Consommation d'alcool et de cannabis chez les femmes enceintes slovènes

L'objectif de l'étude est de déterminer la prévalence de la consommation d'alcool et de cannabis chez les femmes enceintes slovènes. La consommation d'alcool et de drogues pendant la grossesse a des effets significatifs sur le fœtus et entraîne des conséquences sanitaires à court et à long terme. L'une des conséquences les plus graves est le syndrome d'alcoolisation fœtale (SAF), caractérisé par des anomalies congénitales, des déficits cognitifs et des retards de croissance. Un autre effet sanitaire de l'exposition prénatale à l'alcool est le trouble du spectre de l'alcoolisation fœtale (TSAF), caractérisé par une altération du système nerveux central et conduisant à des problèmes comportementaux et cognitifs, un trouble du déficit de l'attention, une dysfonction exécutive et des troubles de la mémoire. Par conséquent, les enfants affectés par l'abus d'alcool maternel ont de moins bonnes performances scolaires, un niveau d'éducation inférieur, des troubles psychiatriques, des taux plus élevés de consommation d'alcool et de drogues, des taux de criminalité plus élevés, du chômage et d'autres problèmes qui pèsent sur les individus et la société. La consommation de drogues pendant la grossesse affecte à la fois la mère et le fœtus et est étroitement associée à des problèmes périnataux, des fausses couches, des naissances prématurées, un faible poids à la naissance, une petite circonférence crânienne et des malformations congénitales. La consommation maternelle de drogues pendant la grossesse provoque le syndrome d'abstinence néonatale ; elle affecte également le développement cérébral fœtal, ce qui peut entraîner des problèmes neuropsychiatriques à long terme. La prévalence de la consommation d'alcool et de drogues chez les femmes enceintes en Slovénie n'a pas été étudiée auparavant.

Le tractus gastro-intestinal adulte est densément peuplé de micro-organismes. Le microbiote, qui représente un inventaire taxonomique des genres et espèces microbiennes présents - principalement des bactéries - et, dans un sens plus large, le microbiome, qui englobe tous les micro-organismes (bactéries, archées, champignons, protozoaires, virus, éléments génétiques mobiles) ainsi que leurs gènes fonctionnels et métabolites présents dans l'intestin, varie considérablement dans sa composition entre les individus, selon la résolution d'observation. À la naissance, le tractus gastro-intestinal d'un enfant a une densité plus faible de cellules microbiennes, car un réseau de pressions sélectives commence à se développer uniquement au contact des sécrétions maternelles, de la nourriture et de l'environnement. Ces pressions incluent les produits fermentaires microbiens dérivés du lait maternel ou des préparations pour nourrissons, l'expression génique et la compétition microbienne, conduisant au développement dynamique du microbiome. Plusieurs facteurs influencent le développement du microbiome intestinal du nourrisson après la naissance, notamment le mode d'accouchement, le type d'alimentation, la prématurité, l'utilisation d'antibiotiques et d'autres facteurs environnementaux. Des preuves croissantes indiquent également l'influence de facteurs prénataux, tels que le diabète gestationnel et l'obésité, les infections, le stress et l'alimentation maternelle. Un nombre croissant d'études démontrent en outre qu'un microbiote altéré pendant la grossesse et la petite enfance peut affecter le développement cérébral et le comportement plus tard dans la vie via l'axe intestin-cerveau. L'impact de la consommation d'alcool sur le microbiote intestinal a été principalement étudié chez les adultes, chez lesquels une réduction de la diversité α du microbiote a été observée. L'exposition prénatale à l'alcool peut influencer le microbiote du nouveau-né principalement par des altérations induites par l'alcool du microbiote maternel et, par conséquent, l'absorption des nutriments. L'analyse du méconium représente une opportunité unique pour étudier exclusivement les facteurs prénataux affectant le microbiome, car les facteurs postnataux n'influencent pas le microbiome du méconium. Wang et ses collègues ont étudié des paires mère-nouveau-né en analysant des échantillons de selles maternelles au troisième trimestre et des échantillons néonataux dans les 48 premières heures après la naissance. Ils ont démontré des différences significatives dans la composition du microbiote des mères ayant consommé de l'alcool et dans le microbiote de leurs nouveau-nés par rapport aux paires mère-nouveau-né où les mères ne consommaient pas d'alcool. Il n'existe que quelques études sur des modèles animaux qui ont confirmé des différences dans le microbiote intestinal de la progéniture adulte dont les mères ont reçu un régime contenant de l'alcool pendant la grossesse. À ce jour, aucune étude publiée n'a caractérisé le microbiome du méconium des nouveau-nés dont les mères ont consommé du cannabis.

Méthodes : La prévalence de la consommation d'alcool et de cannabis pendant la grossesse sera étudiée en collaboration avec l'Institut national de santé publique, l'Institut de médecine légale (IML) de la Faculté de médecine de l'Université de Ljubljana, l'Institut Jožef Stefan et le Département clinique de néonatologie de la Clinique pédiatrique du Centre clinique universitaire de Ljubljana, en utilisant trois méthodes différentes :

