Misurazione dei cambiamenti nel sangue in pazienti ad alto rischio di infezione da citomegalovirus dopo aver subito un trapianto di midollo osseo da donatore o di cellule staminali del sangue periferico

OBIETTIVI:

• Documentare le caratteristiche quantitative di un test di legame del tetramero (TBA) HLA-peptide specifico per citomegalovirus (CMV) per linfociti T citotossici (CTL) in pazienti sottoposti a trapianto allogenico di midollo osseo (BMT) o trapianto di cellule staminali del sangue periferico (PBSCT) ).
• Confermare le condizioni ottimali di TBA per la caratterizzazione dei CTL in questi pazienti.
• Per confrontare i risultati TBA per questi pazienti con test convenzionali per le funzioni CTL.
• Confrontare il TBA specifico per CMV durante i primi 3 mesi dopo BMT o PBSCT allogenico e determinare se questa funzione di legame, nel donatore o nel ricevente, è un marcatore surrogato per la protezione dal rischio di infezione da CMV in questi pazienti.
• Per determinare se l'acquisizione di TBA specifico per CMV protegge dal rischio di malattia da CMV in pazienti con infezione da CMV attiva dopo BMT allogenico o PBSCT.

SCHEMA: Questo è uno studio multicentrico. I pazienti si accumulano inizialmente nella coorte 1 fino a quando non viene arruolato un numero sufficiente di destinatari di trapianto di cellule staminali (SCT). I pazienti vengono quindi accreditati alla coorte 2 in base all'infezione documentata da citomegalovirus (CMV) e al trattamento preventivo con ganciclovir entro 90 giorni dopo SCT (i pazienti precedentemente accreditati alla coorte 1 possono essere accreditati alla coorte 2 se sviluppano infezione da CMV).

• Coorte 1: i pazienti vengono sottoposti a prelievo di campioni di sangue approssimativamente nei giorni 40, 90, 120, 150, 180 e 360 ​​dopo il trapianto. I campioni vengono analizzati (per determinare lo sviluppo dell'immunità da CMV) per la prevalenza di linfociti T citotossici specifici per CMV (CTL) mediante test di legame del tetramero HLA-peptide (TBA) pp65, con e senza stimolazione in vitro (IVS). I campioni raccolti nei giorni 40 e 90 vengono analizzati anche mediante saggio di rilascio di cromo (CRA). I pazienti sospettati di sviluppare viremia da CMV possono ricevere ganciclovir secondo la pratica clinica standard.
• Coorte 2: i pazienti vengono sottoposti a prelievo di campioni di sangue approssimativamente nei giorni 90, 120, 150, 180 e 360 ​​dopo SCT. I campioni vengono analizzati mediante colorazione TBApp65 e per la misurazione prospettica delle funzioni CTL specifiche di CMV.

Tutti i pazienti sono sottoposti a sorveglianza clinica di routine per l'infezione da CMV nei giorni da 21 a 100 dopo SCT. Le misurazioni della carica virale del CMV vengono ottenute due volte alla settimana mediante analisi CMV-DNA PCR su cellule del sangue e plasma e emocolture in vial. Nella coorte 2, la carica virale del CMV viene determinata anche nei giorni 90 (se non precedentemente come parte della coorte 1), 120, 150, 180 e 360. I dati di infezione da CMV ottenuti vengono quindi confrontati con le misurazioni di TBA e CTL utilizzando tetrameri specifici per HLA e saggi di citotossicità indotta da IVS. Anche gli eventi clinici, come la malattia del trapianto contro l'ospite, lo stato della malattia di base e le complicanze correlate alla procedura, vengono analizzati e correlati ai risultati del TBA.

Le colture di cellule stromali sono ottenute da donatori di midollo al momento della raccolta del midollo per l'uso come cellule bersaglio nei saggi CTL. Si ottengono anche campioni di saliva da donatori per il rilevamento dell'infezione da CMV con il metodo shell-vial.