Voedingssupplementen en parodontale wondgenezing

Inleiding Het gunstige effect van vitamines en voedingssupplementen op de genezing van orale wonden is onlangs in klinische studies gerapporteerd (voor overzicht zie Van der Valden, JCP 2011). In parodontaal weefsel induceert de onevenwichtige verhouding tussen virulentie van pathogene bacteriën en evenredige gastheerrespons een destructief proces van parodontaal ligament, cement en alveolair bot. Het belang van micronutriënten waaronder vitamines, calcium en antioxidanten voor parodontale gezondheid werd gerapporteerd in verschillende klinische studies en de integratie tussen traditionele (niet-chirurgische en chirurgische ingrepen) en micronutritionele benaderingen werd voorgesteld voor de behandeling van parodontitis (Van der Velden et al. 2011).

Klinische onderzoeken meldden dat dagelijkse suppletie van fruit-, groente- en bessensappoeder, vitamine D, calcium de parodontale gezondheid lijkt te verbeteren bij patiënten met chronische parodontitis die werden behandeld met niet-chirurgische of chirurgische parodontale therapie of in een onderhoudsprogramma zaten (Chapple et al 2012 , Garcia et al. 2011, Miley et al. 2009, Bashutski et al. 2011). De gunstige effecten van micronutriënten op parodontale gezondheid en genezing moeten echter grondiger worden onderzocht. Bovendien moet een voedingssupplement dat speciaal is samengesteld voor parodontale gezondheid worden getest.

Regenium is een voedingssupplement met Q-TER (co-enzym q10 terclatraat), DHA Omega 3, Boswellia serrata, vitamines en minerale zouten dat is samengesteld om de collageenvorming en het behoud van de gezondheid van het mondslijmvlies te verbeteren. Q-TER speelt een sleutelrol in de ATP-synthese en het energetisch metabolisme en heeft een sterke antioxidantfunctie. Een recente studie rapporteerde ook de functie van Q-10 als remmer van osteoclastdifferentiatie (Moon et al. 2012). DHA Omega 3 (Resolvine) heeft een belangrijke antioxiderende functie, beïnvloedt de celveroudering en matigt de ontstekingsremmende mechanismen. Boswellia serrata vertoonde gunstige effecten op wondgenezing en contractie (Mallik et al. 2010). Deze micronutriënt vermindert de synthese van leukotriënen in intacte neutrofielen door remming van 5-lipoxygenase, het belangrijkste enzym dat betrokken is bij de biosynthese van leukotriënen en bij het ontstekingsproces.

Het doel van de huidige studie is om te evalueren of patiënten met ernstige parodontitis en behandeld met parodontale niet-chirurgische therapie baat hebben bij voedingssupplementen (Regenium). Het effect van Regenium op klinische parameters van parodontale wondgenezing en op systemische ontsteking gerelateerd aan parodontitis zal worden beoordeeld.

1. Experimentele procedure

   1.1 Studiepopulatie In totaal zullen 60 patiënten met ernstige parodontitis die niet-chirurgische parodontale therapie nodig hebben, worden ingeschreven.

   Inclusiecriteria

   • ernstige parodontitis: ten minste 2 locaties met Probing Pocket Depth (PPD)> 7 mm, Bloeding bij Probing (BOP)> 25%
   • Leeftijd tussen 18 en 65 jaar
   • Ondertekende geïnformeerde toestemming

   Uitsluitingscriteria:

   • Systemische ziekten die de parodontale status kunnen beïnvloeden
   • Stofwisselingsziekten
   • Voedingsomstandigheden die de vorming en rijping van bindweefsel kunnen veranderen
   • Zwangerschap of borstvoeding

   1.2 Proefpersoonbescherming Geïnformeerde toestemming zal worden verkregen van alle proefpersonen die in het onderzoek worden opgenomen. Bij het verkrijgen van de geïnformeerde toestemming en bij het uitvoeren van het onderzoek moeten de principes worden nageleefd die zijn uiteengezet in de Verklaring van Helsinki over experimenten met menselijke proefpersonen. Bij elk bezoek zal de clinicus patiënten evalueren op eventuele ongewenste effecten. Als een patiënt in de loop van het onderzoek enige behandeling nodig heeft, zal de noodzakelijke behandeling worden gegeven naar goeddunken van de clinicus en volgens de huidige zorgstandaard.

