Bezpieczeństwo i aktywność przeciwwirusowa przeciwciała monoklonalnego przeciwko wirusowemu zapaleniu wątroby typu B (badanie SAMBA) (SAMBA)

Wraz z utrzymywaniem się antygenów wirusowych, upośledzona odporność swoista na HBV przyczynia się do przewlekłości zakażenia. Przewlekły HBV (CHB) charakteryzuje się wyczerpaniem lub upośledzeniem czynnościowym limfocytów T swoistych dla HBV, co skutkuje wadliwą proliferacją i wytwarzaniem cytokin, a także upośledzoną produkcją przeciwciał przeciwko HBsAg, z ekspansją atypowych komórek B pamięci. Znaczenie odporności gospodarza dla eliminacji HBV jest dobrze znane, ale krytyczne zdarzenia immunologiczne wymagane do osiągnięcia wyleczenia funkcjonalnego nie są w pełni poznane. Utrzymujące się wysokie poziomy HBsAg w połączeniu z dysfunkcyjną odpornością zwiększyły możliwość, że sam HBsAg ma działanie immunoregulacyjne w zakażeniu HBV. Przewlekła ekspozycja na wysokie poziomy HBsAg może spowodować nadmierną aktywację i funkcjonalną tolerancję limfocytów T specyficznych dla HBV. Zatem zmniejszenie poziomu HBsAg w surowicy może być cenną strategią terapeutyczną ze względu na jej potencjał łagodzenia wyczerpania funkcjonalnego i zapewniania kontroli immunologicznej.

Jednocześnie przeciwciała przeciwko HBsAg są powiązane ze skutecznym szczepieniem i wyzdrowieniem po ostrej infekcji. Rzeczywiście, różnica między osobami przewlekle zakażonymi a osobami wyleczonymi w sposób naturalny polega na silnej odpowiedzi poliklonalnych komórek B na HBsAg. Nie wiadomo, czy powiązania te odzwierciedlają etiologiczną rolę przeciwciał neutralizujących anty-HBV. Jednakże zmniejszenie liczby limfocytów B wytwarzających przeciwciała u pacjentów z CHB przez rytuksymab jest związane z reaktywacją HBV, co wskazuje, że komórki B lub produkty ich przeciwciał odgrywają znaczącą rolę w kontrolowaniu zakażenia. Jedyna dostępna obecnie terapia immunomodulacyjna w leczeniu CHB, IFN-α, jest skuteczna tylko u 30% osób, przy czym zaobserwowane wyraźne różnice między genotypami HBV są najskuteczniejsze w leczeniu zakażeń HBV genotypów A i B. Nowe strategie terapeutyczne, które zakłócają trwałość wirusa i konieczne jest ciągłe rozregulowanie układu odpornościowego w celu osiągnięcia wyleczenia funkcjonalnego. W fazie rozwoju klinicznego znajduje się kilka strategii, w tym leki przeciwwirusowe (np. małe interferujące RNA) (siRNA) i polimery kwasów nukleinowych (NAP) oraz podejścia do przywracania odporności (np. szczepienia lecznicze, agoniści receptorów Toll-podobnych, inhibitory blokady punktów kontrolnych i immunoterapia bierna przeciwciałami anty-HBs).

Przeciwciała należą do kluczowych modulatorów odporności i są wyjątkowo atrakcyjnymi środkami farmaceutycznymi ze względu na ich podwójną funkcjonalność. Oprócz tego, że celują w specyficzny epitop za pomocą domen zmiennych, przeciwciała różnią się od bezpośrednich leków przeciwwirusowych tym, że mogą rekrutować funkcje efektorowe układu odpornościowego poprzez swoje domeny Fc. Oprócz przyspieszania usuwania wirusów i zakażonych komórek poprzez fagocytozę lub bezpośrednią cytotoksyczność komórkową, kompleksy immunologiczne antygen-przeciwciało są również silnymi immunogenami, które mogą sprzyjać rozwojowi odpowiedzi immunologicznych gospodarza. Na przykład terapie przeciwnowotworowe oparte na przeciwciałach eliminują komórki złośliwe i indukują nabytą odporność limfocytów T, co radykalnie zwiększyło liczbę osób, które kontrolują choroby złośliwe i przeżywają je. To, czy te same koncepcje mają zastosowanie w leczeniu przewlekłych infekcji wirusowych, jest przedmiotem aktywnych badań, szczególnie w dziedzinie HIV-1.

