1型糖尿病におけるフルクトースとグルコースおよびTAS1R2 (TAS1R2)

前書き：

フルクトースは門脈を介して肝臓に輸送され、そこで肝細胞に急速に取り込まれ、酵素フルクトキナーゼによるインスリン作用とは無関係にフルクトース-1-リン酸にリン酸化されます。 したがって、通常の条件下では、フルクトースは主にグルコース、グリコーゲン、乳酸に変換され、トリグリセリドにもわずかに変換されます。 しかし、フルクトースを大量に摂取すると、高トリグリセリド血症が発生します。

ブドウ糖とは異なり、大量のフルクトースは、健康な被験者や制御されていない糖尿病患者の乳酸、ピルビン酸、および尿酸のレベルを上昇させる可能性があります. しかし、尿酸には酸化促進作用もあります。 おそらく、尿酸は酸化的損傷を中和します。

甘いものは糖尿病患者にとって非常に魅力的であり、これは遺伝的変異によるものと考えられます。 甘味受容体は、2 つのタンパク質サブユニット、T1R2 (味覚受容体、タイプ 1、メンバー 2) と味覚受容体、タイプ 1、メンバー 3 のヘテロ二量体であり、ヒト染色体 1 に位置します。 T1R2 は、味覚受容体、タイプ 1、メンバー 3 が味覚受容体、タイプ 1、メンバー 1 と二量体化するときに、うま味の検出にも関与するため、甘味知覚に固有の成分です。

現時点では、1 型糖尿病患者の TAS1R バリアントを評価した研究はありません。

実験計画：

これは、1 型糖尿病の成人 30 人を対象に研究センター (Clementino Fraga Filho University Hospital) で実施された無作為化、単盲検、双方向、クロスオーバー研究です。

すべてのボランティアは、通常の食事記録を完成させ、毛細血管血糖を記録し、激しい身体活動、アルコール、高脂肪食品、および過剰なカフェインを各研究日の 24 日前から控えるように指示されます。

各研究日の前日に、生化学的結果に影響を与える可能性のある出来事（感染症、インフルエンザ、発熱など）についてボランティアに電話で尋ねます。 一部が検出された場合、テストは再スケジュールされます。

基礎インスリン用量は保持され、ボーラスインスリンはその日の朝には許可されません。 朝の血糖目標レベルが70〜200 mg / dLの場合、研究日が実行されます。

すべてのボランティアは、1 週間離れた同じ被験者での 2 つの研究を使用して、単一盲検の無作為化された方法で双方向クロスオーバーを評価されます。 研究は 2 日間に分けられました (順序は無作為化されました): 1 日はグルコースを含む溶液で、もう 1 日はグルコースを含む溶液で。

被験体は、毛細血管血糖を試験し、動脈静脈血サンプルを収集し、食欲を評価するために、試験日の約7時間で研究センター(栄養研究所)に入院した。 これらの測定の後、彼らはテスト溶液を素早く飲みます。

ソリューションの嗜好性評価は、直後に評価されます。 食欲の感覚は、溶液の直前と溶液の 70、130、および 180 分後に VAS スコアを使用してテストされます。

2番目の動脈静脈血サンプルは、溶液の185分後に採取し、溶液の前と30、90、120、および180分後に毛細血管の血糖をテストします。

両方のテストを完了していないボランティアは除外しました。

試験溶液 溶液は、75gのブドウ糖または同量の果糖を200mLの水で希釈したものです。これらの量は、通常の経口ブドウ糖負荷試験を考慮して計算されました。 さらに、現時点では、1 型糖尿病患者のフルクトースの吸収能力を示す研究はありませんが、健康な成人のフルクトースの吸収能力は 30g から 40g までさまざまであることが示唆されています。

通常の食事の評価 通常の食事摂取量は、3 日間の食事記録から評価され、1 日研究で 24 時間のリコールが実行されます。 すべての食事記録は、ローカルの栄養ソフトウェアを使用して分析されます。

人体測定評価 BMI は、キログラム単位の体重をメートル単位の身長の 2 乗で割って計算されます。

胴囲は、通常の呼気後、肋骨下部縁と腸骨稜の間の中間で 0.1cm 単位で計算された 2 つの測定値の平均として決定されます。

体組成は、四極生体電気インピーダンス（Biodynamic Model 450）によって測定されます。

生化学的評価 すべての動脈静脈血サンプルは、訓練を受けた医療専門家が研究センター (栄養研究所) で使い捨ての材料を使用して収集し、臨床分析研究所 (連邦大学にある) で分析します。