   1.3 Behandeling Nadat de patiënt in het onderzoek is opgenomen, wordt elke patiënt willekeurig toegewezen aan een van de experimentele groepen (test, controle). Op T0 worden klinische metingen verricht, speekselmonsters afgenomen en serumanalyses uitgevoerd. Bovendien krijgt elke patiënt instructies voor mondhygiëne en regelmatig professioneel supragingivaal debridement. Therapie met Regenium of placebo wordt aan de patiënt gegeven en begint op T0.

   Vier weken na het starten van de therapie (T1) worden klinische metingen en speekselmonsters afgenomen en wordt serumanalyse uitgevoerd. Na metingen wordt de monddesinfectie in één fase uitgevoerd zoals hieronder beschreven. Scaling en wortelplanering van alle pockets zal binnen 24 uur worden uitgevoerd in combinatie met een uitgebreide toepassing van chloorhexidine (0,20%) op alle intra-orale niches zoals (parodontale pockets, tongdorsum, amandelen) en in combinatie met systemische antibioticabehandeling (amoxicilline kp. 1gr 2/dag + 250 mg metronidazol 3/dag).

   Om te hervatten zullen patiënten gedurende 3 maanden Ragenium of placebo innemen (van 1 maand vóór en tot 2 maanden na niet-chirurgische parodontale therapie). de avond (met diner). Patiënten die zijn toegewezen aan de controlegroep (n=30) zullen placebo-tabletten en -capsules innemen zoals voorgeschreven in de testgroep. Naleving zal worden beoordeeld door middel van het tellen van de pillen aan het einde van het onderzoek.

   Drie maanden na therapie met Regenium of placebo (T2) worden klinische metingen en speekselmonsters afgenomen en serumanalyse uitgevoerd.

   Behandelingsopdracht Om een ​​patiënt in het onderzoek op te nemen, vult elke onderzoeker een screening en een invoerformulier in en faxt deze naar de centrale registrar van de Clinical Research Support Unit of Parodontology, Dental Clinic, Dep. Biologische, Chirurgische en Tandheelkundige Wetenschappen, Universiteit van Milaan, Fondazione IRCCS Ca' Granda Polyclinic Milaan, Italië. Na ontvangst van deze formulieren gaat de griffier na of aan alle toelatingscriteria is voldaan en neemt hij de proefpersoon op in het onderzoek. Patiëntcodes worden achtereenvolgens toegewezen en bestaan ​​uit in totaal 2 cijfers die het onderwerpnummer coderen (van 01 tot 60). Deze worden toegewezen bij het eerste bezoek, waarbij de inclusiecriteria worden geverifieerd en de patiënt wordt opgenomen in het onderzoek. Nadat patiënten in het onderzoek zijn opgenomen, zullen experimentele patiënten willekeurig door de centrale registrar worden toegewezen aan een van de twee behandelingsregimes volgens vooraf gedefinieerde randomisatietabellen.

   Een gebalanceerde random gepermuteerde blokbenadering zal worden gebruikt om de randomisatietabellen op te stellen om ongelijke balans tussen 2 behandelingen te voorkomen. Om de kans op ongunstige splitsingen tussen test- en controlepatiënten in termen van belangrijke prognostische factoren te verkleinen, zal het randomisatieproces rekening houden met de volgende variabele: rook. De behandelopdracht wordt genoteerd op het aanmeldings- en behandelopdrachtformulier dat wordt bewaard door de centrale registrar. Om de opdracht voor de onderzoeker tot het einde van de niet-chirurgische parodontale therapie geheim te houden, zal de centrale registrar de onderzoeker instrueren om voor elke patiënt een verzegelde envelop met de behandeling toe te wijzen. Elke envelop is voorzien van een behandelingscode, samengesteld door een letter (die overeenkomt met het klinisch centrum) en twee cijfers.

