Korkean ja alhaisen natriumin saannin vaikutus virtsan akvaporiini-2:een autosomaalisessa hallitsevassa polykystisessä munuaistaudissa

Rekrytointi:

ADPKD:tä sairastavat potilaat rekrytoidaan Holstebron sairaalan (Holstebro, Tanska) lääketieteen laitoksen avohoitonefrologian klinikalta. Valvontakohteet rekrytoidaan julkisten laitosten ja yksityisten yritysten mainoksilla.

Aiheiden lukumäärä:

40 ng/mmol:n eroa u-AQP2CR:ssä pidetään pienimpänä merkityksellisenä erona. 10 arvioitavissa olevalla näytteellä on 80 %:n kyky havaita tämä ero olettaen, että merkitsevyystaso on 5 % ja SD 30 ng/mmol. Koska muutaman koehenkilön odotetaan jäävän kesken, kuhunkin ryhmään otetaan mukaan 14-15 henkilöä.

Kokeellinen menettely ennen opintopäivää:

Viisi päivää ennen tutkimuspäivää koehenkilöt keräävät standardoidun HS:n (300 mmol natriumia/vrk/17,5 g suolaa/vrk) tai LS:n (30 mmol natriumia/vrk/1,8) g suolaa/vrk), 4 päivän ruokavalio sairaalan keittiöstä. Yksilöllisesti arvioidusta energiantarpeesta riippuen osallistujille annetaan joko 8 000 tai 11 000 kJ/vrk ruokavalio. Energian jakautuminen on 55 % hiilihydraatteja, 15 % proteiineja ja 30 % lipidejä. 4 päivän ruokavalio aloitetaan seuraavana aamuna. Nesteen saanti on myös standardoitu 4 päivän aikana. Koehenkilöitä pyydetään juomaan täsmälleen 250 ml/1000 kJ/vrk ja pidättäytymään kahvista, teestä ja alkoholijuomista. Koehenkilöitä neuvotaan pitämään fyysinen aktiivisuus muuttumattomana kahden kokeen aikana ja pidättäytymään kovasta harjoittelusta. Koehenkilöiden on kerättävä virtsaansa 24 tunnin ajan tutkimuspäivää edeltävänä päivänä.

Kokeellinen menettely opintopäivänä:

Tutkimuspäivänä koehenkilöitä pyydetään juomaan 175 ml vettä 30 minuutin välein klo 7.00 alkaen. Aiheet saapuvat osastolle klo 8.00. Perifeeriset suonensisäiset linjat asetetaan molempien kyynärvarsien antecubitaalisiin laskimoihin, yksi 51Cr-EDTA:n ja hypertonisen suolaliuoksen infuusiota varten ja toinen verinäytteiden ottamista varten. Koehenkilöt pidetään makuuasennossa klo 8.00–13.30 paitsi tyhjennysvaiheessa, joka tapahtuu istuma- tai seisoma-asennossa. Klo 8.30 annetaan aloitusannos 51Cr-EDTA:ta, jota seuraa jatkuva infuusio. 60 minuutin tasapainottamisen jälkeen tutkimus jatkuu viidellä puhdistumajaksolla, joista kaksi ensimmäistä ovat 30 minuutin pituisia (P1-P2), viimeiset kolme 60 minuuttia (P3-P5). Kaksi ensimmäistä selvitysjaksoa ovat perusjaksoja. Klo 10.30 annetaan 7 ml/kg 3 % suolaliuosta 30 minuutin aikana. Verenpaine ja syke mitataan 30 minuutin välein klo 9.30–13.30. Virtsa kerätään kullakin puhdistumajaksolla ja analysoidaan natriumin, osmolaalisuuden, u-AQP2:n, u-ENaC-betaCR:n, u-cAMP:n, u-PGE2:n ja 51CrEDTA:n suhteen. Verinäytteet otetaan 30 minuutin välein klo 9.30–10.30 ja tunnin välein klo 11.30–13.30, ja niistä analysoidaan natrium, osmolaliteetti ja 51Cr-EDTA. Lisäksi p-AVP-, p-reniini-, p-ANG II-, p-Aldo-, p-ANP- ja p-BNP-analyysi suoritetaan verinäytteistä, jotka on otettu klo 10.30, 11.30, 12: klo 30 ja 13:30.

Tilastot:

Tilastolliset analyysit suoritetaan käyttämällä SPSS-versiota 15 (SPSS, Chicago, IL). Yksittäiset perusarvot saadaan ottamalla kahden perusjakson mittausten painotettu keskiarvo. Kahden ryhmän perusarvoja verrataan Studentin t-testillä. Perusarvoja HS- ja LS-saannin aikana verrataan parinäytteiden t-testeillä. Tutkijat käyttävät "General Linear Model Repeated Measures" -menettelyä SPSS:ssä siten, että aika on kohteen sisäisenä tekijänä ja ryhmä koehenkilöiden välisenä tekijänä vertaillakseen vaikutusmuuttujia potilaissa ja kontrolleissa. Muutokset vasteessa hypertoniseen suolaliuosinfuusioon kussakin ryhmässä analysoidaan General Linear Model Repeated Measures -menettelyllä käyttäen aikaa subjektin sisäisenä tekijänä ja parillisten näytteiden t-testejä Bonferroni-korjauksella post hoc -testeinä. P-arvot Rekrytointi ADPKD-potilaat rekrytoidaan Holstebron sairaalan (Holstebro, Tanska) lääketieteen laitoksen poliklinikalta. Valvontakohteet rekrytoidaan julkisten laitosten ja yksityisten yritysten mainoksilla.