1. Une étude transversale sera menée sur un échantillon national représentatif d'échantillons de méconium. Les échantillons de méconium seront collectés dans les maternités de Slovénie. Les biomarqueurs de l'alcool et des drogues illicites seront déterminés dans les échantillons de méconium. La taille de l'échantillon de l'étude sera calculée en tenant compte de la population de la Slovénie, du nombre de naissances par an et de la prévalence estimée de la consommation d'alcool et de drogues pendant la grossesse. Les échantillons de méconium seront collectés de manière anonyme. Les couches contenant du méconium seront collectées dans des sacs spéciaux pour déchets par les professionnels prenant soin des nouveau-nés et des mères le premier jour après la naissance. Les couches pour l'échantillonnage du méconium seront prélevées aléatoirement dans les sacs ; l'échantillon sera étiqueté avec un numéro de série. Les données sur le sexe du nouveau-né, l'âge gestationnel (mature/prématuré), le type de naissance (vaginale/césarienne), l'utilisation d'antibiotiques pendant le travail et les maladies chroniques maternelles seront collectées de manière anonyme sans aucune autre donnée personnelle ou temporelle. Il y aura un groupe spécial de 100 échantillons de méconium provenant d'une maternité, où nous appairerons le questionnaire de la mère et l'échantillon de méconium. Pour cela, nous demanderons la permission de la mère. Ici aussi, il n'y aura pas de collecte de données personnelles, l'échantillon de méconium et le questionnaire de la mère seront appairés via un code. Les échantillons seront analysés au laboratoire de toxicologie de l'IML. Pour l'étude, une nouvelle méthode analytique pour l'examen du méconium sera introduite en Slovénie.
2. Une enquête nationale sur le mode de vie sera menée dans les maternités slovènes, incluant des questions sur la consommation d'alcool et de drogues pendant la grossesse. L'enquête sera anonyme et non liée à l'échantillonnage de méconium ; la participation à l'enquête sera volontaire. Les femmes auront accès à l'enquête en ligne, après avoir reçu des informations sur l'objectif de l'étude, la méthode utilisée pour garantir l'anonymat et les méthodes de collecte.
3. Analyse du microbiome : tous les échantillons de méconium qui seront positifs aux métabolites de l'alcool et du cannabis, ainsi que deux échantillons de méconium négatifs pour chaque échantillon de méconium positif, seront inclus dans l'analyse de la composition du microbiome du méconium. Dans la partie finale de l'étude - la comparaison du microbiome - tous les échantillons de méconium positifs aux métabolites de l'alcool ou du cannabis seront inclus. L'analyse du microbiome sera réalisée dans la phase finale de l'étude dans le cadre du consortium du projet Million Microbiomes from Humans et de la base de données métabolomiques slovène (en préparation). Les données moléculaires obtenues par séquençage métagénomique seront analysées sur l'infrastructure de supercalcul slovène (Vega, Maister) à l'aide d'outils développés et utilisés sur le réseau de supercalcul par le groupe interdisciplinaire. Nous générerons des matrices taxonomiques de bactéries, archées, champignons, protozoaires et virus à ADN ; des matrices de diversité (35 indices de diversité) ; des matrices de gènes fonctionnels (20 millions de groupes) ; des matrices de réactions enzymatiques (500 000 catégories) ; des matrices de voies métaboliques (100 000 variables) ; et des matrices de métabolites (1 000 variables). Les données collectées et leur transformation de formats moléculaires en formats numériques serviront de base pour l'apprentissage automatique (standardisation, normalisation, évaluation de la séparation des échantillons et de la performance de classification utilisant différents algorithmes et hyperparamètres), l'identification de réseaux de biomarqueurs (n > 100) et l'analyse statistique non paramétrique du microbiome intestinal.

Analyse statistique : L'analyse statistique des données sera réalisée à l'aide du logiciel IBM SPSS Statistics 25. Des méthodes statistiques descriptives seront utilisées pour caractériser la population de femmes postpartum participant à l'enquête et pour résumer les données collectées. La prévalence de la consommation d'alcool ou de cannabis chez les femmes enceintes sera calculée sur la base du nombre d'échantillons de méconium positifs aux métabolites de l'alcool ou du cannabis. La prévalence de la consommation d'alcool et de cannabis basée sur l'auto-déclaration sera calculée séparément. Les données moléculaires obtenues de l'analyse du microbiome seront converties en données numériques et utilisées pour l'apprentissage automatique (standardisation, normalisation, évaluation de la séparation des échantillons et de la performance de classification utilisant différents algorithmes et hyperparamètres), l'identification de réseaux de biomarqueurs (n > 100) et l'analyse statistique non paramétrique du microbiome intestinal, comme mené par le groupe interdisciplinaire. Les données obtenues seront ensuite comparées statistiquement entre le groupe d'échantillons de méconium positifs aux métabolites de l'alcool et du cannabis et le groupe d'échantillons de méconium dans lesquels ces métabolites étaient absents.

Résultats attendus : Nous visons à déterminer la prévalence de la consommation d'alcool et de drogues chez les femmes enceintes slovènes. Les données sur les métabolites de l'alcool et des drogues obtenues à partir des échantillons de méconium seront comparées aux résultats de l'enquête, dans laquelle la prévalence de la consommation d'alcool et de drogues sera déterminée par auto-déclaration. De cette manière, nous pourrons évaluer la fiabilité de l'auto-déclaration. Les résultats de l'étude nous permettront d'évaluer la prévalence du SAF et du TSAF en Slovénie, nous aideront à développer une stratégie pour sensibiliser les professionnels et le public à la prévalence et aux conséquences de la consommation d'alcool et de drogues pendant la grossesse, à planifier des mesures préventives et des interventions dans le groupe cible des femmes enceintes, à établir des équipes de diagnostic pour le SAF et le TSAF. Concernant le microbiome, nous attendons une différence significative dans la composition du microbiome des échantillons de méconium qui sont positifs à l'alcool ou au cannabis par rapport aux échantillons qui sont négatifs (en tenant compte du sexe, de l'âge gestationnel, de l'exposition aux antibiotiques pendant l'accouchement et de la présence de maladies chroniques).