L'effetto dell'assunzione di sodio alta e bassa sull'acquaporina-2 urinaria nella malattia del rene policistico autosomico dominante

Reclutamento:

I pazienti con ADPKD vengono reclutati dalla Clinica Nefrologica Ambulatoriale del Dipartimento di Medicina dell'Ospedale di Holstebro (Holstebro, Danimarca). I soggetti di controllo sono reclutati mediante inserzioni presso enti pubblici e aziende private.

Numero di soggetti:

Una differenza in u-AQP2CR di 40 ng/mmol è considerata la differenza minima rilevante. Un campione di 10 soggetti, che possono essere valutati, ha l'80% di potere di rilevare questa differenza assumendo un livello di significatività del 5% e una SD di 30 ng/mmol. Poiché è previsto l'abbandono di alcuni soggetti, in ciascun gruppo saranno inclusi 14-15 soggetti.

Procedura sperimentale prima della giornata di studio:

Cinque giorni prima del giorno dello studio, i soggetti raccolgono un dosaggio standardizzato di HS (300 mmol di sodio/giorno/17,5 g di sale/giorno) o LS (30 mmol di sodio/giorno/1,8 g sale/giorno), dieta di 4 giorni dalla cucina dell'ospedale. A seconda del fabbisogno energetico stimato individualmente, ai partecipanti viene somministrata una dieta di 8.000 o 11.000 kJ/giorno. La distribuzione energetica è per il 55% di carboidrati, per il 15% di proteine ​​e per il 30% di lipidi. La dieta di 4 giorni viene iniziata la mattina seguente. Anche l'assunzione di liquidi è standardizzata durante i 4 giorni. Ai soggetti viene chiesto di bere esattamente 250 ml/1.000 kJ/giorno e di astenersi da caffè, tè e bevande alcoliche. I soggetti sono istruiti a mantenere inalterata la loro attività fisica durante i due esperimenti e ad astenersi da allenamenti intensi. I soggetti devono raccogliere le loro urine per 24 ore il giorno prima del giorno dello studio.

Procedura sperimentale nella giornata di studio:

Il giorno dello studio, ai soggetti viene chiesto di bere 175 ml di acqua ogni 30 minuti dalle 7:00. I soggetti arrivano al dipartimento alle 8:00. Le linee venose periferiche vengono inserite nelle vene antecubitali di entrambi gli avambracci, una per l'infusione di 51Cr-EDTA e soluzione salina ipertonica e una per il prelievo di campioni di sangue. I soggetti saranno mantenuti in posizione supina dalle 8:00 alle 13:30 tranne durante la minzione, che avverrà in posizione seduta o in piedi. Alle 8:30 viene somministrata una dose iniziale di 51Cr-EDTA, seguita da un'infusione prolungata. Dopo 60 min di equilibrio, lo studio continuerà con cinque periodi di clearance, i primi due della durata di 30 min (P1-P2), gli ultimi tre della durata di 60 min (P3-P5). I primi due periodi di liquidazione sono periodi di riferimento. Alle 10:30, vengono somministrati 7 ml/kg di soluzione fisiologica al 3% in 30 min. La pressione sanguigna e la frequenza cardiaca vengono misurate ogni 30 minuti dalle 9:30 alle 13:30. L'urina viene raccolta in ciascun periodo di clearance e analizzata per sodio, osmolalità, u-AQP2, u-ENaC-betaCR, u-cAMP, u-PGE2 e 51CrEDTA. I campioni di sangue saranno prelevati ogni 30 minuti dalle 9:30 alle 10:30 e ogni ora dalle 11:30 alle 13:30, e saranno analizzati per sodio, osmolalità e 51Cr-EDTA. Inoltre, l'analisi di p-AVP, p-Renin, p-ANG II, p-Aldo, p-ANP e p-BNP sarà eseguita da campioni di sangue prelevati alle 10:30, 11:30, 12:00. 30:00 e 13:30.

Statistiche:

Le analisi statistiche saranno eseguite utilizzando SPSS versione 15 (SPSS, Chicago, IL). I singoli valori di riferimento sono ottenuti prendendo la media ponderata delle misurazioni dai due periodi di riferimento. I valori basali dei due gruppi saranno confrontati mediante il test t di Student. I valori basali durante l'assunzione di HS e LS saranno confrontati mediante test t di campioni appaiati. Gli investigatori utilizzeranno la procedura "Misure ripetute del modello lineare generale" in SPSS con il tempo come fattore all'interno del soggetto e gruppo come fattore tra soggetti per confrontare le variabili dell'effetto nei pazienti e nei controlli. I cambiamenti in risposta all'infusione di soluzione salina ipertonica in ciascun gruppo saranno analizzati con la procedura di misure ripetute del modello lineare generale con il tempo come fattore all'interno del soggetto e test t per campioni appaiati con correzione di Bonferroni come test post hoc. Valori P Reclutamento I pazienti con ADPKD saranno reclutati dalla Clinica Nefrologica Ambulatoriale del Dipartimento di Medicina, Ospedale di Holstebro (Holstebro, Danimarca). I soggetti di controllo saranno assunti mediante inserzioni presso enti pubblici e aziende private.

