Bestimmung des Verschlussdrucks in Lymphgefäßen (Occlusion)

Injektion des Kontrastmittels Indocyaningrün (ICG) ist ein Tricarbocyanin-Farbstoff, der häufig für hepatische, kardiovaskuläre, plastische und ophthalmologische Anwendungen verwendet wird. Es wird üblicherweise intravenös in einer Dosis zwischen 0,1 und 0,5 mg/kg injiziert. Nach der Verabreichung bindet ICG an Plasmaproteine, Lipoproteine ​​und Lipide und wird danach schnell und vollständig von der Leber aus dem Blut entfernt. ICG wird angeregt und emittiert Fluoreszenz im nahen Infrarot (ca. 760 nm).

In dieser Studie werden wir ICG in 25 ml reinem Wasser suspendieren und anschließend mit reinem Wasser verdünnen, um eine Endkonzentration von 1 mg/ml zu erreichen. Jeder Proband erhält eine subkutane Injektion von 0,2 ml verdünntem ICG (d.h. 200 ug), unter Verwendung einer subkutanen Nadel. Wir werden den Injektionspunkt standardisieren und ICG subkutan in den ersten Interdigitalraum injizieren, entsprechend der Injektionsmethode, die für die Lymphszintigraphie verwendet wird. Auf diese Weise heben wir systematisch denselben Bereich des oberflächlichen lymphatischen Netzwerks hervor.

Wir wissen, dass Lateralisation oder Händigkeit in den oberen Extremitäten mit funktionellen (und/oder anatomischen) Asymmetrien zusammenfallen. Um jegliche Voreingenommenheit zu vermeiden, wird der injizierte Arm bei gesunden Patienten randomisiert Kopf oder Zahl geworfen.

Akquisition von Fluoreszenzbildern Nach der Injektion werden die Injektionsstellen mit Klebeband abgedeckt, um eine Übersättigung der Kamera und eine Ausbreitung von ICG auf der Haut und einen unerwünschten fluoreszierenden Hintergrund auf den Bildern zu vermeiden. Um eine Fluoreszenzbildgebung des Arm-Lymphflusses zu erhalten, wird ein Nahinfrarot-Fluoreszenzbildgebungssystem verwendet (Photo Dynamic Eye oder PDE-Kamera von Hammamatsu Photonics – Japan). Die Kamera wird durch ein Haltesystem von Noga Tools in einer festen Position, 15 cm über dem Untersuchungsfeld, gehalten. Das verstärkte analoge Signal wird durch einen Konverter von Terratec (Modell Grabster AV 450 MX) in ein digitales Signal umgewandelt und an einen Monitor übertragen, der es ermöglicht, das Lymphnetz und den Lymphfluss in Echtzeit zu visualisieren. Bilder werden auf einem dedizierten externen Festplattenlaufwerk von Iomega, Modell MDHDU, aufgezeichnet.

Die Sitzung findet in einem dunklen Raum statt, um die Aufnahme von NIR-Fluoreszenzbildern zu ermöglichen.

Eine spezifische manuelle Lymphdrainage, die vom Erstautor und seinem Team unter NIRF-Feedback entwickelt wurde, wird unmittelbar nach der Injektion während der gesamten experimentellen Sitzung durchgeführt, um sicherzustellen, dass die untersuchten Lymphgefäße dauerhaft Lymphe enthalten. Die Lymphe wird mit der Hand des Bedieners von der Injektionsstelle bis zu einer Grenzlinie getrieben, die 5 cm vor dem distalen Ende der transparenten Manschette auf der Haut gezeichnet ist. Diese optimierte manuelle Lymphdrainage wird 3 Minuten lang durchgeführt, um die oberflächlichen Lymphgefäße im volaren Bereich des Arms leicht zu erkennen und den interessierenden Bereich zu markieren. Die MLD wird vom Erstautor für dieses Experiment standardisiert und besteht aus einer kontinuierlichen und wiederholten Sequenz, ausgeführt von distal nach proximal, von 3 "Auffüll"-Manövern, die am Injektionspunkt durchgeführt werden, gefolgt von 2 "Auswasch"-Manövern, die von ausgeführt werden Injektionspunkt bis zur Grenzlinie vor der Manschette. Dann werden zwei fluoreszierende Linien im Abstand von 50 mm auf die Haut gezeichnet, um den Bezugsraum einzugrenzen.

Die Manschette des transparenten Blutdruckmessgerätes wird in der Mitte des Arms platziert.

Das Blutdruckmessgerät ist mit einem Druckmesser verbunden, der mm Quecksilbersäule anzeigt (Testo® 510 Digitalmanometer Genauigkeit 0,1 mmHg.).

Die PDE-Kamera wird senkrecht auf der Hauptachse des Arms in Höhe der Manschettenmitte gehalten.

Um sicherzustellen, dass die beobachteten Lymphgefäße Lymphe enthalten, wird die fluoreszierende Lymphe während der gesamten Erfahrung mit der Hand des Bedieners von der Injektionsstelle bis zu einer auf der Haut 5 cm vor dem distalen Ende der transparenten Manschette gezogenen Grenzlinie getrieben .

• Erster Schritt: Als Baseline erfassen und beobachten wir den Lymphfluss unter der nicht aufgepumpten Manschette.
• Zweiter Schritt: Die Manschette wird auf 30 mmHg aufgepumpt, Bilder werden während drei Lymphflusspassagen aufgenommen.

Drei unabhängige Beobachter sind anwesend. Sie kontrollieren die drei Lymphbahnen, um die Zustimmung zum nächsten Druckschritt zu geben.

- Dritter Schritt: Wir erhöhen den aufgeblasenen Druck in Schritten von 10 mmHg und zeichnen bei jeder Erhöhung Bilder auf (bei jedem Schritt warten wir auf drei Lymphpassagen).

Das Experiment ist abgeschlossen, sobald wir den vollständigen Stopp der Lymphprogression unter der transparenten Manschette visuell feststellen. In diesem Moment wird der Druck um 10 mmHg reduziert, um die Rückkehr des Lymphflusses zu bestätigen. Nach diesem Schritt beobachten und zeichnen wir Bilder des Lymphgefäßes von der Injektionsstelle bis zur Extremitätenwurzel auf.