Sikkerhed og antiviral aktivitet af et monoklonalt hepatitis B-antistof (SAMBA-undersøgelsen) (SAMBA)

Sammen med persistens af virale antigener bidrager nedsat HBV-specifik immunitet til kronisk infektion. Kronisk HBV (CHB) er karakteriseret ved udtømning eller funktionel svækkelse af HBV-specifikke T-celler, hvilket resulterer i defekt proliferation og cytokinproduktion, samt nedsat produktion af antistoffer mod HBsAg, med en udvidelse af atypiske hukommelses-B-celler. Betydningen af ​​værtsimmunitet for HBV-clearance er velkendt, men de kritiske immunologiske hændelser, der kræves for at opnå funktionel helbredelse, er ikke fuldt ud forstået. Vedvarende høje HBsAg-niveauer sammen med dysfunktionel immunitet har rejst muligheden for, at HBsAg i sig selv er immunregulerende ved HBV-infektion. Kronisk eksponering for høje niveauer af HBsAg kan gøre HBV-specifikke T-celler overdrevent aktiverede og funktionelt tolererede. Reduktion af serum HBsAg kunne således være en værdifuld terapeutisk strategi på grund af dets potentiale til at lindre funktionel udmattelse og give immunkontrol.

Parallelt hermed er antistoffer mod HBsAg forbundet med vellykket vaccination og genopretning fra akut infektion. Faktisk er en forskel mellem kronisk inficerede og naturligt restituerede individer en robust polyklonal B-cellerespons på HBsAg. Hvorvidt disse associationer afspejler en ætiologisk rolle for anti-HBV-neutraliserende antistoffer vides ikke. Imidlertid er udtømning af antistofproducerende B-lymfocytter hos CHB-patienter ved rituximab forbundet med HBV-reaktivering, hvilket indikerer, at B-celler eller deres antistofprodukter spiller en væsentlig rolle i at kontrollere infektionen. Den eneste immunmodulerende terapi, der i øjeblikket er tilgængelig til behandling af CHB, IFN-α, er effektiv hos kun 30 % af mennesker, med markante forskelle observeret på tværs af HBV-genotyper, der er mest effektive mod HBV-genotype A- og B-infektioner. Nye terapeutiske strategier, der interfererer med viral persistens og der er behov for løbende immunforstyrrelser med det mål at opnå en funktionel kur. Adskillige strategier er i klinisk udvikling, herunder antivirale (f.eks. lille interfererende RNA) (siRNA) og nukleinsyrepolymerer (NAP'er) og immungenopretningstilgange (f.eks. terapeutisk vaccination, afgiftslignende receptoragonister, checkpoint-blokadehæmmere og passiv immunterapi med anti-HBs-antistoffer).

Antistoffer er blandt de vigtigste modulatorer af immunitet og er unikt attraktive farmaceutiske midler på grund af deres dobbelte funktionalitet. Ud over at målrette en specifik epitop med deres variable domæner adskiller antistoffer sig fra direkte antivirale midler ved, at de kan rekruttere immuneffektorfunktioner gennem deres Fc-domæner. Ud over at accelerere clearance af vira og inficerede celler gennem fagocytose eller direkte cellulær cytotoksicitet, er antigen-antistof-immunkomplekser også potente immunogener, der kan fremme udvikling af værtsimmunresponser. For eksempel eliminerer antistofbaserede cancerterapier maligne celler og inducerer adaptiv T-celleimmunitet og har dramatisk øget antallet af individer, der kontrollerer og overlever maligne sygdomme. Hvorvidt de samme koncepter er anvendelige til håndtering af kroniske virusinfektioner er et område med aktiv undersøgelse, især inden for HIV-1-området.

I CHB har antistoffer potentialet til at øge clearance af HBsAg. Selvom undersøgelser i transgene dyr indikerer, at T-celletolerance over for HBsAg er holdbar og svær at vende, afspejler modellerne ikke helt human infektion.

Hvorvidt antistofterapi kan genoprette nogle aspekter af HBV-specifik T-celleimmunitet hos mennesker er ikke blevet bestemt. Immunterapi med HBsAg-specifikke antistoffer har vist nogle direkte HBsAg-suppressionseffekter i kliniske undersøgelser. HBsAg-antistofferne, der blev evalueret, førte dog kun til kortvarigt fald i HBsAg-niveauer hos CHB-patienter, som var meget lig virkningerne af behandlinger baseret på hepatitis B-immunglobulin (HBIG). Mere potente antistoffer med langvarig effekt på cirkulerende HBsAg og potentiale til at modulere og genoprette HBV-specifikke immunresponser er nødvendige for at evaluere immunterapiens rolle i CHB-behandling og remission.

Denne undersøgelse har til formål at evaluere sikkerheden, den maksimalt tolererede dosis, farmakokinetik (PK) og antivirale virkninger af et yderst potent neutraliserende humant monoklonalt antistof (mAb), HepB mAb19, der er målrettet mod HBV S-protein hos individer med CHB. Sikkerheds-, farmakokinetiske og virologiske data genereret af denne undersøgelse vil guide valget af et doseringsregime til efterfølgende multidosisundersøgelser hos individer med CHB, i kombination med standard HBV antiviral terapi og/eller andre undersøgelsesprodukter, herunder andre anti-HBs mAbs.

