Die Wirkung einer hohen und niedrigen Natriumaufnahme auf Aquaporin-2 im Urin bei autosomal-dominanter polyzystischer Nierenerkrankung

Rekrutierung:

Die Patienten mit ADPKD werden von der Ambulanz für Nephrologie der medizinischen Abteilung des Holstebro-Krankenhauses (Holstebro, Dänemark) rekrutiert. Die Kontrollpersonen werden durch Anzeigen in öffentlichen Einrichtungen und privaten Unternehmen angeworben.

Anzahl der Fächer:

Ein Unterschied im u-AQP2CR von 40 ng/mmol wird als minimaler relevanter Unterschied angesehen. Eine Stichprobengröße von 10 Personen, die ausgewertet werden können, hat eine 80 %ige Power, um diesen Unterschied zu erkennen, wenn man von einem Signifikanzniveau von 5 % und einer Standardabweichung von 30 ng/mmol ausgeht. Da zu erwarten ist, dass einige Fächer abbrechen, werden 14-15 Fächer in jede Gruppe aufgenommen.

Experimenteller Ablauf vor dem Studientag:

Fünf Tage vor dem Studientag sammeln die Probanden eine standardisierte, HS (300 mmol Natrium/Tag/17,5 g Salz/Tag) oder LS (30 mmol Natrium/Tag/1,8 g Salz/Tag), 4-Tages-Kost aus der Krankenhausküche. Je nach individuell geschätztem Energiebedarf erhalten die Teilnehmer entweder eine Diät von 8.000 oder 11.000 kJ/Tag. Die Energieverteilung beträgt 55 % Kohlenhydrate, 15 % Proteine ​​und 30 % Lipide. Am nächsten Morgen wird mit der 4-Tages-Diät begonnen. Auch die Flüssigkeitsaufnahme ist während der 4 Tage standardisiert. Die Probanden werden gebeten, genau 250 ml/1.000 kJ/Tag zu trinken und auf Kaffee, Tee und alkoholische Getränke zu verzichten. Die Probanden werden angewiesen, ihre körperliche Aktivität während der beiden Experimente unverändert beizubehalten und auf hartes Training zu verzichten. Die Probanden müssen am Tag vor dem Studientag 24 h lang ihren Urin sammeln.

Versuchsdurchführung am Studientag:

Am Studientag werden die Probanden gebeten, ab 7:00 Uhr alle 30 min 175 ml Wasser zu trinken. Die Probanden kommen um 8:00 Uhr in der Abteilung an. Periphere iv-Leitungen werden in die antekubitalen Venen beider Unterarme eingeführt, eine für die Infusion von 51 Cr-EDTA und hypertonischer Kochsalzlösung und eine für die Entnahme von Blutproben. Die Probanden werden von 8:00 Uhr bis 13:30 Uhr in Rückenlage gehalten, außer während der Entleerung, die in sitzender oder stehender Position stattfindet. Um 8:30 Uhr wird eine Anfangsdosis von 51 Cr-EDTA verabreicht, gefolgt von einer anhaltenden Infusion. Nach 60 Minuten Äquilibrierung wird die Studie mit fünf Clearance-Perioden fortgesetzt, die ersten beiden mit einer Dauer von 30 Minuten (P1-P2), die letzten drei mit einer Dauer von 60 Minuten (P3-P5). Die ersten beiden Clearance-Perioden sind Basisperioden. Um 10:30 Uhr werden 7 ml/kg 3%ige Kochsalzlösung über 30 min verabreicht. Blutdruck und Herzfrequenz werden alle 30 Minuten von 9:30 bis 13:30 Uhr gemessen. Urin wird in jeder Clearance-Periode gesammelt und auf Natrium, Osmolalität, u-AQP2, u-ENaC-betaCR, u-cAMP, u-PGE2 und 51CrEDTA analysiert. Blutproben werden alle 30 Minuten von 9:30 bis 10:30 Uhr und stündlich von 11:30 bis 13:30 Uhr entnommen und auf Natrium, Osmolalität und 51Cr-EDTA analysiert. Zusätzlich wird die Analyse von p-AVP, p-Renin, p-ANG II, p-Aldo, p-ANP und p-BNP aus Blutproben durchgeführt, die um 10:30 Uhr, 11:30 Uhr, 12:00 Uhr entnommen wurden: 30 Uhr und 13:30 Uhr.

Statistiken:

Statistische Analysen werden mit SPSS Version 15 (SPSS, Chicago, IL) durchgeführt. Einzelne Basislinienwerte werden erhalten, indem der gewichtete Durchschnitt der Messungen aus den zwei Basislinienperioden genommen wird. Die Grundlinienwerte der zwei Gruppen werden durch den Student's t-Test verglichen. Die Grundlinienwerte während der HS- und LS-Einnahme werden durch gepaarte Stichproben-t-Tests verglichen. Die Ermittler verwenden das „General Linear Model Repeated Measures“-Verfahren in SPSS mit Zeit als Innersubjektfaktor und Gruppe als Zwischensubjektfaktor, um die Effektvariablen bei Patienten und Kontrollen zu vergleichen. Die Veränderungen als Reaktion auf die Infusion mit hypertoner Kochsalzlösung in jeder Gruppe werden mit dem General Linear Model Repeated Measures-Verfahren mit Zeit als Innersubjektfaktor und gepaarten Stichproben-t-Tests mit Bonferroni-Korrektur als Post-Hoc-Tests analysiert. P-Werte Rekrutierung Die Patienten mit ADPKD werden aus der Ambulanz für Nephrologie der medizinischen Abteilung des Holstebro-Krankenhauses (Holstebro, Dänemark) rekrutiert. Die Kontrollpersonen werden durch Ausschreibungen in öffentlichen Einrichtungen und privaten Unternehmen angeworben.

