Mecanismos Imunológicos do Transplante de Células Tronco Hematopoiéticas na Esclerose Múltipla

Nosso objetivo é a elucidação dos mecanismos de ação do transplante autólogo de células-tronco hematopoiéticas (TCTH) e da imunoablação por altas doses de ciclofosfamida na esclerose múltipla (EM).

A patogênese molecular da esclerose múltipla é mal compreendida, embora a destruição imunológica da mielina mediada por células T seja considerada um elemento importante. Nossa hipótese, e os resultados de estudos anteriores sugerem, que a imunoablação radical caracterizada por uma depleção profunda de células T pode interromper a progressão da doença. Pacientes com EM com mau prognóstico com base na taxa de progressão e refratariedade aos tratamentos aprovados (interferon-beta, acetato de glatiramer) serão inscritos em ensaios clínicos na instituição colaboradora (NWU-Dr. R. Burt; Dr. D Kerr, JHU) e receberá ablação imunológica com ciclofosfamida e o anticorpo Campath-1, seguida de reconstituição com células-tronco autólogas do sangue periférico, um procedimento semelhante ao transplante autólogo de medula óssea ou tratamento com altas doses de ciclofosfamida sem resgate de células-tronco . Embora a mortalidade geral relacionada ao tratamento em todo o mundo seja de aproximadamente 10%, a instituição colaboradora e os investigadores têm um excelente histórico de segurança na realização do procedimento sem eventos adversos fatais após terem realizado mais de 30 transplantes com um regime anteriormente mais agressivo do que o que é em uso agora. A justificativa subjacente para este tratamento é que a imunoablação poderia eliminar as células T reativas à mielina que, em indivíduos suscetíveis à doença, podem ter sido ativadas por exposição prévia a agentes ambientais ou outros mecanismos adquiridos de desregulação imune.

No estudo proposto, planejamos avaliar se o TCTH ou a imunoablação sem resgate de células-tronco atuam beneficamente na EM por meio da erradicação de células T reativas à mielina e da reconstituição de um repertório imunológico funcional e não autoimune. Para atingir esse objetivo, compararemos as reatividades das células T do sangue periférico aos antígenos da mielina antes e após o tratamento em 34 pacientes com EM. Paralelamente, para identificar potenciais células mediadoras de doenças que não reconhecem esses antígenos de mielina, buscaremos células clonalmente expandidas no sangue de pacientes com EM antes do tratamento empregando análise molecular do repertório de receptores de células T. Os clones de células T expandidas serão rastreados durante o acompanhamento pós-transplante dos pacientes. Se a erradicação de certos clonótipos resultantes da imunoablação se correlacionar com a remissão da doença, tentaremos isolar essas células em cultura de amostras pré-tratamento e determinar sua especificidade usando bibliotecas combinatórias de peptídeos. Usaríamos a mesma abordagem em caso de reaparecimento ou novas expansões clonais concomitantes a recidivas da doença. Combinaremos esses estudos com uma abordagem mais ampla e imparcial que emprega a tecnologia de microarray para identificar possíveis mudanças nos perfis de expressão gênica. Esta abordagem também pode levar à identificação de novos alvos terapêuticos para o tratamento farmacológico.