Fructose et glucose et TAS1R2 dans le diabète de type 1 (TAS1R2)

INTRODUCTION:

Le fructose est transporté via la veine porte vers le foie, où il est rapidement absorbé par les hépatocytes et phosphorylé en fructose-1-phosphate indépendamment de l'action de l'insuline par l'enzyme fructokinase. Ainsi, dans des conditions normales, le fructose est converti principalement en glucose, glycogène et lactate, et dans une faible mesure également en triglycérides. Cependant une hypertriglycéridémie a été observée lors de fortes consommations de fructose.

De grandes quantités de fructose, contrairement au glucose, peuvent entraîner une augmentation du taux de lactate, de pyruvate et d'acide urique chez les sujets sains et les patients atteints de diabète non contrôlé. Cependant, l'acide urique a également des propriétés pro-oxydantes. Il est possible que l'acide urique neutralise les dommages oxydatifs.

La douceur est très attrayante pour les patients diabétiques, probablement en raison de variantes génétiques. Le récepteur du goût sucré est un hétérodimère de 2 sous-unités protéiques, T1R2 (récepteur du goût, type 1, membre 2) et récepteur du goût, type 1, membre 3, situé sur le chromosome 1 humain. Le T1R2 est le composant spécifique à la perception du goût sucré car le récepteur du goût, type 1, membre 3 est également impliqué dans la détection de l'umami lorsqu'il se dimérise avec le récepteur du goût, type 1, membre 1.

À l'heure actuelle, aucune étude n'a évalué les variantes de TAS1R chez les personnes atteintes de diabète de type 1.

CONCEPTION EXPÉRIMENTALE:

Il s'agit d'une étude randomisée, en simple aveugle, à double sens et croisée menée au Centre de recherche (Hôpital universitaire Clementino Fraga Filho) auprès de 30 adultes atteints de diabète de type 1.

Tous les volontaires seront invités à remplir le dossier alimentaire habituel, à enregistrer leur glycémie capillaire et à s'abstenir d'activité physique vigoureuse, d'alcool, d'aliments riches en graisses et d'excès de caféine pendant 24 jours avant chaque jour d'étude.

Un jour avant chaque journée d'étude, nous appellerons les volontaires pour nous renseigner sur d'éventuels événements susceptibles d'influencer les résultats biochimiques (tels que : infections, grippe, fièvre). Si nous en détectons, le test sera reprogrammé.

Les doses d'insuline basale seront conservées et aucun bolus d'insuline ne sera autorisé le matin du jour de l'étude. La journée d'étude sera effectuée si le niveau cible de glycémie est compris entre 70 et 200 mg/dL le matin.

Tous les volontaires seront évalués par croisement bidirectionnel en simple aveugle, de manière randomisée, les deux études portant sur le même sujet, à 1 semaine d'intervalle. L'étude a été divisée en deux jours (dont l'ordre a été randomisé) : un jour avec une solution contenant du glucose et l'autre avec une solution contenant du glucose.

Les sujets ont été admis au centre de recherche (laboratoire nutritionnel) à environ 7 heures le jour de l'étude pour tester la glycémie capillaire, prélever un échantillon de sang veineux artériel, évaluer les sensations d'appétit. Après ces mesures, ils boiront rapidement la solution à tester.

Les cotes d'appétence de la solution seront évaluées immédiatement après. Les sensations d'appétit seront testées à l'aide des scores VAS immédiatement avant et 70, 130 et 180 minutes après la solution.

Le deuxième échantillon de sang veineux artériel sera prélevé 185 minutes après la solution et testera la glycémie capillaire avant et 30, 90, 120 et 180 minutes après la solution.

Nous avons exclu les volontaires qui ne complètent pas les deux tests.

SOLUTION TEST La solution contiendra 75 g de glucose ou la même quantité de fructose diluée dans 200 ml d'eau. Ces quantités ont été calculées en tenant compte du test de tolérance au glucose oral habituel. De plus, pour le moment, aucune étude n'indique la capacité de capacité du fructose chez les patients atteints de diabète de type 1, cependant, il a été suggéré que la capacité d'absorption du fructose chez les adultes en bonne santé varie de 30 g à 40 g.

ÉVALUATION ALIMENTAIRE HABITUELLE L'apport alimentaire habituel sera évalué à partir des enregistrements d'alimentation de 3 jours et des rappels de 24 heures seront effectués dans l'étude de jour. Tous les dossiers alimentaires seront analysés à l'aide d'un logiciel nutritionnel local.

ÉVALUATION ANTHROPOMÉTRIQUE L'IMC sera calculé comme le poids corporel en kilogrammes divisé par le carré de la taille en mètres.

Le tour de taille sera déterminé comme la moyenne de deux mesures calculées au 0,1 cm le plus proche à mi-chemin entre le bord inférieur des côtes et la crête iliaque après une expiration normale.

La composition corporelle sera mesurée par impédance bioélectrique tétrapolaire (modèle biodynamique 450).

