Bezpečnost a antivirová aktivita protilátky proti monoklonální hepatitidě B (studie SAMBA) (SAMBA)

Spolu s perzistencí virových antigenů přispívá k chronicitě infekce narušená HBV-specifická imunita. Chronická HBV (CHB) je charakterizována deplecí nebo funkčním poškozením HBV-specifických T-buněk, což má za následek defektní proliferaci a produkci cytokinů, jakož i zhoršenou produkci protilátek proti HBsAg s expanzí atypických paměťových B-buněk. Důležitost hostitelské imunity pro odstranění HBV je dobře známa, ale kritické imunologické události potřebné k dosažení funkčního vyléčení nejsou plně pochopeny. Přetrvávající vysoké hladiny HBsAg spolu s dysfunkční imunitou zvýšily možnost, že samotný HBsAg je při infekci HBV imunoregulační. Chronická expozice vysokým hladinám HBsAg může způsobit, že T buňky specifické pro HBV budou nadměrně aktivovány a funkčně tolerovány. Snížení sérového HBsAg by tedy mohlo být cennou terapeutickou strategií, vzhledem k jeho potenciálu zmírnit funkční vyčerpání a poskytnout imunitní kontrolu.

Paralelně jsou protilátky proti HBsAg spojovány s úspěšnou vakcinací a zotavením z akutní infekce. Rozdíl mezi chronicky infikovanými a přirozeně zotavenými jedinci je skutečně silná polyklonální odpověď B buněk na HBsAg. Není známo, zda tyto asociace odrážejí etiologickou roli anti-HBV neutralizačních protilátek. Deplece B lymfocytů produkujících protilátky u pacientů s CHB rituximabem je však spojena s reaktivací HBV, což naznačuje, že B buňky nebo jejich protilátkové produkty hrají významnou roli při kontrole infekce. Jediná imunomodulační terapie, která je v současnosti k léčbě CHB k dispozici, IFN-α, je účinná pouze u 30 % lidí, přičemž výrazné rozdíly mezi genotypy HBV jsou nejúčinnější proti infekcím HBV genotypu A a B. Nové terapeutické strategie, které interferují s virovou perzistencí a je nutná pokračující imunitní dysregulace s cílem dosáhnout funkčního vyléčení. V klinickém vývoji je několik strategií, včetně antivirových (např. malá interferující RNA) (siRNA) a polymerů nukleových kyselin (NAP) a přístupů k obnově imunity (např. terapeutické očkování, agonisté toll-like receptorů, inhibitory blokády kontrolních bodů a pasivní imunoterapie anti-HBs protilátkami).

Protilátky patří mezi klíčové modulátory imunity a jsou jedinečně atraktivními farmaceutickými činidly díky své dvojí funkčnosti. Kromě cílení na specifický epitop svými variabilními doménami se protilátky liší od přímých antivirotik tím, že mohou získávat imunitní efektorové funkce prostřednictvím svých Fc domén. Kromě urychlení odstraňování virů a infikovaných buněk prostřednictvím fagocytózy nebo přímé buněčné cytotoxicity jsou imunitní komplexy antigen-protilátka také silnými imunogeny, které mohou podporovat rozvoj imunitních reakcí hostitele. Například terapie rakoviny založené na protilátkách eliminují maligní buňky a indukují adaptivní T buněčnou imunitu a dramaticky zvýšily počet jedinců, kteří kontrolují a přežívají maligní onemocnění. Zda jsou stejné koncepty použitelné pro léčbu chronických virových infekcí, je oblastí aktivního zkoumání, zejména v oblasti HIV-1.

U CHB mají protilátky potenciál zvyšovat clearance HBsAg. Ačkoli studie na transgenních zvířatech naznačují, že T buněčná tolerance vůči HBsAg je trvalá a je obtížné ji zvrátit, modely zcela neodrážejí lidskou infekci.

Zda protilátková terapie může obnovit některé aspekty HBV-specifické T buněčné imunity u lidí, nebylo stanoveno. Imunoterapie s HBsAg-specifickými protilátkami prokázala v klinických studiích určité přímé supresivní účinky HBsAg. HBsAg protilátky, které byly hodnoceny, však vedly pouze ke krátkodobému poklesu hladin HBsAg u pacientů s CHB, což bylo velmi podobné účinkům léčby založené na imunoglobulinu proti hepatitidě B (HBIG). K vyhodnocení úlohy imunoterapie v léčbě a remisi CHB jsou zapotřebí silnější protilátky s dlouhodobými účinky na cirkulující HBsAg a potenciálem modulovat a obnovit HBV-specifické imunitní odpovědi.

Tato studie si klade za cíl vyhodnotit bezpečnost, maximální tolerovanou dávku, farmakokinetiku (PK) a antivirové účinky vysoce účinné neutralizující lidské monoklonální protilátky (mAb), HepB mAb19, která cílí na S-protein HBV u jedinců s CHB. Bezpečnostní, PK a virologická data získaná touto studií budou vodítkem pro výběr dávkovacího režimu pro následné vícedávkové studie u jedinců s CHB, v kombinaci se standardní antivirovou terapií HBV a/nebo jinými hodnocenými produkty, včetně jiných anti-HBs mAb.