W CHB przeciwciała mogą zwiększać klirens HBsAg. Chociaż badania na zwierzętach transgenicznych wskazują, że tolerancja komórek T na HBsAg jest trwała i trudna do odwrócenia, modele nie odzwierciedlają w pełni infekcji u ludzi.

Nie ustalono, czy terapia przeciwciałami może przywrócić u ludzi niektóre aspekty odporności limfocytów T swoistych wobec wirusa HBV. W badaniach klinicznych immunoterapia przeciwciałami swoistymi dla HBsAg wykazała pewne bezpośrednie działanie hamujące HBsAg. Jednakże oceniane przeciwciała HBsAg prowadziły jedynie do krótkotrwałego spadku poziomu HBsAg u pacjentów z CHB, co było bardzo podobne do skutków leczenia opartego na immunoglobulinie przeciw wirusowi zapalenia wątroby typu B (HBIG). Aby ocenić rolę immunoterapii w leczeniu CHB i remisji, potrzebne są silniejsze przeciwciała o długotrwałym działaniu na krążący HBsAg i mogące modulować i przywracać odpowiedź immunologiczną specyficzną dla HBV.

Celem tego badania jest ocena bezpieczeństwa, maksymalnej tolerowanej dawki, farmakokinetyki (PK) i działania przeciwwirusowego bardzo silnego neutralizującego ludzkiego przeciwciała monoklonalnego (mAb), mAb19 przeciwko HepB, które jest skierowane przeciwko białku S HBV u osób z CHB. Dane dotyczące bezpieczeństwa, farmakokinetyki i wirusologii uzyskane w wyniku tego badania będą podstawą wyboru schematu dawkowania do kolejnych badań z podaniem wielu dawek u osób z CHB, w skojarzeniu ze standardową terapią przeciwwirusową HBV i/lub innymi badanymi produktami, w tym innymi mAb anty-HBs.

mAb19 HepB jest ludzkim mAb immunoglobuliny G (IgG) o izotypie 1kappa, które specyficznie wiąże się z determinantą „a” pętli zewnątrzkomórkowej antygenu powierzchniowego HBV (HBsAg). mAb-19 HepB wyizolowano i sklonowano od osoby zaszczepionej HBsAg na Uniwersytecie Rockefellera. Naturalnie występujące przeciwciało zostało zmodyfikowane przez dwie substytucje jednego aminokwasu. Substytucje te zwiększają powinowactwo wiązania przeciwciała z noworodkowym receptorem Fc, wydłużając jego okres półtrwania in vivo, ale nie zakłócają wiązania antygenu ani powinowactwa do receptorów Fc gamma.

Aby ocenić skuteczność przeciwciał anty-HBV in vivo, badacze wykorzystali chimeryczne myszy FNRG z ludzką wątrobą, które mogą wytrzymać zakażenie HBV. Przetestowali dwa przeciwciała, mAb20 HepB i mAb07 HepB, jako profilaktykę przedekspozycyjną. Obydwa przeciwciała skutecznie zapobiegały zakażeniu HBV u tych myszy, podczas gdy wszystkie myszy kontrolne uległy zakażeniu. U myszy z ustalonym zakażeniem HBV, mAb20 HepB, mAb07 i mAb19 HepB stabilizowały wiremię, ale nie eliminowały jej całkowicie. Z biegiem czasu u niektórych myszy leczonych mAb20 i mAb07 rozwinął się wzrost wiremii, co przypisuje się pojawieniu się mutacji ucieczki G145R. Warto zauważyć, że mAb19 HepB nie doprowadziło do takich mutacji ucieczki, co sugeruje wyższą oporność.

