1 型糖尿病中的果糖和葡萄糖以及 TAS1R2 (TAS1R2)

介绍：

果糖通过门静脉转运至肝脏，在那里被肝细胞迅速吸收并磷酸化为果糖-1-磷酸，而不受果糖激酶的胰岛素作用。 因此，在正常情况下，果糖主要转化为葡萄糖、糖原和乳酸，并在小范围内转化为甘油三酯。 然而，在大量摄入果糖期间会发生高甘油三酯血症。

与葡萄糖不同，大量果糖可能导致健康受试者和未控制的糖尿病患者的乳酸、丙酮酸和尿酸水平升高。 然而，尿酸也具有促氧化特性。 尿酸可能会中和氧化损伤。

可能由于遗传变异，甜味对糖尿病患者非常有吸引力。 甜味受体是位于人类 1 号染色体上的 2 个蛋白质亚基 T1R2（味觉受体，1 型，成员 2）和味觉受体，1 型，成员 3 的异二聚体。 T1R2 是甜味感知特有的成分，因为味觉受体 1 型成员 3 在与味觉受体 1 型成员 1 二聚化时也参与鲜味的检测。

目前，没有研究评估 1 型糖尿病患者的 TAS1R 变异。

实验设计：

这是一项随机、单盲、双向、交叉研究，在研究中心（Clementino Fraga Filho 大学医院）进行，包括 30 名患有 1 型糖尿病的成年人。

所有志愿者将被指导完成通常的饮食记录，记录他们的毛细血管血糖，并在每个研究日之前的 24 天内避免剧烈的身体活动、酒精、高脂肪食物和过量的咖啡因。

每个研究日的前一天，我们会打电话给志愿者询问可能影响生化结果的事件（如：感染、流感、发烧）。 如果我们检测到一些，测试将被重新安排。

将保留基础胰岛素剂量，并且在当天研究的早晨不允许推注胰岛素。 如果早上的血糖目标水平在 70 和 200 mg/dL 之间，则将执行研究日。

所有志愿者将以单盲、随机的方式接受双向交叉评估，两项研究针对同一受试者，间隔 1 周。 该研究分为两天（随机顺序）：一天使用含葡萄糖的溶液，另一天使用含葡萄糖的溶液。

受试者在研究当天大约 7 小时被送往研究中心（营养实验室），以测试毛细血管血糖、采集动脉静脉血样、评估食欲感觉。 在这些测量之后，他们将迅速饮用测试溶液。

之后将立即评估溶液的适口性等级。 食欲感觉将在解决方案之前和解决方案之后 70、130 和 180 分钟使用 VAS 评分进行测试。

第二次动脉静脉血样将在溶液后 185 分钟采集，并在溶液前和溶液后 30、90、120 和 180 分钟测试毛细血管血糖。

我们排除了未完成两项测试的志愿者。

测试溶液 溶液将含有 75 克葡萄糖或等量的果糖稀释在 200 毫升水中。这些量是根据通常的口服葡萄糖耐量测试计算得出的。 此外，目前还没有研究表明1型糖尿病患者对果糖的吸收能力，但有研究表明，健康成年人对果糖的吸收能力在30g至40g之间。

日常饮食评估 日常饮食摄入量将根据 3 天饮食记录进行评估，并在日间研究中进行 24 小时回顾。 所有饮食记录都将使用当地的营养软件进行分析。

人体测量学评估 BMI 将计算为以千克为单位的体重除以以米为单位的身高的平方。

腰围将被确定为两次测量的平均值，计算到正常呼气后肋骨下缘和髂嵴之间最接近的 0.1 厘米中间。

身体成分将通过四极生物电阻抗（生物动力学模型 450）测量。

生化评估 所有动脉和静脉血样都将由训练有素的医疗保健专业人员在研究中心（营养实验室）使用一次性材料收集，并在临床分析实验室（位于联邦大学）进行分析。

将评估糖化血红蛋白、总胆固醇、HDL、肌酐、天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶和肌酐以表征研究人群。 在摄入溶液之前和之后 180 分钟测量葡萄糖、甘油三酯、尿酸、丙酮酸、乳酸和丙二醛

糖基化血红蛋白将通过高效液相色谱法进行检测。 葡萄糖、总胆固醇、高密度脂蛋白和甘油三酯将通过酶促比色法测量。 LDL胆固醇将通过Friedewald方程计算。 肌酐将通过动力学比色法评估，以使用 Cockcroft-Gault 计算肌酐清除率。 丙酮酸、谷草转氨酶和丙氨酸转氨酶用紫外动力学法测定。 通过酶动力学方法评估尿酸和乳酸。 酶联免疫吸附试验检测丙二醛。

基因分型 将使用 DNA 多样本试剂盒 (Applied Biosystems®) 从全血中分离脱氧核糖核酸 (DNA)，并将样本储存在 -20 摄氏度，直到在研究实验室（联邦大学分子生物学实验室）进行扩增测定。

TAS1R2 基因中的 Ile191Val (rs35874116) 多态性将通过在 ABI 7000 序列检测系统（Applied Biosystems）上使用 TaqMan 等位基因鉴别分析（ABI 编号 C_55646_20；Applied Biosystems，Foster City，CA）和实时聚合酶链反应进行检测. 聚合酶链式反应条件为95℃10min，95℃15s，60℃1min，40个循环。 将通过在每个 30 孔板中使用阳性对照受试者以及重新运行 ≥ 5% 的样本（100% 一致）来验证基因分型。

食欲和适口性评估 视觉模拟量表将用于评估饥饿感、饱腹感、饱腹感、预期食物消耗量和测试溶液的适口性，食欲感觉将用于评估溶液的适口性、味道、回味、气味和视觉吸引力。

两种评级均由视觉模拟量表组成，该量表是一种预先测量的 100 毫米量表，可用于直观地表示症状强度。 每个量表都通过相反的感受描述符固定在其末端。 志愿者将被要求通过在最能代表对解决方案的给定感受强度的线上放置一个垂直标记来描述他们的感受。 测量此标记与适当锚点的距离，然后转换为分数，范围从 0（无或最佳）到 10（最差）。

1 型糖尿病管理 研究人员仅将志愿者纳入使用胰岛素输注泵或胰岛素类似物（基础：地特胰岛素或甘精胰岛素；推注：赖脯胰岛素、谷赖胰岛素或门冬胰岛素）的基础推注方案中，以避免实验期间的葡萄糖波动。

将指示所有志愿者不要修改基础胰岛素剂量，也不要服用早晨的大剂量胰岛素。 受试者将在大约 7 小时进入研究中心，并将测试他们的毛细血管血糖，如果血糖目标水平在 70 至 200 mg/dL 之间，则将进行实验。

在实验前和实验过程中，我们将使用 Accu-Check® Active，Roche 测试毛细血管血糖水平 5 次，并在葡萄糖≥350 mg/dL 时取消。 在这种情况下，我们将采用推注校正胰岛素剂量。

统计 统计分析将使用统计软件和 5% 的显着性水平进行。

定量变量将被描述为平均值和标准偏差。 Mann-Whitney检验将用于组间比较，Wilcoxon检验用于比较各组溶液的效果。 还将使用 Spearman 的相关系数和回归。