HepB mAb19 je lidská mAb 1kappa izotypu imunoglobulinu G (IgG), která se specificky váže na "a" determinantu extracelulární smyčky povrchového antigenu HBV (HBsAg). HepB mAb-19 byla izolována a klonována z HBsAg očkovaného jedince na Rockefellerově univerzitě. Přirozeně se vyskytující protilátka byla modifikována dvěma jednoaminokyselinovými substitucemi. Tyto substituce zvyšují vazebnou afinitu protilátky k neonatálnímu Fc receptoru, prodlužují jeho poločas in vivo, ale neinterferují s vazbou antigenu nebo s afinitou k Fc gama receptorům.

K posouzení účinnosti anti-HBV protilátek in vivo použili vědci lidské jaterní chimérické FNRG myši, které mohou vydržet infekci HBV. Testovali dvě protilátky, HepB mAb20 a HepB mAb07, jako preexpoziční profylaxi. Obě protilátky úspěšně zabránily infekci HBV u těchto myší, zatímco všechny kontrolní myši se infikovaly. U myší s prokázanou infekcí HBV stabilizovaly HepB mAb20, HepB mAb07 a HepB mAb19 virémii, ale neeliminovaly ji úplně. V průběhu času se u některých myší léčených mAb20 a mAb07 vyvinul nárůst virémie, přisuzovaný vzniku únikové mutace G145R. Je pozoruhodné, že HepB mAb19 nevedla k takovým únikovým mutacím, což naznačuje vyšší rezistenci.

Dále byly hodnoceny kombinované terapie zaměřené na různé virové epitopy. Zatímco kombinace HepB mAb06 + HepB mAb07 vykazovala částečnou rezistenci vůči únikovým mutacím, stále umožňovala vznik mutací. Na rozdíl od toho kombinace jako HepB mAb17 + HepB mAb19 a trojitá terapie (HepB mAb16, HepB mAb17, HepB mAb19) úspěšně kontrolovaly virémii a zabránily únikovým mutacím. Tato zjištění naznačují, že monoterapie může vést k únikovým mutacím, zatímco dobře zvolené kombinace protilátek mohou zlepšit kontrolu virů a potenciálně zvýšit imunitní odpověď během antivirové terapie.

Studie HepB mAb19 vyhovující GLP testovala zkříženou reaktivitu v normálních lidských a potkaních tkáních a odhalila omezenou cytoplazmatickou vazbu ve specifických buňkách, hlavně v acinárních epiteliálních buňkách v lidských slinných žlázách a různých potkaních tkáních. Vzhledem k tomu, že vazba byla cytoplazmatická, je nepravděpodobné, že by měla toxikologický význam. 25denní toxikologická studie na potkanech (dávky 0, 4, 15 nebo 60 mg/kg IV) neprokázala žádné nepříznivé účinky nebo významné změny v klinických nebo laboratorních parametrech, což stanovilo hladinu bez pozorovaného nepříznivého účinku (NOAEL) v dávce 60 mg/kg. HepB mAb19 vykazovala maximální koncentraci úměrnou dávce a stabilní poločas 13-16 dnů, se 4násobným zvýšením expozice po opakovaném dávkování.

Naší hypotézou je, že intravenózní podávání HepB mAb19 během supresivní nukleosidové terapie bude bezpečné a dobře tolerované, povede ke snížení hladin cirkulujícího HBsAg a zesílí vrozené a adaptivní imunitní odpovědi hostitele na HBV.

Studie má dvě části:

Část A: V části A je podána jedna dávka HepB mAb19 nebo placeba randomizací do tří různých dávkových skupin. Postupně se budou používat vyšší dávky HepB mAb19, což znamená, že účastníci ve skupině 1 dostanou nízkou dávku (3 mg/kg), u které bude posouzena bezpečnost před testováním jedné dávky 10 mg/kg a 30 mg/kg. na stejném principu. Účastníci v každé skupině 1-3 budou randomizováni v poměru 3:1, aby dostali buď HepB mAb19 nebo placebo (normální fyziologický roztok).

Část B: Na základě části A bude stanovena maximální tolerovaná dávka (MTD) HepB mAb19. Tato dávka bude následně použita v části B, kde čtvrtá skupina 18 jedinců dostane HepB mAb19 bez randomizace.

Účastníci podstoupí hodnocení bezpečnosti 1, 3 a 7 dní po podání zkušební protilátky nebo infuze placeba, poté každý týden až do týdne 4 a nakonec v týdnech 8, 12, 24, 36 a 48.

Vzorky krve budou odebírány během studijních návštěv. Tyto vzorky krve budou použity k analýze bezpečnosti, způsobu vstřebávání HepB mAb19 v těle, účinků HepB mAb19 na HBV a reakce imunitního systému na něj. Vzorky krve budou odebírány v den 0 před podáním HepB mAb19, na konci infuze protilátky nebo placeba, po 1, 3 a 7 dnech a během následujících následných návštěv.