перед хранением при -20°C до проведения анализа.

Анализ слюнных биомаркеров Экспрессия биомаркеров воспаления будет количественно определена с использованием пользовательского массива белков цитокинов человека || для оценки матриксной металлопротеиназы-8 и -9 (ММП-8 и -9).

После получения наборы Quantibody® Array будут храниться при температуре -20°C. Перед каждым анализом цельные образцы слюны размораживают при комнатной температуре и подвергают микроцентрифугированию в течение 5 минут, чтобы получить бесклеточный супернатант для анализа.

Каждый слайд, содержащий стандарты цитокинов, используемые для приготовления известных серийных разведений, с разбавителем образца, служащим в качестве отрицательного контроля, и экспериментальные образцы затем инкубируют в течение ночи при 4 ° C с последующим промыванием несвязавшихся материалов. Детектирующее антитело затем связывается с антигенами в каждой лунке. В каждую лунку пипеткой вносят конъюгированный с красителем стрептавидин, эквивалентный Cy3, который связывается с детектирующим антителом, связанным с иммунными комплексами. Слайды будут инкубированы и покрыты алюминиевой фольгой, чтобы избежать воздействия света, а флуоресценция каждой лунки будет обнаружена с помощью лазерного сканера.¶ Результирующие сигналы образцов будут сравниваться со стандартной кривой для каждого из цитокинов, чтобы определить концентрации каждого цитокина в образцах. Данные будут извлечены и проанализированы с использованием программного обеспечения для анализа микрочипов.#

Приверженность и ее оценка Приверженность является серьезной проблемой для клинических испытаний, и для улучшения этого фундаментального аспекта исследования клиницисты примут некоторые полезные методы.

Каждому пациенту будет предложено загрузить на свой смартфон приложение, которое будет напоминать ему о приеме Регениума утром и вечером; во-вторых, клиницист будет звонить пациентам через две недели после Т0 и через две и пять недель после Т1 под предлогом напомнить о следующем приеме и получить информацию о состоянии их полости рта, но с реальным намерением запомнить и проверить регулярное предположение о Регениум. Наконец, на Т2 пациенты должны будут вернуть блистер, в том числе и пустой, для подсчета таблеток.

Важно не говорить пациентам о количестве таблеток, чтобы избежать риска смещения, создаваемого пациентом, который выбрасывает оставшуюся таблетку за день до контроля. Чтобы вернуть блистер, клиницисты посоветуют пациентам вернуть блистер по причинам истощения как для упаковки, так и для таблеток.

Рекомендации

Дж. Д. Башуцкий и соавт. Влияние витамина D на исход пародонтальной хирургии. Журнал стоматологических исследований, том 90, стр. 1007-12, 2011.

М. Р. Чаппл и др. Дополнительный ежедневный прием инкапсулированных концентратов фруктовых, овощных и ягодных соков и клинические пародонтальные исходы: двойное слепое РКИ. Журнал клинической пародонтологии, том. 39, нет. 1, стр. 62-72, 2012.

М. Н. Гарсия, К. Ф. Хильдеболт, Д. Д. Майли, Д. А. Диксон, Р. А. Кутюр, К. Л. Спири, Э. М. Лангенвальтер, В. Д. Шеннон, Э. Дейч, К. Мюллер и Р. Чивителли, «Влияние добавок витамина D и кальция в течение одного года на хронические Пародонтит, «Журнал пародонтологии», том. 82, нет. 1, стр. 25-32, 2011.

Ф. Грациани и др. Системное воспаление после нехирургической и хирургической периодонтальной терапии Журнал клинической пародонтологии, том. 37, нет. 9, с. 848-54, 2010.

А. Маллик и соавт. Оценка маслянистой смолы Boswellia Serrata на ранозаживляющую активность. Der Pharmacia Lettre, , vol. 2, нет. 2, с. 457-463, 2010.

И. Д. Мандель и С. Уотман, Слюнные выделения в норме и при болезнях. Обзор устных наук, том 8, стр. 25-47, 1976.

Д. Д. Майли, М. Н. Гарсия, К. Ф. Хильдеболт, В. Д. Шеннон, Р. А. Кутюр, С. Л. Андерсон Спири, Д. А. Диксон, Э. М. Лангенвальтер, К. Мюллер и Р. Чивителли, «Поперечное исследование влияния добавок витамина D и кальция на хронический пародонтит, "Журнал пародонтологии, том. 80, нет. 9, с. 1433-9, 2009.

H. Moon et al., Антиоксиданты, такие как коэнзим Q10, селенит и куркумин, ингибируют дифференцировку остеокластов, подавляя образование активных форм кислорода. Сообщения о биохимических и биофизических исследованиях, том. 418, с. 247-253, 2012.

C.A Ramseier et al., Идентификация патогена и маркеров ответа хозяина, коррелирующих с заболеванием пародонта. Журнал пародонтологии, том 80, вып. 3, с. 436-46, 2009.

У. Ван дер Вельден, Д. Кузманова и И. Л. К. Чаппл, «Микропитательные подходы к пародонтальной терапии», Журнал клинической пародонтологии, том. 38, с. 142-158, 2011.