Sicherheit und antivirale Aktivität eines monoklonalen Hepatitis-B-Antikörpers (die SAMBA-Studie) (SAMBA)

Neben der Persistenz viraler Antigene trägt eine beeinträchtigte HBV-spezifische Immunität zur Chronizität der Infektion bei. Chronisches HBV (CHB) ist durch eine Erschöpfung oder Funktionsbeeinträchtigung HBV-spezifischer T-Zellen gekennzeichnet, was zu einer fehlerhaften Proliferation und Zytokinproduktion sowie einer beeinträchtigten Produktion von Antikörpern gegen HBsAg mit einer Ausbreitung atypischer Gedächtnis-B-Zellen führt. Die Bedeutung der Wirtsimmunität für die HBV-Clearance ist allgemein anerkannt, die entscheidenden immunologischen Ereignisse, die für eine funktionelle Heilung erforderlich sind, sind jedoch nicht vollständig verstanden. Anhaltend hohe HBsAg-Spiegel zusammen mit einer gestörten Immunität haben die Möglichkeit erhöht, dass HBsAg selbst bei einer HBV-Infektion immunregulatorisch ist. Eine chronische Exposition gegenüber hohen HBsAg-Spiegeln kann dazu führen, dass HBV-spezifische T-Zellen übermäßig aktiviert und funktionell toleriert werden. Daher könnte die Senkung des Serum-HBsAg eine wertvolle therapeutische Strategie sein, da es das Potenzial hat, funktionelle Erschöpfung zu lindern und die Immunkontrolle zu verleihen.

Parallel dazu sind Antikörper gegen HBsAg mit einer erfolgreichen Impfung und der Genesung nach einer akuten Infektion verbunden. Tatsächlich besteht ein Unterschied zwischen chronisch infizierten und natürlich genesenen Personen in einer robusten polyklonalen B-Zell-Reaktion auf HBsAg. Ob diese Zusammenhänge eine ätiologische Rolle für neutralisierende Anti-HBV-Antikörper widerspiegeln, ist nicht bekannt. Allerdings ist die Depletion der antikörperproduzierenden B-Lymphozyten bei CHB-Patienten durch Rituximab mit einer HBV-Reaktivierung verbunden, was darauf hindeutet, dass B-Zellen oder ihre Antikörperprodukte eine wichtige Rolle bei der Kontrolle der Infektion spielen. Die einzige derzeit verfügbare immunmodulatorische Therapie zur Behandlung von CHB, IFN-α, ist nur bei 30 % der Menschen wirksam, wobei deutliche Unterschiede zwischen den HBV-Genotypen beobachtet wurden und am wirksamsten gegen HBV-Genotyp-A- und B-Infektionen sind. Neue Therapiestrategien, die die Viruspersistenz beeinträchtigen und Eine anhaltende Immundysregulation mit dem Ziel einer funktionellen Heilung ist erforderlich. Mehrere Strategien befinden sich in der klinischen Entwicklung, darunter antivirale (z. B. small interfering RNA) (siRNA) und Nukleinsäurepolymere (NAPs) sowie Ansätze zur Immunwiederherstellung (z. B. therapeutische Impfung, Toll-like-Rezeptor-Agonisten, Checkpoint-Blockade-Inhibitoren und passive Immuntherapie mit Anti-HBs-Antikörpern).

Antikörper gehören zu den wichtigsten Modulatoren der Immunität und sind aufgrund ihrer doppelten Funktionalität einzigartig attraktive pharmazeutische Wirkstoffe. Antikörper zielen nicht nur mit ihren variablen Domänen auf ein bestimmtes Epitop ab, sondern unterscheiden sich von direkten Virostatika auch dadurch, dass sie über ihre Fc-Domänen Immuneffektorfunktionen rekrutieren können. Antigen-Antikörper-Immunkomplexe beschleunigen nicht nur die Clearance von Viren und infizierten Zellen durch Phagozytose oder direkte zelluläre Zytotoxizität, sondern sind auch wirksame Immunogene, die die Entwicklung von Immunantworten des Wirts fördern können. Antikörperbasierte Krebstherapien beispielsweise eliminieren bösartige Zellen und induzieren eine adaptive T-Zell-Immunität und haben die Zahl der Personen, die bösartige Krankheiten kontrollieren und überleben, dramatisch erhöht. Ob die gleichen Konzepte auf die Behandlung chronischer Virusinfektionen anwendbar sind, ist Gegenstand aktiver Untersuchungen, insbesondere im HIV-1-Bereich.