ÉVALUATION BIOCHIMIQUE Tous les échantillons de sang veineux artériel seront prélevés par des professionnels de la santé formés avec du matériel jetable dans le Centre de recherche (Laboratoire nutritionnel) et analysés au Laboratoire d'analyse clinique (situé à l'Université fédérale).

L'hémoglobine glycosylée, le cholestérol total, le HDL, la créatinine, l'aspartate aminotransférase, l'alanine aminotransférase et la créatinine seront évalués pour caractériser la population étudiée. Le glucose, les triglycérides, l'acide urique, l'acide pyruvique, le lactate et le malonaldéhyde seront mesurés avant et 180 min après l'ingestion de la solution

L'hémoglobine glycosylée sera réalisée par chromatographie liquide à haute performance. Le glucose, le cholestérol total, le HDL et les triglycérides seront mesurés par méthode colorimétrique enzymatique. Le cholestérol LDL sera calculé par l'équation de Friedewald. La créatinine sera évaluée par une méthode colorimétrique cinétique pour calculer la clairance de la créatinine à l'aide du Cockcroft-Gault. L'acide pyruvique, l'aspartate aminotransférase et l'alanine aminotransférase seront déterminés par la méthode cinétique ultraviolette. Acide urique et lactate évalués par la méthode cinétique enzymatique. Le malonaldéhyde sera détecté par dosage immuno-enzymatique.

GÉNOTYPAGE L'acide désoxyribonucléique (ADN) sera isolé du sang total à l'aide du kit multi-échantillons d'ADN (Applied Biosystems®) et les échantillons seront stockés à -20 degrés Celsius jusqu'aux tests d'amplification dans un laboratoire de recherche (Laboratoire de biologie moléculaire, Université fédérale).

Le polymorphisme Ile191Val (rs35874116) dans le gène TAS1R2 sera détecté à l'aide d'un test de discrimination allélique TaqMan (numéro ABI C_55646_20 ; Applied Biosystems, Foster City, CA) avec réaction en chaîne par polymérase en temps réel sur un système de détection de séquence ABI 7000 (Applied Biosystems) . Les conditions de la réaction en chaîne par polymérase sont de 95 degrés Celsius pendant 10 min et 40 cycles de 95 degrés Celsius pendant 15 s et 60 degrés Celsius pendant 1 min. Le génotypage sera vérifié en utilisant des sujets témoins positifs dans chaque plaque de 30 puits ainsi qu'en réexécutant ≥ 5 % des échantillons, qui étaient concordants à 100 %.

ÉVALUATION DE L'APPÉTIT ET DE LA PALATABILITÉ Des échelles visuelles analogiques seront utilisées pour évaluer la faim, la satiété, la plénitude, la consommation alimentaire potentielle et la palatabilité de la solution d'essai, et les sensations d'appétit seront évaluées la palatabilité, le goût, l'arrière-goût, l'odeur et l'attrait visuel des solutions.

Les deux évaluations consistent en une échelle visuelle analogique qui est une échelle prémesurée de 100 mm qui peut être utilisée pour représenter visuellement l'intensité des symptômes. Chaque échelle est ancrée à ses extrémités par des descripteurs de sentiments opposés. Les volontaires seront invités à décrire leurs sentiments en plaçant une marque verticale le long de la ligne qui représente le mieux l'intensité d'un sentiment donné à propos de la solution. La distance de cette marque à l'ancrage approprié est mesurée puis traduite en un score allant de 0 (aucun ou le meilleur possible) à 10 (le pire possible).

GESTION DU DIABÈTE DE TYPE 1 Les investigateurs n'ont inclus que des volontaires dans un régime basal-bolus avec une pompe à perfusion d'insuline ou des analogues de l'insuline (basal : détémir ou glargine ; bolus : lispro, glulisine ou aspart) pour éviter les oscillations de glucose pendant l'expérience.

Tous les volontaires seront informés de ne pas modifier les doses d'insuline basale et de ne pas prendre le bolus d'insuline du matin. Les sujets seront admis au Centre de recherche à environ 7 heures et testeront leur glycémie capillaire, et si le niveau cible de glycémie se situe entre 70 et 200 mg/dL, l'expérience sera réalisée.

Avant et pendant l'expérience, nous testerons les niveaux de glucose sanguin capillaire 5 fois en utilisant Accu-Check® Active, Roche, et seront annulés en glucose ≥350 mg/dL. Dans ce cas, on prendra une dose d'insuline de correction en bolus.

STATISTIQUES Des analyses statistiques seront effectuées avec un logiciel statistique et un seuil de signification de 5 %.

Les variables quantitatives seront décrites comme la moyenne et l'écart type. Le test de Mann-Whitney sera utilisé pour la comparaison entre les groupes et le test de Wilcoxon pour comparer les effets de la solution dans chaque groupe. Le coefficient de corrélation et la régression de Spearman seront également utilisés.