Anzahl der Probanden Ein Unterschied im u-AQP2CR von 40 ng/mmol wird als minimaler relevanter Unterschied betrachtet. Eine Stichprobengröße von 10 Probanden, die ausgewertet werden könnten, hat eine 80 %ige Power, um diesen Unterschied zu erkennen, wenn man von einem Signifikanzniveau von 5 % und einer Standardabweichung von 30 ng/mmol ausgeht. Da zu erwarten ist, dass einige Fächer abbrechen, werden 14-15 Fächer in jede Gruppe aufgenommen.

Experimentelles Verfahren vor dem Studientag Fünf Tage vor dem Studientag sammeln die Probanden eine standardisierte, HS (300 mmol Natrium/Tag/17,5 g Salz/Tag) oder LS (30 mmol Natrium/Tag/1,8 g Salz/Tag), 4-Tages-Kost aus der Krankenhausküche. Je nach individuell geschätztem Energiebedarf erhalten die Teilnehmer entweder eine Diät von 8.000 oder 11.000 kJ/Tag. Die Energieverteilung besteht zu 55 % aus Kohlenhydraten, zu 15 % aus Proteinen und zu 30 % aus Lipiden. Die 4-Tage-Diät beginnt am nächsten Morgen. Auch die Flüssigkeitsaufnahme ist während der 4 Tage standardisiert. Die Probanden werden gebeten, genau 250 ml/1.000 kJ/Tag zu trinken und auf Kaffee, Tee und alkoholische Getränke zu verzichten. Die Probanden werden angewiesen, ihre körperliche Aktivität während der beiden Experimente unverändert beizubehalten und auf hartes Training zu verzichten. Die Probanden müssen am Tag vor dem Studientag 24 h lang ihren Urin sammeln.

Versuchsdurchführung am Studientag Am Studientag werden die Probanden gebeten, ab 7:00 Uhr alle 30 min 175 ml Wasser zu trinken. Die Probanden kommen um 8:00 Uhr in der Abteilung an. Periphere iv-Leitungen werden in die antecubitalen Venen beider Unterarme eingeführt, eine für die Infusion von 51Cr-EDTA und hypertoner Kochsalzlösung und eine für die Entnahme von Blutproben. Die Probanden werden von 8:00 Uhr bis 13:30 Uhr in Rückenlage gehalten, außer während der Entleerung, die in sitzender oder stehender Position stattfindet. Um 8:30 Uhr wird eine Anfangsdosis von 51 Cr-EDTA verabreicht, gefolgt von einer anhaltenden Infusion. Nach 60 Minuten Äquilibrierung wird die Studie mit fünf Clearance-Perioden fortgesetzt, die ersten beiden mit einer Dauer von 30 Minuten (P1-P2), die letzten drei mit einer Dauer von 60 Minuten (P3-P5). Die ersten beiden Clearance-Perioden sind Basisperioden. Um 10:30 Uhr werden 7 ml/kg 3%ige Kochsalzlösung über 30 min verabreicht. Blutdruck und Herzfrequenz werden alle 30 Minuten von 9:30 bis 13:30 Uhr gemessen. Urin wird in jeder Clearance-Periode gesammelt und auf Natrium, Osmolalität, u-AQP2, u-ENaC-betaCR, u-cAMP, u-PGE2 und 51CrEDTA analysiert. Blutproben werden alle 30 Minuten von 9:30 bis 10:30 Uhr und stündlich von 11:30 bis 13:30 Uhr entnommen und auf Natrium, Osmolalität und 51Cr-EDTA analysiert. Zusätzlich wird die Analyse von p-AVP, p-Renin, p-ANG II, p-Aldo, p-ANP und p-BNP aus Blutproben durchgeführt, die um 10:30 Uhr, 11:30 Uhr, 12:00 Uhr entnommen wurden: 30 Uhr und 13:30 Uhr.

Statistik Statistische Analysen werden mit SPSS Version 15 (SPSS, Chicago, IL) durchgeführt. Einzelne Basislinienwerte werden erhalten, indem der gewichtete Durchschnitt der Messungen aus den zwei Basislinienperioden genommen wird. Die Grundlinienwerte der zwei Gruppen werden durch den Student's t-Test verglichen. Die Grundlinienwerte während der HS- und LS-Einnahme werden durch gepaarte Stichproben-t-Tests verglichen. Die Ermittler verwenden das „General Linear Model Repeated Measures“-Verfahren in SPSS mit Zeit als Innersubjektfaktor und Gruppe als Zwischensubjektfaktor, um die Effektvariablen bei Patienten und Kontrollen zu vergleichen. Die Veränderungen als Reaktion auf die Infusion mit hypertoner Kochsalzlösung in jeder Gruppe werden mit dem General Linear Model Repeated Measures-Verfahren mit Zeit als Innersubjektfaktor und gepaarten Stichproben-t-Tests mit Bonferroni-Korrektur als Post-Hoc-Tests analysiert. P-Werte ≤ 0,05 werden als signifikant angesehen.