Ponadto oceniano terapie skojarzone ukierunkowane na różne epitopy wirusowe. Chociaż kombinacja mAb06 HepB + mAb07 HepB wykazywała częściową oporność na mutacje ucieczki, nadal umożliwiała pojawienie się mutacji. W przeciwieństwie do tego, kombinacje takie jak mAb17 HepB + mAb19 HepB i terapia potrójna (mAb16 HepB, mAb17 HepB, mAb19 HepB) skutecznie kontrolowały wiremię i zapobiegały mutacjom ucieczki. Odkrycia te wskazują, że monoterapia może prowadzić do mutacji ucieczki, podczas gdy dobrze dobrane kombinacje przeciwciał mogą poprawić kontrolę wirusa, potencjalnie wzmacniając odpowiedź immunologiczną podczas terapii przeciwwirusowej

W zgodnym z GLP badaniu mAb19 HepB sprawdzano reaktywność krzyżową w normalnych tkankach człowieka i szczura, ujawniając ograniczone wiązanie cytoplazmatyczne w określonych komórkach, głównie w komórkach nabłonka groniastego w ludzkich gruczołach ślinowych i różnych tkankach szczurów. Ponieważ wiązanie było cytoplazmatyczne, jest mało prawdopodobne, aby miało ono znaczenie toksykologiczne. 25-dniowe badanie toksykologiczne na szczurach (dawki 0, 4, 15 lub 60 mg/kg dożylnie) nie wykazało żadnych działań niepożądanych ani znaczących zmian w parametrach klinicznych lub laboratoryjnych, ustalając poziom, przy którym nie obserwuje się szkodliwych skutków (NOAEL). przy 60 mg/kg. Maksymalne stężenie mAb19 HepB było proporcjonalne do dawki i stabilny okres półtrwania wynoszący 13–16 dni, przy 4-krotnym wzroście ekspozycji po wielokrotnym dawkowaniu.

Nasza hipoteza jest taka, że ​​dożylne podawanie mAb19 HepB podczas supresyjnej terapii nukleozydami będzie bezpieczne i dobrze tolerowane, doprowadzi do obniżenia poziomu krążącego HBsAg i wzmocni wrodzoną i adaptacyjną odpowiedź immunologiczną gospodarza na HBV.

Badanie składa się z dwóch części:

Część A: W części A pojedynczą dawkę mAb19 HepB lub placebo podaje się w drodze randomizacji do trzech różnych grup dawek. Stopniowo będą stosowane wyższe dawki mAb19 HepB, co oznacza, że ​​uczestnicy grupy 1 otrzymają niską dawkę (3 mg/kg), która zostanie oceniona pod kątem bezpieczeństwa przed przetestowaniem pojedynczej dawki 10 mg/kg i 30 mg/kg na tej samej zasadzie. Uczestnicy w każdej grupie 1-3 zostaną losowo przydzieleni w stosunku 3:1 do grupy otrzymującej mAb19 HepB lub placebo (sól fizjologiczna).

Część B: Na podstawie części A zostanie ustalona maksymalna tolerowana dawka (MTD) mAb19 HepB. Dawka ta zostanie następnie wykorzystana w części B, gdzie czwarta grupa 18 osób otrzyma mAb19 HepB bez randomizacji.

Uczestnicy zostaną poddani ocenie bezpieczeństwa 1, 3 i 7 dni po podaniu przeciwciała próbnego lub wlewu placebo, następnie co tydzień do 4 tygodnia i na koniec w 8, 12, 24, 36 i 48 tygodniu.

Próbki krwi będą pobierane podczas wizyt studyjnych. Te próbki krwi zostaną wykorzystane do analiz bezpieczeństwa, sposobu wchłaniania mAb19 HepB w organizmie, wpływu mAb19 HepB na HBV i reakcji układu odpornościowego na to zakażenie. Próbki krwi będą pobierane w dniu 0 przed podaniem mAb19 HepB, na koniec wlewu przeciwciała lub placebo, po 1, 3 i 7 dniach oraz podczas kolejnych wizyt kontrolnych.