HepB mAb19 er et humant mAb af immunoglobulin G (IgG) 1kappa-isotype, der specifikt binder til "a"-determinanten af ​​den ekstracellulære løkke af HBV-overfladeantigenet (HBsAg). HepB mAb-19 blev isoleret og klonet fra et HBsAg-vaccineret individ ved Rockefeller University. Det naturligt forekommende antistof blev modificeret af to en-aminosyre substitutioner. Disse substitutioner øger antistofbindingsaffiniteten til den neonatale Fc-receptor, forlænger dens halveringstid in vivo, men interfererer ikke med antigenbinding eller med affinitet til Fc-gamma-receptorer.

For at vurdere effektiviteten af ​​anti-HBV-antistoffer in vivo brugte forskere humane leverkimære FNRG-mus, som kan opretholde HBV-infektion. De testede to antistoffer, HepB mAb20 og HepB mAb07, som præ-eksponeringsprofylakse. Begge antistoffer forhindrede med succes HBV-infektion i disse mus, mens alle kontrolmus blev inficerede. Hos mus med etablerede HBV-infektioner stabiliserede HepB mAb20, HepB mAb07 og HepB mAb19 viræmi, men eliminerede den ikke helt. Over tid udviklede nogle mus behandlet med mAb20 og mAb07 en stigning i viræmi, som tilskrives fremkomsten af ​​G145R-udslipsmutationen. Især førte HepB mAb19 ikke til sådanne flugtmutationer, hvilket tyder på højere resistens.

Yderligere blev kombinationsterapier rettet mod forskellige virale epitoper evalueret. Mens en HepB mAb06 + HepB mAb07-kombination viste delvis resistens mod undslippemutationer, tillod den stadig fremkomsten af ​​mutationer. I modsætning hertil kontrollerede kombinationer såsom HepB mAb17 + HepB mAb19 og en tredobbelt terapi (HepB mAb16, HepB mAb17, HepB mAb19) med succes viræmi og forhindrede undslippemutationer. Disse resultater indikerer, at monoterapi kan føre til undslippende mutationer, mens velvalgte antistofkombinationer kan forbedre viral kontrol, hvilket potentielt kan øge immunresponset under antiviral terapi

En GLP-kompatibel undersøgelse af HepB mAb19 testede krydsreaktivitet i normalt menneske- og rottevæv, hvilket afslørede begrænset cytoplasmatisk binding i specifikke celler, hovedsageligt i acinære epitelceller i menneskelige spytkirtler og forskellige rottevæv. Da bindingen var cytoplasmatisk, er det usandsynligt, at den har toksikologisk betydning. En 25-dages toksikologisk undersøgelse i rotter (doser 0, 4, 15 eller 60 mg/kg IV) viste ingen bivirkninger eller signifikante ændringer i kliniske parametre eller laboratorieparametre, hvilket etablerede niveauet for ingen observeret uønsket virkning (NOAEL) ved 60 mg/kg. HepB mAb19 viste dosis-proportional peak-koncentration og stabil halveringstid på 13-16 dage, med en 4-fold eksponeringsforøgelse ved gentagen dosering.

Vores hypotese er, at intravenøs administration af HepB mAb19 under suppressiv nucleos(t)ide-terapi vil være sikker og veltolereret, vil føre til nedsatte niveauer af cirkulerende HBsAg og øge værtens medfødte og adaptive immunresponser på HBV.

Undersøgelsen har to dele:

Del A: I del A indgives en enkelt dosis HepB mAb19 eller placebo ved randomisering i tre forskellige dosisgrupper. Gradvist højere doser af HepB mAb19 vil blive brugt, hvilket betyder, at deltagere i gruppe 1 vil modtage en lav dosis (3 mg/kg), som vil blive vurderet for sikkerhed, før en enkelt dosis på 10 mg/kg og 30 mg/kg testes efter samme princip. Deltagerne i hver gruppe 1-3 vil blive randomiseret i forholdet 3:1 til at modtage enten HepB mAb19 eller placebo (normalt saltvand).

Del B: Baseret på del A vil den maksimalt tolererede dosis (MTD) af HepB mAb19 blive fastsat. Denne dosis vil efterfølgende blive brugt i del B, hvor en fjerde gruppe på 18 individer vil modtage HepB mAb19 uden randomisering.

Deltagerne vil gennemgå sikkerhedsvurderinger 1, 3 og 7 dage efter administrationen af ​​forsøgsantistoffet eller placebo-infusionen, derefter ugentligt til uge 4 og til sidst i uge 8, 12, 24, 36 og 48.

Blodprøver vil blive indsamlet under studiebesøg. Disse blodprøver vil blive brugt til analyser af sikkerhed, hvordan HepB mAb19 absorberes i kroppen, virkningerne af HepB mAb19 på HBV og immunsystemets respons på det. Blodprøver vil blive indsamlet på dag 0 før administration af HepB mAb19, ved afslutningen af ​​antistof- eller placebo-infusionen, efter 1, 3 og 7 dage og under efterfølgende opfølgningsbesøg.