Effekt af chokbølgeterapi uden biologisk og immunhistokemisk analyse. (ESWT)
Mekanisk og fysiologisk effekt af ikke-korporal chokbølgeterapi uden biologisk stress-histologisk og immunhistokemisk analyse
Informativt sammendrag: Ekstrakorporal shockwave therapy (ESWT) er en ny metode til behandling af æstetiske lidelser inden for æstetisk medicin, dens virkningsmekanismer og fysiologiske virkninger lover at bekæmpe lokaliseret fedtophobning, forbedre hudens udseende, fremme neocolagenese og neovaskularisering. Der er i øjeblikket få undersøgelser af ESWT, der kan hævde denne fordel, men terapi har vist sig at være sikker og genererer ikke bivirkninger hos individer.
Formål: At evaluere de fysiologiske virkninger og mekanismer af ESWT, der virker på subkutant fedtvæv og tilstødende strukturer gennem en eksperimentel undersøgelse.
Metoder: Et randomiseret eksperimentelt klinisk studie vil blive udført i 30 kvinder med grad I, II og III overvægt, som deltog i den multidisciplinære præoperative forberedelsesgruppe til fedmekirurgi med tidligere planlagt operation. Deltagerne vil modtage ESWT-ansøgning inden for timer efter operationen, eller i ugerne før bariatrisk kirurgi, vil der under den kirurgiske procedure blive taget en lille prøve af subkutant fedtvæv til histologisk og immunhistokemisk analyse.
Hypoteser: Gennem histologisk og immunhistokemisk analyse af den subkutane fedtvævsprøve kan efterforskerne identificere, hvilken reel fysiologisk effekt og virkningsmekanisme ESWT har på subkutant fedtvæv, epidermis og tilstødende strukturer, og dermed bekræfte fordelene ved terapi.
Statistisk analyse: Der vil indledningsvis blive udført en beskrivende analyse af resultaterne opnået i den histologiske analyse med frekvenstabeller for kategoriske og deskriptive variable (middelværdi, standardafvigelse, median, minimum og maksimumværdier) for kontinuerte eller numeriske variable. For at sammenligne hovedvariablerne mellem grupper og sessionsnummer, vil variansanalysen (ANOVA) blive brugt til gentagne mål. Til sammenligning mellem grupper vil Tukey-testen blive brugt. Signifikansniveauet for de statistiske test vil være 5 % eller p <0,05.
Studieoversigt
Detaljeret beskrivelse
ESWT-procedurer Deltagerne modtog syv ESWT-terapisessioner to gange om ugen, den sidste session var omkring tyve minutter før den kirurgiske procedure for fedmekirurgi, terapien blev udført i et område på 150 cm² på venstre side af maveregionen, efter den hvide linje, ofte 15Hz, med 4.000.000 skud med 180 mJ energi og 15 mm rustfrit stålspids og 2.000.000 skud med 100 mJ energi med 15 mm plastikspids, til spidsslip blev der brugt en Thork ® Essential Cosmetics Industry Lotion 2515A-MED. / 2017- 95.
Til terapi blev THORK Shock Wave®-udstyret - IBRAMED- Industria Brasileira de Equipamentos Electromédicos EIRELI, godkendt af Anvisa nr. 10360310036, brugt.
Den direkte side af deltagernes mave blev brugt som kontrol og modtog ikke ESWT-terapi.
Kirurgisk procedure
Efter at have udført bedøvelsesproceduren i begyndelsen af den kirurgiske handling af fedmekirurgi, fjernede den ansvarlige kirurg to fragmenter af kutant væv med en gennemsnitlig størrelse på 4 cm i diameter, en prøve fra regionen tidligere afgrænset på venstre side af maven og den anden prøve på den kontralaterale side, hvor der ikke var nogen afgrænsning, betragtes som kontrol.
Histologisk procedure Efter opsamling blev materialet opbevaret i en beholder med 10% formaldehyd i 48 timer. Prøverne blev behandlet histoteknisk, indlejret i paraffin og derefter skåret med en roterende mikrotom i sektioner på 3-5 μm tykke.