Bei CHB haben Antikörper das Potenzial, die Clearance von HBsAg zu verbessern. Obwohl Studien an transgenen Tieren darauf hinweisen, dass die T-Zell-Toleranz gegenüber HBsAg dauerhaft und schwer rückgängig zu machen ist, spiegeln die Modelle die menschliche Infektion nicht vollständig wider.

Ob eine Antikörpertherapie einige Aspekte der HBV-spezifischen T-Zell-Immunität beim Menschen wiederherstellen kann, ist nicht geklärt. Die Immuntherapie mit HBsAg-spezifischen Antikörpern hat in klinischen Studien einige direkte HBsAg-Unterdrückungseffekte gezeigt. Allerdings führten die ausgewerteten HBsAg-Antikörper nur zu einem kurzfristigen Rückgang der HBsAg-Spiegel bei CHB-Patienten, der den Wirkungen von Behandlungen auf Basis von Hepatitis-B-Immunglobulin (HBIG) sehr ähnlich war. Wirksamere Antikörper mit langanhaltender Wirkung auf zirkulierendes HBsAg und Potenzial zur Modulation und Wiederherstellung HBV-spezifischer Immunantworten sind erforderlich, um die Rolle der Immuntherapie bei der CHB-Behandlung und -Remission zu bewerten.

Diese Studie zielt darauf ab, die Sicherheit, die maximal tolerierte Dosis, die Pharmakokinetik (PK) und die antiviralen Wirkungen eines hochwirksamen neutralisierenden menschlichen monoklonalen Antikörpers (mAb), HepB mAb19, zu bewerten, der auf das HBV-S-Protein bei Personen mit CHB abzielt. Die durch diese Studie generierten Sicherheits-, PK- und virologischen Daten werden die Auswahl eines Dosierungsschemas für nachfolgende Mehrfachdosisstudien an Personen mit CHB in Kombination mit einer standardmäßigen antiviralen HBV-Therapie und/oder anderen Prüfpräparaten, einschließlich anderer Anti-HBs-mAbs, leiten.

HepB mAb19 ist ein menschlicher mAb des Isotyps Immunglobulin G (IgG) 1kappa, der spezifisch an die „a“-Determinante der extrazellulären Schleife des HBV-Oberflächenantigens (HBsAg) bindet. HepB mAb-19 wurde an der Rockefeller University aus einer mit HBsAg geimpften Person isoliert und kloniert. Der natürlich vorkommende Antikörper wurde durch zwei Ein-Aminosäure-Substitutionen modifiziert. Diese Substitutionen erhöhen die Antikörperbindungsaffinität zum neonatalen Fc-Rezeptor und verlängern dessen Halbwertszeit in vivo, beeinträchtigen jedoch nicht die Antigenbindung oder die Affinität zu Fc-Gamma-Rezeptoren.

Um die Wirksamkeit von Anti-HBV-Antikörpern in vivo zu beurteilen, verwendeten die Forscher chimäre FNRG-Mäuse aus menschlicher Leber, die eine HBV-Infektion überstehen können. Sie testeten zwei Antikörper, HepB mAb20 und HepB mAb07, als Präexpositionsprophylaxe. Beide Antikörper verhinderten erfolgreich eine HBV-Infektion bei diesen Mäusen, während alle Kontrollmäuse infiziert wurden. Bei Mäusen mit etablierten HBV-Infektionen stabilisierten HepB mAb20, HepB mAb07 und HepB mAb19 die Virämie, beseitigten sie jedoch nicht vollständig. Im Laufe der Zeit entwickelten einige mit mAb20 und mAb07 behandelte Mäuse einen Anstieg der Virämie, der auf das Auftreten der G145R-Escape-Mutation zurückzuführen ist. Bemerkenswert ist, dass HepB mAb19 nicht zu solchen Escape-Mutationen führte, was auf eine höhere Resistenz schließen lässt.

