Měření změn v krvi u pacientů s vysokým rizikem infekce cytomegalovirem po transplantaci kostní dřeně dárce nebo transplantaci kmenových buněk periferní krve

CÍLE:

• Zdokumentovat kvantitativní charakteristiky cytomegalovirového (CMV) specifického testu HLA-peptid tetramer-binding assay (TBA) pro cytotoxické T lymfocyty (CTL) u pacientů, kteří podstoupili alogenní transplantaci kostní dřeně (BMT) nebo transplantaci kmenových buněk periferní krve (PBSCT ).
• Potvrdit optimální podmínky TBA pro charakterizaci CTL u těchto pacientů.
• Porovnat výsledky TBA u těchto pacientů s konvenčními testy na funkce CTL.
• Porovnat CMV-specifickou TBA během prvních 3 měsíců po alogenní BMT nebo PBSCT a určit, zda je tato vazebná funkce u dárce nebo příjemce zástupným markerem ochrany před rizikem CMV infekce u těchto pacientů.
• Zjistit, zda získání CMV-specifické TBA chrání před rizikem CMV onemocnění u pacientů s aktivní CMV infekcí po alogenní BMT nebo PBSCT.

PŘEHLED: Toto je multicentrická studie. Pacienti se zpočátku hromadí do kohorty 1, dokud není zařazen dostatečný počet příjemců transplantace kmenových buněk (SCT). Pacienti se poté nashromáždí do kohorty 2 na základě zdokumentované cytomegalovirové (CMV) infekce a preemptivní léčby ganciklovirem do 90 dnů po SCT (pacienti dříve nastřádaní do kohorty 1 mohou být zařazeni do kohorty 2, pokud se u nich rozvine CMV infekce).

• Kohorta 1: Pacienti podstupují odběr vzorků krve přibližně ve dnech 40, 90, 120, 150, 180 a 360 po transplantaci. Vzorky jsou analyzovány (pro stanovení vývoje imunity proti CMV) na prevalenci CMV-specifických cytotoxických T-lymfocytů (CTL) pomocí testu HLA-peptid tetramer-binding assay (TBA) pp65, s a bez in vitro stimulace (IVS). Vzorky odebrané ve dnech 40 a 90 se také analyzují testem uvolňování chrómu (CRA). Pacienti s podezřením na rozvoj CMV virémie mohou dostávat ganciklovir podle standardní klinické praxe.
• Kohorta 2: Pacienti podstupují odběr vzorků krve přibližně 90., 120., 150., 180. a 360. den po SCT. Vzorky jsou analyzovány barvením TBApp65 a pro prospektivní měření CMV-specifických funkcí CTL.

Všichni pacienti podstupují rutinní klinický dohled na infekci CMV ve dnech 21 až 100 po SCT. Měření virové zátěže CMV se provádí dvakrát týdně pomocí CMV-DNA PCR testů na krevních buňkách a plazmě a krevních kulturách z lahviček. V kohortě 2 se virová nálož CMV stanovuje také ve dnech 90 (pokud nebyla dříve součástí kohorty 1), 120, 150, 180 a 360. Získaná data CMV infekce se poté porovnají s měřeními TBA a CTL pomocí HLA-specifických tetramerů a testů cytotoxicity indukované IVS. Klinické události, jako je reakce štěpu proti hostiteli, stav základního onemocnění a komplikace související s procedurou, jsou také analyzovány a korelovány s výsledky TBA.

Stromální buněčné kultury se získají od dárců dřeně v době odběru dřeně pro použití jako cílové buňky v testech CTL. Vzorky slin dárců se také získají pro detekci CMV infekce metodou skořápky.