Til morfologisk evaluering af det kutane væv og kollagenceller blev objektglassene farvet med Hematoxylin og Eosin (HE) og Masson's Trichrome (ab150686, Abcam, Cambridge, Storbritannien). Objektglassene blev evalueret ved lysmikroskopi med et binokulært mikroskop (Nikon YS 100, Japan) tilpasset med et WSCF 10X / 18 okular og Nikon 4X / 0.10, 10X / 0.25, 40X / 0.65 og 100X / 1 linser, 2.
For at differentiere typerne af kollagenfibre blev der anvendt Picrosirius Red-farvning (ab150681, Abcam). Efter farvning blev objektglassene analyseret under polariseret lys med et DMR-mikroskop (Leica), og fotografier blev taget ved 400 × forstørrelse, kollagenfibrene blev differentieret ved hjælp af deres farvning, og type I kollagenfibrene var gul-orange i farve. nogle tilfælde endda rød og type III med grøn farve, for at kvantificere analyserne blev ImageJ®-softwaren (NIH, Bethesda, USA) brugt.
Alle præparater blev lavet efter antistoffernes protokol og standardiseret af laboratoriet for patologisk analyse på Hospital de Clinicas da Unicamp.
Immunhistokemiske procedurer For at udføre immunhistokemiske reaktioner blev paraffinblokkene med hudprøverne skåret til en tykkelse på 3 μm og anbragt på signerede objektglas (3-aminopropyl-triethoxysilan, Sigma-Aldrich, USA). Positive og negative kontroller blev udført i alle reaktioner. Reaktionerne blev udført ifølge tidligere offentliggjorte protokoller
Kort fortalt blev vævene udsat for afvoksning, rehydrering og endogene peroxidaseblokerende processer. Antigenudvinding blev udført med en opløsning af ethylendiamintetraeddikesyre (EDTA), pH 9,0, i en elektrisk trykkoger i 15 minutter.
Til immunhistokemisk analyse blev følgende antistoffer, markører for fibroblast vækstfaktorer (FGF'er) og deres respektive receptorer brugt: FGF1 (Antibody sc-55520, Santa Cruz Biotechnology, USA), FGF2 (Antibody sc-365106, Santa Cruz Biotechnology), FGFR1 (Antibody sc-121, Santa Cruz Biotechnology), FGFR2 (Antibody sc-122, Santa Cruz Biotechnology) og til at evaluere celleproliferation blev markøren Ki67 (Antibody ab92742, Abcam) anvendt.
Antigen-antistof-reaktionen blev udviklet under anvendelse af det kromogene substrat (3,3 diaminobenzidin-DAB, Sigma-Aldrich). Derefter blev diasene scannet og digitalt analyseret også i henhold til tidligere protokoller
Undersøgelsestype
Tilmelding (Faktiske)
Fase
- Ikke anvendelig
Kontakter og lokationer
Studiesteder
-
-
SP
-
Campinas, SP, Brasilien, 13083-872
- UNICAMP
-
-
Deltagelseskriterier
Berettigelseskriterier
Aldre berettiget til at studere
Tager imod sunde frivillige
Køn, der er berettiget til at studere
Beskrivelse
Inklusionskriterier:
-
Undersøgelsen vil omfatte patienter:
- kvindeligt køn, over 18 år;
- Med fedme grad I, II og III;
- Patient med kirurgisk indikation for fedmekirurgi;
- Roux-en-Y kirurgisk indgreb af gastrisk bypass-type;
- Accepter at deltage og underskriv samtykkeformularen;
Ekskluderingskriterier:
- Mandligt køn;
- rygning;
- kognitive begrænsninger
- Bærere diabetes mellitus;
- Udført æstetisk behandling på underlivet i den sidste måned;
- Patienter med hudlæsioner såsom dermatitis og dermatose;
- Patienter med akut dyb venetrombose (DVT);
- Om eller nær kræftlæsioner;
- Patienter med pacemakere eller andre implanterede elektroniske enheder.
Studieplan
Hvordan er undersøgelsen tilrettelagt?