   Wanneer een patiënt deelneemt aan het onderzoek, heeft de onderzoeker hem een ​​sequentiële patiëntcode toegewezen, waarna de clinicus het screeningsformulier en het invoerformulier naar de onderzoeksregistrator stuurt. De centrale registrar koppelt de randomisatie-envelop aan het subjectnummer op basis van de randomisatietabellen en verstuurt het Inschrijfformulier met de correspondentie tussen Code Patiënt en Code Behandeling. Na ontvangst van het aanmeldingsformulier van de Centrale Registratie schrijft de onderzoeker de behandeling (Regenium of placebo) voor aan de patiënt en boekt hij alle vervolgafspraken volgens het protocol.

2. Metingen Klinische metingen Om de ontstekingsstatus, plaquecontrole en ernst van parodontitis te evalueren, zullen klinische metingen worden uitgevoerd op T0 (onmiddellijk voor het starten met voedingssupplementen of placebo), op T1 (4 weken na het starten van suppletie) en op de laatste dag van de behandeling. suppletie (T2= 3 maanden na T0).

De volgende klinische parameters zullen worden genomen:

• Volledige Mond Plaque Score (FMPS), Volledige Mond Bloeden Score (FMBS)
• Parodontale Pocket Depth (PPD), Clinical Attachment Level (CAL), tandmobiliteit.

Alle klinische metingen worden uitgevoerd door een blind gekalibreerde examinator.

Radiografische evaluaties Tijdens het diagnostisch proces van parodontitis wordt een röntgenfoto gemaakt met een parallelle techniek.

Serum analyse

Bloedonderzoek zal worden uitgevoerd op T0, T1 en T2 bij alle patiënten om de systemische ontsteking te evalueren en om veranderingen in deze toestand te beoordelen na parodontale behandeling en inname van voedingssupplementen. De volgende bloedmarkers van systemische ontsteking zullen worden geëvalueerd (Graziani et al. 2010):

• Hooggevoelig C-reactief proteïne (hsCRP)
• D-dimeren en nierfunctie (cystatine C)

Hele speekselverzameling Ongestimuleerd volledig speeksel zal aan het begin van de afspraak bij elke proefpersoon worden verzameld, zoals eerder beschreven door Ramseier et al. Proefpersonen spoelden hun mond krachtig gedurende 20 seconden met kraanwater om grof vuil te verwijderen. Het onderwerp spuwt vervolgens het water uit. Na een wachttijd van 2 minuten kantelen de proefpersonen hun hoofd over het reageerbuisje met schaalverdeling en spuwen passief heel speeksel in de plastic trechter die in het plastic buisje is geplaatst (Mandel et al. 1976). Elke buis wordt gelabeld met de initialen van de proefpersoon, de oogstdatum en de naam van het monster. De verzameling is voltooid zodra 2 ml volledig speeksel is verzameld, of een maximale bemonsteringstijd van 15 minuten is bereikt. Het monster wordt dan onmiddellijk op ijs geplaatst, aangevuld met een proteïnaseremmercombinatie van 1% aprotinine (1 mg/ml) en 0,5% fenylmethylsulfonylfluoride (PMSF) (200 mM in MeOH) (Sigma Chemical Company, St-Louis, MO), en aliquoted voorafgaand aan opslag bij -20°C tot analyse.

Analyse van speekselbiomarkers De expressie van inflammatoire biomarkers zal worden gekwantificeerd met behulp van een aangepaste menselijke cytokine-eiwitarray || voor de evaluatie van matrix metalloproteïnase-8 en -9 (MMPs-8 en -9).

Na ontvangst worden de Quantibody® Array-kits bewaard bij -20°C. Voorafgaand aan elke assay worden hele speekselmonsters bij kamertemperatuur ontdooid en gedurende 5 minuten gemicrocentrifugeerd om een ​​celvrij supernatant voor analyse te verkrijgen.