Numero di soggetti Una differenza in u-AQP2CR di 40 ng/mmol è considerata la differenza minima rilevante. Un campione di 10 soggetti, che potrebbero essere valutati, ha una capacità dell'80% di rilevare questa differenza assumendo un livello di significatività del 5% e una SD di 30 ng/mmol. Poiché è previsto l'abbandono di alcuni soggetti, in ciascun gruppo saranno inclusi 14-15 soggetti.

Procedura sperimentale prima del giorno dello studio Cinque giorni prima del giorno dello studio, i soggetti raccoglieranno un HS standardizzato (300 mmol di sodio/giorno/17,5 g di sale/giorno) o LS (30 mmol di sodio/giorno/1,8 g sale/giorno), dieta di 4 giorni dalla cucina dell'ospedale. A seconda del fabbisogno energetico stimato individualmente, ai partecipanti verrà somministrata una dieta di 8.000 o 11.000 kJ/giorno. La distribuzione energetica sarà per il 55% di carboidrati, per il 15% di proteine ​​e per il 30% di lipidi. La dieta di 4 giorni inizierà la mattina seguente. Anche l'assunzione di liquidi è standardizzata durante i 4 giorni. Ai soggetti viene chiesto di bere esattamente 250 ml/1.000 kJ/giorno e di astenersi da caffè, tè e bevande alcoliche. I soggetti saranno istruiti a mantenere invariata la loro attività fisica durante i due esperimenti e ad astenersi da allenamenti intensi. I soggetti devono raccogliere le loro urine per 24 ore il giorno prima del giorno dello studio.

Procedura sperimentale nel giorno di studio Nel giorno di studio, ai soggetti viene chiesto di bere 175 ml di acqua ogni 30 minuti dalle 7:00. I soggetti arrivano al dipartimento alle 8:00. Verranno inserite linee endovenose periferiche nelle vene antecubitali di entrambi gli avambracci, una per l'infusione di 51Cr-EDTA e soluzione salina ipertonica e una per il prelievo di campioni di sangue. I soggetti saranno mantenuti in posizione supina dalle 8:00 alle 13:30 tranne durante la minzione, che avverrà in posizione seduta o in piedi. Alle 8:30 viene somministrata una dose iniziale di 51Cr-EDTA, seguita da un'infusione prolungata. Dopo 60 min di equilibrio, lo studio continuerà con cinque periodi di clearance, i primi due della durata di 30 min (P1-P2), gli ultimi tre della durata di 60 min (P3-P5). I primi due periodi di liquidazione sono periodi di riferimento. Alle 10:30, vengono somministrati 7 ml/kg di soluzione fisiologica al 3% in 30 min. La pressione sanguigna e la frequenza cardiaca saranno misurate ogni 30 minuti dalle 9:30 alle 13:30. L'urina viene raccolta in ciascun periodo di clearance e analizzata per sodio, osmolalità, u-AQP2, u-ENaC-betaCR, u-cAMP, u-PGE2 e 51CrEDTA. I campioni di sangue saranno prelevati ogni 30 minuti dalle 9:30 alle 10:30 e ogni ora dalle 11:30 alle 13:30, e saranno analizzati per sodio, osmolalità e 51Cr-EDTA. Inoltre, l'analisi di p-AVP, p-Renin, p-ANG II, p-Aldo, p-ANP e p-BNP sarà eseguita da campioni di sangue prelevati alle 10:30, 11:30, 12:00. 30:00 e 13:30.

Statistiche Le analisi statistiche saranno eseguite utilizzando SPSS versione 15 (SPSS, Chicago, IL). I singoli valori di riferimento sono ottenuti prendendo la media ponderata delle misurazioni dai due periodi di riferimento. I valori basali dei due gruppi saranno confrontati mediante il test t di Student. I valori basali durante l'assunzione di HS e LS saranno confrontati mediante test t di campioni appaiati. Gli investigatori utilizzeranno la procedura "Misure ripetute del modello lineare generale" in SPSS con il tempo come fattore all'interno del soggetto e gruppo come fattore tra soggetti per confrontare le variabili dell'effetto nei pazienti e nei controlli. I cambiamenti in risposta all'infusione di soluzione salina ipertonica in ciascun gruppo saranno analizzati con la procedura di misure ripetute del modello lineare generale con il tempo come fattore all'interno del soggetto e test t per campioni appaiati con correzione di Bonferroni come test post hoc. I valori P ≤0,05 saranno considerati significativi.