Design detaljer
- Primært formål: BASIC_SCIENCE
- Tildeling: NON_RANDOMIZED
- Interventionel model: SINGLE_GROUP
- Maskning: INGEN
Våben og indgreb
Deltagergruppe / Arm |
Intervention / Behandling |
|---|---|
|
ACTIVE_COMPARATOR: Behandlingsgruppe Thorck Shock Wave Ibramed (terapia ESWT)- fedtcelledød
Chokbølgebehandlingen blev udført på venstre side af maven
|
Deltagerne modtog behandlingsprotokollen etableret af producenten af Thork Shock Wave®-enheden, IBRAMED- Industria Brasileira de Equipamentos Electromédicos, Amparo, São Paulo godkendt af Anvisa nr. 10360310036.
(Figur 1).
Parametrene var 4.000.000 skud med energi på 180mJ og frekvens på 15Hz med 15mm rustfri stålspids og 2.000 skud med energi på 100mJ og frekvens på 15Hz med 15mm plastikspids, og til spidsglidningen blev der brugt Neutral Thork® Lotion, RMC .
Syv ESWT-sessioner blev afholdt, den gennemsnitlige tid for hver var syv minutter, to gange om ugen, og den syvende session blev afholdt minutter før den kirurgiske procedure for fedmekirurgi, terapi blev udført i et område på 150 cm² på venstre side af abdominalområdet efter midterlinjen.
Den højre side af deltagernes mave modtog ikke ESWT og blev betegnet som kontrol.
|
|
NO_INTERVENTION: Uden indblanding.
der blev ikke udført chokbølgebehandling på højre side af abdomen, som var angivet som kontrolgruppe. Der blev ikke udført chokbølgebehandling på højre side af abdomen, som var angivet som kontrolgruppe uden indgreb.
|
Hvad måler undersøgelsen?
Primære resultatmål
Resultatmål |
Foranstaltningsbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Immunhistokemiske procedurer
Tidsramme: en måned
|
Immunhistokemiske reaktioner blev udført på 3μm tykke sektioner, arrangeret på silaniserede objektglas. De anvendte antistoffer var: polyklonal anti-Caspase3, monoklonal anti-spaltet Caspase 3; monoklonal anti-CD68, monoklonal anti-hormonfølsom lipase - HSL - og Adipophilin. Efter klargøring af objektglassene blev de analyseret med et DMR-mikroskop (Leica), og fotografier blev taget ved 400x forstørrelse. For at kvantificere analyserne blev ImageJ®-softwaren (NIH, Bethesda, USA) brugt. Alle reaktioner blev udført efter producentens protokol, og alle blev standardiseret af det patologiske analyselaboratorium på Hospital de Clínicas da Unicamp. Kvantificeringen af immunfarvning blev udført under hensyntagen til antallet af positive celler og intensitet, med slutresultater fra 0-300 |
en måned
|
Samarbejdspartnere og efterforskere
Efterforskere
- Ledende efterforsker: Debora Modena, Dr, University of Campinas, Brazil
Datoer for undersøgelser
Studer store datoer
Studiestart (FAKTISKE)
Primær færdiggørelse (FAKTISKE)
Studieafslutning (FAKTISKE)
Datoer for studieregistrering
Først indsendt
Først indsendt, der opfyldte QC-kriterier
Først opslået (FAKTISKE)
Opdateringer af undersøgelsesjournaler
Sidste opdatering sendt (FAKTISKE)
Sidste opdatering indsendt, der opfyldte kvalitetskontrolkriterier
Sidst verificeret
Mere information
Begreber relateret til denne undersøgelse
Nøgleord
Yderligere relevante MeSH-vilkår
Andre undersøgelses-id-numre
- shock wave
Lægemiddel- og udstyrsoplysninger, undersøgelsesdokumenter
Studerer et amerikansk FDA-reguleret lægemiddelprodukt
Studerer et amerikansk FDA-reguleret enhedsprodukt
Disse oplysninger blev hentet direkte fra webstedet clinicaltrials.gov uden ændringer. Hvis du har nogen anmodninger om at ændre, fjerne eller opdatere dine undersøgelsesoplysninger, bedes du kontakte register@clinicaltrials.gov. Så snart en ændring er implementeret på clinicaltrials.gov, vil denne også blive opdateret automatisk på vores hjemmeside .