Elk objectglaasje met cytokinestandaarden die worden gebruikt voor het maken van bekende seriële verdunningen, met monsterverdunningsmiddel dat dient als de negatieve controle, en experimentele monsters worden vervolgens een nacht bij 4°C geïncubeerd, gevolgd door het wassen van ongebonden materialen. Het detectie-antilichaam zal dan aan de antigenen in elk putje binden. Cy3-equivalent kleurstof-geconjugeerd streptavidine zal in elk putje worden gepipetteerd, dat zich bindt aan het detectie-antilichaam geassocieerd met immuuncomplexen. De objectglaasjes worden geïncubeerd en bedekt met aluminiumfolie om blootstelling aan licht te voorkomen en de fluorescentie van elk putje werd gedetecteerd met behulp van een laserscanner.¶ De resulterende signalen van de monsters zullen worden vergeleken met de standaardcurve voor elk van de cytokines om de concentraties van elk cytokine in de monsters te bepalen. Gegevens worden geëxtraheerd en geanalyseerd met behulp van microarray-analysesoftware.#

Naleving en de evaluatie ervan Naleving is een serieus probleem voor klinische onderzoeken. Om dit fundamentele aspect van de studie te verbeteren, zullen de clinici een bruikbare techniek gebruiken.

Elke patiënt zal worden geïnstrueerd om op zijn smartphone een applicatie te downloaden die hem eraan zal herinneren om 's morgens en' s avonds Regenium in te nemen; ten tweede zal de clinicus de patiënten twee weken na T0 en twee en vijf weken na T1 bellen, met het voorwendsel om de volgende afspraak te herinneren en informatie te hebben over hun mondgezondheid, maar met de echte bedoeling om de regelmatige aanname van Regenium. Ten slotte moeten patiënten op T2 de blister terugbrengen, ook de lege, voor het tellen van de pillen.

Het is belangrijk om de patiënten niets te zeggen over het aantal pillen, om het risico op vertekening te voorkomen, veroorzaakt door patiënten die de dag voor de controle de resterende pil weggooien. Om de blister terug te krijgen, zullen clinici de patiënten vragen om de blister terug te sturen vanwege verspilling, zowel voor de verpakking als voor de pillen.

Referenties

JD Bashutski et al. De impact van vitamine D op de resultaten van parodontale chirurgie. Journal of Dental Research, vol 90, pp. 1007-12, 2011.

MR Chapple, et al. Aanvullende dagelijkse suppletie met ingekapselde fruit-, groente- en bessensappoederconcentraten en klinische parodontale resultaten: een dubbelblinde RCT. Journal of Klinische parodontologie, vol. 39, nee. 1, blz. 62-72, 2012.

M. N. Garcia, C. F. Hildebolt, D. D. Miley, D. A. Dixon, R. A. Couture, C. L. Spearie, E. M. Langenwalter, W. D. Shannon, E. Deych, C. Mueller en R. Civitelli, "Eenjarige effecten van vitamine D en calciumsuppletie op chronische Parodontitis,"Journal of Parodontologie, vol. 82, nee. 1, blz. 25-32, 2011.

F. Graziani, et al. Systemische ontsteking na niet-chirurgische en chirurgische parodontale therapie Journal of Clinical Parodontology, vol. 37, nee. 9, blz. 848-54, 2010.

A.Mallik et al. Evaluatie van Boswellia Serrata oleo-gomhars voor wondgenezing. Der Pharmacia Lettre, vol. 2, nee. 2, blz. 457-463, 2010.

ID Mandel en S. Wotman, De speekselafscheidingen bij gezondheid en ziekte. Oral Sciences Review, vol 8, pp. 25-47, 1976.

D. D. Miley, M. N. Garcia, C. F. Hildebolt, W. D. Shannon, R. A. Couture, C. L. Anderson Spearie, D. A. Dixon, E. M. Langenwalter, C. Mueller en R. Civitelli, "Cross-sectionele studie van vitamine D en calciumsuppletie-effecten op chronische parodontitis, "Journal of parodontologie, vol. 80, nee. 9, blz. 1433-9, 2009.

H. Moon et al., Antioxidanten, zoals co-enzym Q10, seleniet en curcumine, remden de osteoclastdifferentiatie door de vorming van reactieve zuurstofspecies te onderdrukken. Biochemische en biofysische onderzoekscommunicatie vol. 418, blz. 247-253, 2012.

C.A. Ramseier et al., Identificatie van pathogeen- en gastheerresponsmarkers gecorreleerd met parodontitis. Journal of Parodontologie vol 80, nee. 3, p. 436-46, 2009.

U. Van der Velden, D. Kuzmanova en ILC Chapple, "Micronutritional Approaches to Parodontal Therapy", Journal of Clinical Periodontology, vol. 38, blz. 142-158, 2011.