Medición de los cambios en la sangre en pacientes con alto riesgo de infección por citomegalovirus después de someterse a un trasplante de médula ósea de un donante o un trasplante de células madre de sangre periférica

OBJETIVOS:

• Documentar las características cuantitativas de un ensayo de unión de tetrámero de péptido HLA (TBA) específico de citomegalovirus (CMV) para linfocitos T citotóxicos (CTL) en pacientes que se han sometido a un trasplante alogénico de médula ósea (BMT) o un trasplante de células madre de sangre periférica (PBSCT). ).
• Confirmar las condiciones óptimas de TBA para la caracterización de CTL en estos pacientes.
• Comparar los resultados de TBA para estos pacientes con ensayos convencionales para funciones de CTL.
• Comparar TBA específica para CMV durante los primeros 3 meses después de BMT alogénico o PBSCT y determinar si esta función de unión, ya sea en el donante o en el receptor, es un marcador indirecto para la protección contra el riesgo de infección por CMV en estos pacientes.
• Determinar si la adquisición de TBA específica para CMV protege del riesgo de enfermedad por CMV en pacientes con infección activa por CMV después de un BMT alogénico o PBSCT.

ESQUEMA: Este es un estudio multicéntrico. Los pacientes se acumulan inicialmente en la cohorte 1 hasta que se inscriba un número suficiente de receptores de trasplante de células madre (SCT). Luego, los pacientes se acumulan en la cohorte 2 en función de la infección por citomegalovirus (CMV) documentada y el tratamiento preventivo con ganciclovir dentro de los 90 días posteriores al SCT (los pacientes que previamente se acumularon en la cohorte 1 pueden acumularse en la cohorte 2 si desarrollan una infección por CMV).

• Cohorte 1: los pacientes se someten a una extracción de muestras de sangre aproximadamente en los días 40, 90, 120, 150, 180 y 360 posteriores al trasplante. Las muestras se analizan (para determinar el desarrollo de la inmunidad al CMV) para determinar la prevalencia de linfocitos T citotóxicos (CTL) específicos del CMV mediante el ensayo de unión al tetrámero de péptido HLA (TBA) pp65, con y sin estimulación in vitro (IVS). Las muestras recogidas los días 40 y 90 también se analizan mediante el ensayo de liberación de cromo (CRA). Los pacientes con sospecha de desarrollar viremia por CMV pueden recibir ganciclovir de acuerdo con la práctica clínica habitual.
• Cohorte 2: los pacientes se someten a una extracción de muestras de sangre aproximadamente los días 90, 120, 150, 180 y 360 después del SCT. Las muestras se analizan mediante tinción con TBApp65 y para la medición prospectiva de las funciones CTL específicas de CMV.

Todos los pacientes se someten a vigilancia clínica de rutina para la infección por CMV en los días 21 a 100 después del SCT. Las mediciones de la carga viral de CMV se obtienen dos veces por semana mediante ensayos de PCR de ADN de CMV en células sanguíneas y cultivos de sangre en viales de plasma y cubierta. En la cohorte 2, la carga viral de CMV también se determina en los días 90 (si no fue previamente como parte de la cohorte 1), 120, 150, 180 y 360. Los datos de infección por CMV obtenidos se comparan luego con las mediciones de TBA y CTL utilizando tetrámeros específicos de HLA y ensayos de citotoxicidad inducidos por IVS. Los eventos clínicos, como la enfermedad de injerto contra huésped, el estado de la enfermedad subyacente y las complicaciones relacionadas con el procedimiento también se analizan y correlacionan con los resultados de la TBA.

Los cultivos de células estromales se obtienen de donantes de médula en el momento de la recolección de la médula para su uso como células diana en ensayos CTL. También se obtienen muestras de saliva de donantes para la detección de infección por CMV mediante el método de vial de concha.