Bestemmelse af okklusionstryk i lymfekar (Occlusion)

Injektion af kontrastmiddel Indocyanine Green (ICG) er et tricarbocyaninfarvestof, der almindeligvis anvendes til lever-, kardiovaskulær-, plastikkirurgi- og oftalmologiske applikationer. Det injiceres normalt intravenøst ​​i en dosis på mellem 0,1 og 0,5 mg/kg. Efter administration binder ICG til plasmaproteiner, lipoproteiner og lipider og fjernes derefter hurtigt og fuldstændigt fra blodet af leveren. ICG er exciteret og udsender fluorescens i det nær-infrarøde (omkring 760 nm).

I denne undersøgelse vil vi suspendere ICG i 25 ml rent vand og efterfølgende fortyndes med rent vand for at nå en slutkoncentration på 1 mg/ml. Hvert individ vil modtage en subkutan injektion af 0,2 ml fortyndet ICG (f.eks. 200 µg), ved hjælp af en kanyle. Vi vil standardisere injektionspunktet og injicere ICG subkutant i det første interdigitale rum i henhold til injektionsmetoden, der bruges til lymfoscintigrafi. På den måde fremhæver vi systematisk det samme område af det overfladiske lymfe netværk.

Vi ved, at i de øvre lemmer falder lateralisering eller håndhed sammen med funktionelle (og/eller anatomiske) asymmetrier. For at undgå skævhed vil den injicerede arm hos raske patienter blive randomiseret med hoved eller hale.

Optagelse af fluorescensbilleder Efter injektion vil injektionsstederne blive dækket med tape for at undgå overmætning af kameraet og for at undgå spredning af ICG på huden og uønsket fluorescerende baggrund på billederne. For at opnå fluorescensbilleddannelse af armlymfestrømning vil et nær-infrarødt fluorescensbilleddannelsessystem blive brugt (Photo Dynamic Eye eller PDE-kamera fra Hammamatsu Photonics - Japan). Kameraet holdes i en fast position, 15 cm over undersøgelsesfeltet, af et holdesystem fra Noga Tools. Det forstærkede analoge signal omdannes til et digitalt signal af en konverter fra Terratec (Model Grabster AV 450 MX) og overføres til en monitor, som gør det muligt at visualisere lymfatisk netværk og lymfeflow i realtid. Billeder vil blive optaget på en dedikeret ekstern harddisk Iomega, model MDHDU.

Sessionen vil finde sted i et mørkt rum for at tillade optagelse af NIR-fluorescensbilleder.

Specifik manuel lymfedrænage, udviklet af den første forfatter og hans team under NIRF-feedback, udføres umiddelbart efter injektionen under hele forsøgssessionen for at være sikker på, at de undersøgte lymfekar permanent indeholder lymfe. Lymfen drives med hånden fra operatøren fra injektionspunktet til en grænselinje tegnet på huden 5 cm før den distale ekstremitet af den gennemsigtige manchet. Denne optimerede manuelle lymfedrænage vil blive udført i 3 minutter for let at detektere de overfladiske lymfekar ved armens volarregion og for at markere interesseområdet. MLD er standardiseret af den første forfatter til dette eksperiment og sammensat af en kontinuerlig og gentagen sekvens, udført fra distal til proksimal, af 3 "fill up" manøvrer realiseret på injektionspunktet, efterfulgt af 2 "wash out" manøvrer realiseret fra injektionspunktet til grænselinjen før manchetten. Derefter tegnes to fluorescerende linjer på huden i en afstand på 50 mm for at begrænse referencerummet.

Manchetten på det gennemsigtige blodtryksmåler er placeret midt på armen.

Blodtryksmåleren er forbundet til en trykmåler, der angiver mm kviksølv (Testo® 510 Digital Manometer præcision 0,1 mmHg.).

PDE-kameraet vil blive holdt vinkelret på armens hovedakse i niveau med midten af ​​manchetten.

For at sikre, at observerede lymfekar indeholder lymfe, drives den fluorescerende lymfe under al erfaring med operatørens hånd fra injektionspunktet til en grænselinje tegnet på huden 5 cm før den distale ekstremitet af den transparente manchet .

• Første trin: Som baseline registrerer og observerer vi lymfestrømmen under den ikke-oppustede manchet.
• Andet trin: manchetten pustes op ved 30 mmHg, billeder optages under tre lymfestrømspassager.

Tre uafhængige observatører er til stede. De styrer de tre lymfepassager for at give samtykke til at gå over til næste tryktrin.

- Tredje trin: Vi øger det oppustede tryk i trin på 10 mmHg ved hver stigning (venter på tre passager af lymfe ved hvert trin).

Eksperimentet er afsluttet, så snart vi visuelt bemærker det fuldstændige stop af lymfeprogression under den gennemsigtige manchet. I det øjeblik reduceres trykket med 10 mmHg for at validere tilbagevenden af ​​lymfestrømmen. Efter dette trin observerer og optager vi billeder af lymfekarret fra injektionspunktet op til lemmens rod.