Mecanismos inmunológicos del trasplante de células madre hematopoyéticas en la esclerosis múltiple

Nuestro objetivo es la elucidación de los mecanismos de acción del trasplante autólogo de células madre hematopoyéticas (HSCT) y la inmunoablación por ciclofosfamida en dosis altas en la esclerosis múltiple (EM).

La patogenia molecular de la esclerosis múltiple es poco conocida, aunque se cree que la destrucción inmunitaria de la mielina mediada por células T es un elemento importante. Presumimos, y los resultados de estudios previos sugieren, que la inmunoablación radical caracterizada por un profundo agotamiento de las células T puede detener la progresión de la enfermedad. Los pacientes con EM con mal pronóstico en función de la tasa de progresión y la refractariedad a los tratamientos aprobados (interferón-beta, acetato de glatiramer) se inscribirán en ensayos clínicos en la institución colaboradora (NWU-Dr. R. Burt; Dr. D Kerr, JHU) y recibirá ablación inmunitaria con ciclofosfamida y el anticuerpo Campath-1 seguido de reconstitución con células madre autólogas de sangre periférica, un procedimiento similar al trasplante autólogo de médula ósea, o tratamiento con dosis altas de ciclofosfamida sin rescate de células madre . Si bien la mortalidad general relacionada con el tratamiento en todo el mundo es de aproximadamente el 10 %, la institución colaboradora y los investigadores tienen un excelente historial de seguridad al realizar el procedimiento sin eventos adversos fatales después de haber trasplantado más de 30 trasplantes con un régimen anteriormente más agresivo que el que se utiliza. en uso ahora. El fundamento subyacente de este tratamiento es que la inmunoablación podría eliminar las células T reactivas a la mielina que, en individuos susceptibles a la enfermedad, pueden haber sido activadas por exposición previa a agentes ambientales u otros mecanismos adquiridos de desregulación inmunitaria.

En el estudio propuesto, planeamos abordar si el HSCT o la inmunoablación sin rescate de células madre actúan de manera beneficiosa en la EM a través de la erradicación de las células T reactivas a la mielina y la reconstitución de un repertorio inmunológico funcional y no autoinmune. Para lograr este objetivo, compararemos la reactividad de las células T de sangre periférica con los antígenos de mielina antes y después del tratamiento en 34 pacientes con EM. Paralelamente, para identificar posibles células mediadoras de enfermedades que no reconozcan estos antígenos de mielina, buscaremos células expandidas clonalmente en la sangre de pacientes con EM antes del tratamiento empleando análisis moleculares del repertorio de receptores de células T. Los clones de células T expandidas se rastrearán durante el seguimiento posterior al trasplante de los pacientes. Si la erradicación de ciertos clonotipos resultantes de la inmunoablación se correlaciona con la remisión de la enfermedad, intentaremos aislar estas células en cultivo a partir de muestras de pretratamiento y determinar su especificidad utilizando bibliotecas de péptidos combinatorios. Usaríamos el mismo enfoque en caso de reaparición o nuevas expansiones clonales concomitantes a las recaídas de la enfermedad. Combinaremos estos estudios con un enfoque más amplio e imparcial que emplea tecnología de micromatrices para identificar posibles cambios en los perfiles de expresión génica. Este enfoque también puede conducir a la identificación de nuevas dianas terapéuticas para el tratamiento farmacológico.