グリコシル化ヘモグロビン、総コレステロール、HDL、クレアチニン、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、アラニンアミノトランスフェラーゼ、およびクレアチニンを評価して、研究集団を特徴付けます。 グルコース、トリグリセリド、尿酸、ピルビン酸、乳酸、およびマロンアルデヒドは、溶液の摂取前と摂取後180分で測定されます

グリコシル化ヘモグロビンは、高速液体クロマトグラフィーによって実行されます。 グルコース、総コレステロール、HDL、およびトリグリセリドは、酵素比色法によって測定されます。 LDLコレステロールは、フリーデワルドの式で計算されます。 クレアチニンは、Cockcroft-Gault を使用してクレアチニン クリアランスを計算する動力学的比色法によって評価されます。 ピルビン酸、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、アラニンアミノトランスフェラーゼは、紫外速度論法によって測定されます。 酵素動力学法による尿酸と乳酸の評価。 マロンアルデヒドは、酵素結合免疫吸着アッセイによって検出されます。

ジェノタイピング デオキシリボ核酸 (DNA) は、DNA マルチサンプルキット (Applied Biosystems®) を使用して全血から分離され、サンプルは研究所 (分子生物学研究所、連邦大学) での増幅アッセイまで摂氏 -20 度で保存されました。

TAS1R2 遺伝子の Ile191Val (rs35874116) 多型は、TaqMan 対立遺伝子識別アッセイ (ABI 番号 C_55646_20; Applied Biosystems、カリフォルニア州フォスターシティ) を使用して、ABI 7000 シーケンス検出システム (Applied Biosystems) でのリアルタイムポリメラーゼ連鎖反応を使用して検出されます。 . ポリメラーゼ連鎖反応の条件は、摂氏 95 度で 10 分間、摂氏 95 度で 15 秒間、摂氏 60 度で 1 分間を 40 サイクルです。 ジェノタイピングは、各 30 ウェル プレートで陽性対照被験者を使用し、100% 一致したサンプルの ≥ 5% を再実行することによって検証されます。

食欲と嗜好性の評価 視覚的アナログスケールを使用して、空腹感、満腹感、満腹感、予想される食物消費、および試験溶液の嗜好性を評価し、食欲の感覚は、嗜好性、味、後味、匂い、および溶液の視覚的魅力を評価します。

どちらの評価も視覚的アナログ スケールで構成されています。これは、症状の強さを視覚的に表すために使用できる、事前に測定された 100 mm スケールです。 各スケールは、反対の感情記述子によってその端に固定されています。 ボランティアは、解決策について与えられた感情の強さを最もよく表している線に沿って縦の印を付けることによって、自分の感情を説明するように求められます. 適切なアンカーからのこのマークの距離が測定され、0 (なしまたは可能な限り最高) から 10 (可能な限り最悪) の範囲のスコアに変換されます。

糖尿病タイプ 1 の管理 研究者は、実験中のグルコース振動を避けるために、インスリン注入ポンプまたはインスリン類似体 (基礎: デテミルまたはグラルギン; ボーラス: リスプロ、グルリシンまたはアスパルト) を使用した基礎ボーラスレジメンにボランティアのみを含めました。

すべてのボランティアは、基礎インスリン用量を変更せず、朝のボーラスインスリンを服用しないように指示されます。 被験者は約 7 時間で研究センターに入院し、毛細血管血糖をテストします。目標血糖値が 70 ～ 200 mg/dL の場合、実験が行われます。

実験の前と最中に、Accu-Check® Active、Roche を使用して毛細血管の血糖値を 5 回テストし、グルコース ≥350 mg/dL でキャンセルします。 この場合、ボーラス補正インスリン投与を行います。

STATISTICAL 統計分析は、統計ソフトウェアと 5% の有意水準で実行されます。

量的変数は、平均および標準偏差として説明されます。 グループ間比較にはマンホイットニー検定を使用し、各グループの溶液の効果を比較するにはウィルコクソン検定を使用します。 スピアマンの相関係数と回帰も使用されます。