Darüber hinaus wurden Kombinationstherapien evaluiert, die auf verschiedene virale Epitope abzielen. Während eine HepB-mAb06 + HepB-mAb07-Kombination eine teilweise Resistenz gegen Escape-Mutationen zeigte, ermöglichte sie dennoch die Entstehung von Mutationen. Im Gegensatz dazu konnten Kombinationen wie HepB mAb17 + HepB mAb19 und eine Dreifachtherapie (HepB mAb16, HepB mAb17, HepB mAb19) die Virämie erfolgreich kontrollieren und Escape-Mutationen verhindern. Diese Ergebnisse deuten darauf hin, dass eine Monotherapie zu Escape-Mutationen führen kann, während gut ausgewählte Antikörperkombinationen die Viruskontrolle verbessern und möglicherweise die Immunantwort während einer antiviralen Therapie verstärken können

In einer GLP-konformen Studie zu HepB mAb19 wurde die Kreuzreaktivität in normalen menschlichen und Rattengeweben getestet. Dabei wurde eine begrenzte zytoplasmatische Bindung in bestimmten Zellen festgestellt, hauptsächlich in Azinusepithelzellen in menschlichen Speicheldrüsen und verschiedenen Rattengeweben. Da die Bindung zytoplasmatisch war, ist es unwahrscheinlich, dass sie toxikologische Bedeutung hat. Eine 25-tägige toxikologische Studie an Ratten (Dosen 0, 4, 15 oder 60 mg/kg i. v.) zeigte keine nachteiligen Auswirkungen oder signifikante Veränderungen der klinischen oder Laborparameter und legte den No-Observed-Adverse-Effect-Level (NOAEL) fest. bei 60 mg/kg. HepB mAb19 zeigte eine dosisproportionale Spitzenkonzentration und eine stabile Halbwertszeit von 13–16 Tagen, mit einem 4-fachen Anstieg der Exposition bei wiederholter Gabe.

Unsere Hypothese ist, dass die intravenöse Verabreichung von HepB mAb19 während einer supprimierenden Nukleotidtherapie sicher und gut verträglich ist, zu verringerten Spiegeln des zirkulierenden HBsAg führt und die angeborenen und adaptiven Immunantworten des Wirts auf HBV verstärkt.

Die Studie besteht aus zwei Teilen:

Teil A: In Teil A wird eine Einzeldosis HepB mAb19 oder Placebo durch Randomisierung in drei verschiedene Dosisgruppen verabreicht. Nach und nach werden höhere Dosen von HepB mAb19 verwendet, was bedeutet, dass Teilnehmer in Gruppe 1 eine niedrige Dosis (3 mg/kg) erhalten, die auf Sicherheit geprüft wird, bevor eine Einzeldosis von 10 mg/kg und 30 mg/kg getestet wird nach demselben Prinzip. Die Teilnehmer jeder Gruppe 1–3 werden im Verhältnis 3:1 randomisiert und erhalten entweder HepB mAb19 oder Placebo (normale Kochsalzlösung).

Teil B: Basierend auf Teil A wird die maximal tolerierte Dosis (MTD) von HepB mAb19 ermittelt. Diese Dosis wird anschließend in Teil B verwendet, wo eine vierte Gruppe von 18 Personen HepB mAb19 ohne Randomisierung erhält.

Die Teilnehmer werden 1, 3 und 7 Tage nach der Verabreichung des Testantikörpers oder der Placebo-Infusion einer Sicherheitsbewertung unterzogen, dann wöchentlich bis Woche 4 und schließlich in den Wochen 8, 12, 24, 36 und 48.

Bei Studienbesuchen werden Blutproben entnommen. Diese Blutproben werden für Sicherheitsanalysen, wie HepB mAb19 im Körper absorbiert wird, die Auswirkungen von HepB mAb19 auf HBV und die Reaktion des Immunsystems darauf verwendet. Blutproben werden am Tag 0 vor der Verabreichung von HepB mAb19, am Ende der Antikörper- oder Placebo-Infusion, nach 1, 3 und 7 Tagen sowie bei nachfolgenden Nachuntersuchungen entnommen.