Koehenkilöiden lukumäärä Eroa u-AQP2CR:ssä 40 ng/mmol pidetään pienimpänä merkityksellisenä erona. 10 arvioitavissa olevalla koehenkilöllä on 80 %:n kyky havaita tämä ero olettaen, että merkitsevyystaso on 5 % ja SD 30 ng/mmol. Koska muutaman koehenkilön odotetaan jäävän kesken, kuhunkin ryhmään otetaan mukaan 14-15 henkilöä.

Koemenettely Ennen tutkimuspäivää Viisi päivää ennen tutkimuspäivää koehenkilöt keräävät standardoidun HS:n (300 mmol natriumia/vrk/17,5 g suolaa/vrk) tai LS:n (30 mmol natriumia/vrk/1,8). g suolaa/vrk), 4 päivän ruokavalio sairaalan keittiöstä. Yksilöllisesti arvioidusta energiantarpeesta riippuen osallistujille annetaan joko 8 000 tai 11 000 kJ/vrk ruokavalio. Energian jakautuminen on 55 % hiilihydraatteja, 15 % proteiineja ja 30 % lipidejä. 4 päivän ruokavalio alkaa seuraavana aamuna. Nesteen saanti on myös standardoitu 4 päivän aikana. Koehenkilöitä pyydetään juomaan täsmälleen 250 ml/1000 kJ/vrk ja pidättäytymään kahvista, teestä ja alkoholijuomista. Koehenkilöitä neuvotaan pitämään fyysinen aktiivisuus muuttumattomana kahden kokeen aikana ja pidättäytymään kovasta harjoittelusta. Koehenkilöiden on kerättävä virtsaansa 24 tunnin ajan tutkimuspäivää edeltävänä päivänä.

Kokeellinen toimenpide tutkimuspäivänä Tutkimuspäivänä koehenkilöitä pyydetään juomaan 175 ml vettä 30 minuutin välein klo 7.00 alkaen. Aiheet saapuvat osastolle klo 8.00. Perifeeriset suonensisäiset linjat asetetaan molempien käsivarsien kyynärpäälaskimoihin, yksi 51Cr-EDTA:n ja hypertonisen suolaliuoksen infuusiota varten ja toinen verinäytteiden ottamista varten. Koehenkilöt pidetään makuuasennossa klo 8.00–13.30 paitsi tyhjennysvaiheessa, joka tapahtuu istuma- tai seisoma-asennossa. Klo 8.30 annetaan aloitusannos 51Cr-EDTA:ta, jota seuraa jatkuva infuusio. 60 minuutin tasapainottamisen jälkeen tutkimus jatkuu viidellä puhdistumajaksolla, joista kaksi ensimmäistä ovat 30 minuutin pituisia (P1-P2), viimeiset kolme 60 minuuttia (P3-P5). Kaksi ensimmäistä selvitysjaksoa ovat perusjaksoja. Klo 10.30 annetaan 7 ml/kg 3 % suolaliuosta 30 minuutin aikana. Verenpaine ja syke mitataan 30 minuutin välein klo 9.30–13.30. Virtsa kerätään kullakin puhdistumajaksolla ja analysoidaan natriumin, osmolaalisuuden, u-AQP2:n, u-ENaC-betaCR:n, u-cAMP:n, u-PGE2:n ja 51CrEDTA:n suhteen. Verinäytteet otetaan 30 minuutin välein klo 9.30–10.30 ja tunnin välein klo 11.30–13.30, ja niistä analysoidaan natrium, osmolaliteetti ja 51Cr-EDTA. Lisäksi p-AVP-, p-reniini-, p-ANG II-, p-Aldo-, p-ANP- ja p-BNP-analyysi suoritetaan verinäytteistä, jotka on otettu klo 10.30, 11.30, 12: klo 30 ja 13:30.

Tilastot Tilastoanalyysit suoritetaan SPSS-versiolla 15 (SPSS, Chicago, IL). Yksittäiset perusarvot saadaan ottamalla kahden perusjakson mittausten painotettu keskiarvo. Kahden ryhmän perusarvoja verrataan Studentin t-testillä. Perusarvoja HS- ja LS-saannin aikana verrataan parinäytteiden t-testeillä. Tutkijat käyttävät "General Linear Model Repeated Measures" -menettelyä SPSS:ssä siten, että aika on kohteen sisäisenä tekijänä ja ryhmä koehenkilöiden välisenä tekijänä vertaillakseen vaikutusmuuttujia potilaissa ja kontrolleissa. Muutokset vasteessa hypertoniseen suolaliuosinfuusioon kussakin ryhmässä analysoidaan General Linear Model Repeated Measures -menettelyllä käyttäen aikaa subjektin sisäisenä tekijänä ja parillisten näytteiden t-testejä Bonferroni-korjauksella post hoc -testeinä. P-arvoja ≤0,05 pidetään merkittävinä.