Consumo de Alcohol y Cannabis entre Mujeres Embarazadas Eslovenas

El objetivo del estudio es determinar la prevalencia del consumo de alcohol y cannabis entre las mujeres embarazadas eslovenas. El consumo de alcohol y drogas durante el embarazo tiene efectos significativos en el feto y conlleva consecuencias sanitarias a corto y largo plazo. Una de las consecuencias más graves es el síndrome alcohólico fetal (SAF), que se caracteriza por anomalías congénitas, deterioro cognitivo y déficits de crecimiento. Otro efecto sanitario de la exposición prenatal al alcohol es el trastorno del espectro alcohólico fetal (TEAF), que se caracteriza por la afectación del sistema nervioso central y conduce a problemas conductuales y cognitivos, trastorno por déficit de atención, disfunción ejecutiva y problemas de memoria. En consecuencia, los niños afectados por el abuso materno de alcohol tienen un peor rendimiento escolar, menor nivel educativo, trastornos psiquiátricos, tasas más altas de consumo de alcohol y drogas, mayores índices de criminalidad, desempleo y otros problemas que suponen una carga para los individuos y la sociedad. El consumo de drogas durante el embarazo afecta tanto a la madre como al feto y está estrechamente asociado con problemas perinatales, abortos espontáneos, partos prematuros, bajo peso al nacer, circunferencia craneal pequeña y malformaciones congénitas. El consumo materno de drogas durante el embarazo provoca el síndrome de abstinencia neonatal; también afecta al desarrollo cerebral fetal, lo que puede conducir a problemas neuropsiquiátricos a largo plazo. La prevalencia del consumo de alcohol y drogas entre las mujeres embarazadas en Eslovenia no se ha estudiado antes.

El tracto gastrointestinal adulto está densamente poblado por microorganismos. La microbiota, que representa un inventario taxonómico de los géneros y especies microbianos presentes, principalmente bacterias, y, en un sentido más amplio, el microbioma, que abarca todos los microorganismos (bacterias, arqueas, hongos, protozoos, virus, elementos genéticos móviles) junto con sus genes funcionales y metabolitos presentes en el intestino, varía considerablemente en su composición entre individuos, dependiendo de la resolución de la observación. Al nacer, el tracto gastrointestinal de un niño tiene una menor densidad de células microbianas, ya que una red de presiones selectivas comienza a desarrollarse solo tras el contacto con las secreciones maternas, los alimentos y el entorno. Estas presiones incluyen productos fermentativos microbianos derivados de la leche materna o la fórmula infantil, la expresión génica y la competencia microbiana, lo que conduce al desarrollo dinámico del microbioma. Varios factores influyen en el desarrollo del microbioma intestinal infantil después del nacimiento, incluidos el modo de parto, el tipo de alimentación, la prematuridad, el uso de antibióticos y otros factores ambientales. Cada vez hay más pruebas que apuntan a la influencia de factores prenatales, como la diabetes gestacional y la obesidad, las infecciones, el estrés y la dieta materna. Un número creciente de estudios demuestra además que una microbiota alterada durante el embarazo y la primera infancia puede afectar al desarrollo cerebral y al comportamiento más adelante en la vida a través del eje intestino-cerebro. El impacto del consumo de alcohol en la microbiota intestinal se ha estudiado principalmente en adultos, en quienes se ha observado una reducción en la diversidad α de la microbiota. La exposición prenatal al alcohol puede influir en la microbiota del recién nacido principalmente a través de alteraciones inducidas por el alcohol en la microbiota materna y, en consecuencia, en la absorción de nutrientes. El análisis del meconio representa una oportunidad única para estudiar exclusivamente factores prenatales que afectan al microbioma, ya que los factores posnatales no influyen en el microbioma del meconio. Wang y sus colegas estudiaron parejas madre-recién nacido analizando muestras de heces maternas en el tercer trimestre y muestras neonatales dentro de las primeras 48 horas después del nacimiento. Demostraron diferencias significativas en la composición de la microbiota de las madres que consumían alcohol y en la microbiota de sus recién nacidos en comparación con las parejas madre-recién nacido en las que las madres no consumían alcohol. Solo hay unos pocos estudios en modelos animales que han confirmado diferencias en la microbiota intestinal de la descendencia adulta cuyas madres fueron alimentadas con una dieta que contenía alcohol durante el embarazo. Hasta la fecha, no hay estudios publicados que hayan caracterizado el microbioma del meconio de recién nacidos cuyas madres consumieron cannabis.

Métodos: La prevalencia del consumo de alcohol y cannabis durante el embarazo se investigará en colaboración con el Instituto Nacional de Salud Pública, el Instituto de Medicina Forense (IMF) de la Facultad de Medicina de la Universidad de Liubliana, el Instituto Jožef Stefan y el Departamento Clínico de Neonatología de la Clínica Pediátrica del Centro Clínico Universitario de Liubliana, utilizando tres métodos diferentes:

1. Se realizará un estudio transversal sobre una muestra representativa a nivel nacional de muestras de meconio. Las muestras de meconio se recogerán de los hospitales de maternidad en Eslovenia. Se determinarán biomarcadores de alcohol y drogas ilícitas en las muestras de meconio. El tamaño de la muestra del estudio se calculará considerando la población de Eslovenia, el número de nacimientos por año y la prevalencia estimada del consumo de alcohol y drogas durante el embarazo. Las muestras de meconio se recogerán de forma anónima. Los pañales con meconio se recogerán en bolsas de residuos especiales por profesionales que atienden a los recién nacidos y a las madres el primer día después del nacimiento. Los pañales para el muestreo de meconio se tomarán aleatoriamente de las bolsas; la muestra se etiquetará con un número de serie. Los datos sobre el sexo del neonato, la edad gestacional (a término/prematuro), el tipo de parto (vaginal/cesárea), el uso de antibióticos durante el parto y las enfermedades crónicas maternas se recopilarán de forma anónima sin ningún otro dato personal o temporal. Habrá un grupo especial de 100 muestras de meconio de un hospital de maternidad, donde emparejaremos el cuestionario de la madre y la muestra de meconio. Para ello, pediremos el permiso de la madre. Aquí tampoco se recopilarán datos personales, la muestra de meconio y el cuestionario de la madre se emparejarán mediante un código. Las muestras se analizarán en el laboratorio de toxicología del IMF. Para el estudio, se introducirá en Eslovenia un nuevo método analítico para el examen del meconio.
2. Se llevará a cabo una encuesta nacional sobre el estilo de vida en los hospitales de maternidad eslovenos, incluyendo preguntas sobre el consumo de alcohol y drogas durante el embarazo. La encuesta será anónima y no estará relacionada con el muestreo de meconio; la participación en la encuesta será voluntaria. Se dará acceso a las mujeres a la encuesta en línea, después de recibir información sobre el objetivo del estudio, el método utilizado para garantizar el anonimato y los métodos de recopilación.
3. Análisis del microbioma: todas las muestras de meconio que den positivo para metabolitos de alcohol y cannabis, así como dos muestras de meconio negativas por cada muestra de meconio positiva, se incluirán en el análisis de la composición del microbioma del meconio. En la parte final del estudio, la comparación del microbioma, se incluirán todas las muestras de meconio positivas para metabolitos de alcohol o cannabis. El análisis del microbioma se llevará a cabo en la fase final del estudio dentro del marco del consorcio del Proyecto Millón de Microbiomas de Humanos y la Base de Datos Eslovena de Metabolómica (en preparación). Los datos moleculares obtenidos de la secuenciación metagenómica se analizarán en la infraestructura de supercomputación eslovena (Vega, Maister) utilizando herramientas desarrolladas y empleadas en la red de supercomputación por el grupo interdisciplinario. Generaremos matrices taxonómicas de bacterias, arqueas, hongos, protozoos y virus de ADN; matrices de diversidad (35 índices de diversidad); matrices de genes funcionales (20 millones de grupos); matrices de reacciones enzimáticas (500.000 categorías); matrices de rutas metabólicas (100.000 variables); y matrices de metabolitos (1.000 variables). Los datos recopilados y su transformación de formatos moleculares a numéricos servirán como base para el aprendizaje automático (estandarización, normalización, evaluación de la separación de muestras y el rendimiento de clasificación utilizando diferentes algoritmos e hiperparámetros), la identificación de redes de biomarcadores (n > 100) y el análisis estadístico no paramétrico del microbioma intestinal.

Análisis estadístico: El análisis estadístico de datos se realizará utilizando el paquete de software IBM SPSS Statistics 25. Se utilizarán métodos estadísticos descriptivos para caracterizar a la población de mujeres posparto que participan en la encuesta y para resumir los datos recopilados. La prevalencia del consumo de alcohol o cannabis entre las mujeres embarazadas se calculará en función del número de muestras de meconio positivas para metabolitos de alcohol o cannabis. La prevalencia del consumo de alcohol y cannabis basada en la autodeclaración se calculará por separado. Los datos moleculares obtenidos del análisis del microbioma se convertirán en datos numéricos y se utilizarán para el aprendizaje automático (estandarización, normalización, evaluación de la separación de muestras y el rendimiento de clasificación utilizando diferentes algoritmos e hiperparámetros), la identificación de redes de biomarcadores (n > 100) y el análisis estadístico no paramétrico del microbioma intestinal, tal como lo realiza el grupo interdisciplinario. Los datos obtenidos se compararán estadísticamente entre el grupo de muestras de meconio positivas para metabolitos de alcohol y cannabis y el grupo de muestras de meconio en las que estos metabolitos no estaban presentes.

Resultados esperados: Nuestro objetivo es determinar la prevalencia del consumo de alcohol y drogas entre las mujeres embarazadas eslovenas. Los datos sobre los metabolitos de alcohol y drogas obtenidos de las muestras de meconio se compararán con los resultados de la encuesta, en la que la prevalencia del consumo de alcohol y drogas se determinará mediante autodeclaración. De esta manera, podemos evaluar la fiabilidad de la autodeclaración. Los resultados del estudio nos permitirán evaluar la prevalencia del SAF y el TEAF en Eslovenia, ayudarnos a desarrollar una estrategia para concienciar a los profesionales y al público sobre la prevalencia y las consecuencias del consumo de alcohol y drogas durante el embarazo, planificar medidas preventivas e intervenciones en el grupo objetivo de mujeres embarazadas, y establecer equipos de diagnóstico para el SAF y el TEAF. En cuanto al microbioma, esperamos una diferencia significativa en la composición del microbioma de las muestras de meconio que den positivo para alcohol o cannabis en comparación con las muestras que den negativo (teniendo en cuenta el sexo, la edad gestacional, la exposición a antibióticos durante el parto y la presencia de enfermedades crónicas).