Messung von Blutveränderungen bei Patienten mit hohem Risiko einer Zytomegalievirus-Infektion nach einer Spenderknochenmarktransplantation oder einer peripheren Blutstammzelltransplantation

ZIELE:

• Zur Dokumentation der quantitativen Merkmale eines Cytomegalovirus (CMV)-spezifischen HLA-Peptid-Tetramer-Bindungstests (TBA) für zytotoxische T-Lymphozyten (CTLs) bei Patienten, die sich einer allogenen Knochenmarktransplantation (BMT) oder einer peripheren Blutstammzelltransplantation (PBSCT) unterzogen haben ).
• Um die optimalen TBA-Bedingungen für die CTL-Charakterisierung bei diesen Patienten zu bestätigen.
• Vergleich der TBA-Ergebnisse für diese Patienten mit herkömmlichen Tests für CTL-Funktionen.
• Vergleich der CMV-spezifischen TBA während der ersten 3 Monate nach allogener BMT oder PBSCT und Bestimmung, ob diese Bindungsfunktion beim Spender oder Empfänger ein Ersatzmarker für den Schutz vor dem Risiko einer CMV-Infektion bei diesen Patienten ist.
• Um festzustellen, ob der Erwerb einer CMV-spezifischen TBA bei Patienten mit aktiver CMV-Infektion nach allogener BMT oder PBSCT vor dem Risiko einer CMV-Erkrankung schützt.

ÜBERBLICK: Dies ist eine multizentrische Studie. Die Patienten werden zunächst in Kohorte 1 aufgenommen, bis eine ausreichende Anzahl von Stammzelltransplantationsempfängern (SCT) eingeschrieben ist. Die Patienten werden dann der Kohorte 2 zugeordnet, basierend auf einer dokumentierten Cytomegalovirus (CMV)-Infektion und einer präventiven Behandlung mit Ganciclovir innerhalb von 90 Tagen nach der SCT (Patienten, die zuvor der Kohorte 1 zugeordnet wurden, können der Kohorte 2 zugeordnet werden, wenn sie eine CMV-Infektion entwickeln).

• Kohorte 1: Den Patienten wird etwa an den Tagen 40, 90, 120, 150, 180 und 360 nach der Transplantation eine Blutprobe entnommen. Die Proben werden mittels HLA-Peptid-Tetramer-Bindungsassay (TBA) pp65 mit und ohne In-vitro-Stimulation (IVS) auf die Prävalenz CMV-spezifischer zytotoxischer T-Lymphozyten (CTL) analysiert (um die Entwicklung der CMV-Immunität zu bestimmen). Die an den Tagen 40 und 90 entnommenen Proben werden auch mittels Chromium Release Assay (CRA) analysiert. Patienten, bei denen der Verdacht besteht, dass sie eine CMV-Virämie entwickeln, können gemäß der klinischen Standardpraxis Ganciclovir erhalten.
• Kohorte 2: Den Patienten wird etwa an den Tagen 90, 120, 150, 180 und 360 nach der SCT eine Blutprobe entnommen. Die Proben werden durch TBApp65-Färbung und zur prospektiven Messung CMV-spezifischer CTL-Funktionen analysiert.

Alle Patienten werden an den Tagen 21 bis 100 nach der SCT einer routinemäßigen klinischen Überwachung auf CMV-Infektionen unterzogen. Messungen der CMV-Viruslast werden zweimal wöchentlich durch CMV-DNA-PCR-Assays an Blutzellen sowie Plasma- und Schalenfläschchen-Blutkulturen durchgeführt. In Kohorte 2 wird die CMV-Viruslast zusätzlich an den Tagen 90 (sofern nicht zuvor in Kohorte 1), 120, 150, 180 und 360 bestimmt. Die erhaltenen CMV-Infektionsdaten werden dann mit TBA- und CTL-Messungen unter Verwendung von HLA-spezifischen Tetrameren und IVS-induzierten Zytotoxizitätstests verglichen. Klinische Ereignisse wie Transplantat-gegen-Wirt-Krankheit, Grunderkrankungsstatus und eingriffsbedingte Komplikationen werden ebenfalls analysiert und mit den TBA-Ergebnissen korreliert.

Stromazellkulturen werden zum Zeitpunkt der Markernte von Knochenmarkspendern zur Verwendung als Zielzellen in CTL-Assays gewonnen. Es werden auch Spenderspeichelproben zum Nachweis einer CMV-Infektion mittels der Shell-Vial-Methode entnommen.